血清丙氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定作业指导书Word文档下载推荐.docx

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2～8℃保存：

<

10%；

15～25℃保存：

17%；

标本稳定性：

-20℃保存至少可稳定4周。

4.标本运输：

常温条件下保存运输。

5.标本拒收标准：

标本溶血、细菌污染的标本。

6.实验材料

6.1试剂申能ALT测定试剂盒（货号：

141270171701试剂16×

64ml试剂26×

16ml）

6.1.1试剂组成

试剂1（R1）：

Tris缓冲液pH7.5100mmol/L

L-丙氨酸500mmol/L

LDH（乳酸脱氢酶）≥1200U/L

试剂2（R2）：

a-酮戊二酸15mmol/L

NADH0.18mmol/L

磷酸吡哆醛试剂：

Good’s缓冲液pH9.60.7mmol/L

磷酸吡哆醛0.09mmol/L

6.1.2试剂准备：

试剂为即用式。

6.1.3试剂稳定性与贮存：

试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

6.1.4变质指示：

当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

6.1.5注意事项：

试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。

不可入口！

避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2校准品：

使用DiaSys公司提供的TruCalU校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3质控品：

具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

7.仪器：

奥林巴斯AU1000生化分析仪

8.操作步骤

8.1项目基本参数：

参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2仪器操作步骤：

参见生化检验奥林巴斯AU1000生化分析仪操作规程.SOP文件

9.检验结果的判断与分析

10.质量控制：

在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11.计算方法：

以TruCalU复合校准品ALT校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。

12.参考值范围[4]

不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛

女性<

31U/L10～35U/L

男性<

41U/L10～50U/L

参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

13.临床意义[1,2]：

丙氨酸氨基转移酶（ALT）旧称谷丙转氨酶（GPT），天门冬氨酸氨基转移酶（AST）旧称谷草转氨酶（GOT）。

它们是氨基转移酶类的典型代表。

氨基转移酶催化氨基从氨基酸转移给-酮酸的反应。

ALT是肝脏的特异性酶，仅在肝胆疾病时显著升高。

而AST水平的升高和心肌或骨骼肌损伤，以及肝组织损害等都有关。

因此同时进行ALT和AST的检测，可用于鉴别肝损伤和心肌或骨骼肌损伤。

AST/ALT比率用于肝病的鉴别诊断。

比率<

1预示中度的肝损伤；

比率>

1和严重肝病有关，常见慢性肝病。

14.操作性能

14.1线性范围4～800U/L

14.2精密度：

精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000批内精密度小于3%，总精密度小于3%。

用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

不含磷酸吡哆醛

批内

精密度

n=20

（U/L）

s

CV

（%）

天间

样品1

22.8

0.70

3.08

22.2

1.38

6.22

样品2

42.6

0.68

1.60

44.8

1.17

2.62

样品3

99.3

0.92

101

1.02

1.00

含磷酸吡哆醛

批间

33.3

0.99

2.96

33.8

1.25

3.71

72.1

1.36

1.88

72.0

2.04

2.83

133

1.76

1.32

128

2.77

2.16

14.3方法学比较：

本公司不含磷酸吡哆醛的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x），同时对78个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：

y=1.00x+0.00U/L；

r=0.999。

本公司含磷酸吡哆醛的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x），同时对80个样品进行ALT活力检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：

r=0.994。

14.4灵敏度：

本试剂的检测限为4U/L。

14.5病人结果可报告范围4U/L-800U/L

15.超出范围结果处理本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。

当样品测定值超过上限时，应将样品用9g/L氯化钠溶液作1：

9稀释，重新测定，结果乘以10。

16.病危报警值的处理

17.方法局限性

17.1本法对ALT活力检测的最大ΔA/min在340、334nm为0.16,在365nm为0.08。