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“现代生物科技”模块(10分)

日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献,获得2008年度诺贝尔化学奖。

下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的

培育过程示意图,据图回答:

(1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为①基因。

图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因和质粒。

限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后形成的黏性末端:

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是③。

(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是④。

(4)依据GFP的特性,该蛋白在生物工程中的应用价值是⑤

A.作为标记蛋白,研究细胞的转移B.作为标记基因,研究基因的表达

C.注入肌肉细胞,繁殖发光小白鼠D.标记噬菌体外壳,示踪DNA路径

(5)在实验过程中往往一次需要做多个核移植,为了从母猪体内一次获得多个卵细胞,往往需要向母体内注入的激素是⑥。

在培养重组细胞时,培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和⑦等。

(6)以上培育过程中应用到的生物技术有⑧等。

题组2:

:

生活饮用水巳经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理,含微生物很少,但当其水源水不洁或处理达不到要求时,仍然会含相当量的微生物甚至含有致病性微生物。

供水管道破损及二次供水等环节也可能导致生活饮用水的污染。

因此生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。

我国生活饮用水水质标准(GB5749—85)中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL,总大肠菌群不得大于3个/L。

(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为 ① 。

(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?

 ② 为什么?

 ③ 

(3)如分别取0.1mL已稀释102倍的水样分别涂布到四个琼脂固体培养基的表面进行培养,培养基记录到大肠杆菌的菌落数分别为161、155、158、170,则每升原水样中大肠杆菌数为 ④ 。

(4)纯化大肠杆菌时使用的培养基一般用 ⑤ 法灭菌, ⑥ (可/不可)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。

(5)下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤,下列相关叙述正确的是

A.步骤

倒平板操作时,倒好后应立即将其倒过来放置

B.步骤②接种环火焰上灼烧后迅速沾取菌液后平板划线

C.步骤③多个方向划线,使接种物逐渐稀释,培养后出现单个菌落

D.步骤④培养箱培养后可用来对X细菌进行计数

(6)下列有关微生物培养的叙述错误的是

A.在对微生物进行培养前,需要对微生物和培养基进行灭菌

B.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源

C.测定土壤样品中的细菌数目,常用稀释涂布平板法进行菌落计数

D.酵母菌发酵过程产生的酒精,对其他微生物生长有一定的抑制作用

“现代生物科技专题”模块(10分)

现代生物技术在农业生产、优良动物繁育、疾病诊治等方面,展现出诱人的前景。

请根据以下材料回答相关问题:

材料一经过一个世纪的发展,植物克隆技术解决了人类生存的关键问题(如粮食问题、花卉苗木生产等),为人类创造了巨大的财富。

(1)用植物花药进行离体培养时,要经过①、②过程才能培养成单倍体幼苗,在此过程需要适当配比的③进行诱导。

材料二中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作,通过将大熊猫的细胞核植入兔子的去核卵母细胞中,在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎,这表明我国的大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。

(2)克隆大熊猫过程中使用的生物技术手段有④和⑤。

(3)如果多个供体细胞来自同一只大熊猫,培育的这些大熊猫在性状上也不完全相同,分析其原因,下列错误的是⑥

A.性状变异可由环境条件引起B.基因可能会发生突变

C.受体细胞的细胞质基因不同D.细胞核基因发生了重组

材料三转入人胰岛素原基因(已知序列)的大肠杆菌,可以合成人胰岛素原,通过该项转基因技术可有效地缓解临床上胰岛素不足的难题,从而为糖尿病患者带来福音。

(4)人的胰岛素原基因能在大肠杆菌中合成出胰岛素原,说明生物共用一套⑦。

(5)在上述转基因操作过程中,下列说法错误的是⑧

A

.人胰岛素原基因用化学方法合成,并用PCR技术扩增

B.重组质粒导入受体细胞时通常用氯化钙处理大肠杆菌

C.DNA连接酶能使

不同脱氧核苷酸的碱基与脱氧核糖连接

D.胰岛素原需进一步加工后可获得具有生物活性的胰岛素

题组3:

“生物技术实践”模块(共10分)

泡菜是人们喜爱的开胃食品,某学校研究小组实践了泡菜的制作和亚硝酸盐的测定。

请分析回答下列问题:

(1)泡菜腌制是在①的条件下,微生物利用菜中的糖和其他营养物进行发酵,产生有机酸和醇类物质,发酵微生物主要是②和③。

为了减少腌制时间,可在坛内加入一些④。

(2)下列不属于专用泡菜坛坛口水封凹槽设计意义的是⑤

A.排气减压

B.隔绝空气

C.防止杂菌污染

D.防止泡菜汁外溢

(3)亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸反应,再与N-1-萘基乙二胺偶联,其产物颜色是⑥。

A.红黄色B.橘黄色C.紫红色D.蓝色

(4)亚硝酸盐可采用⑦法定量检测,其中要利用亚硝酸钠标准溶液建立标准曲线,其横坐标为亚硝酸钠质量,纵坐标为⑧。

“现代生物科技专题”模块(共10分)

下图是某研究小组利用基因工程技术将抗农药马拉硫磷小菜蛾的羧酸酯酶(CarE)基因导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图。

据图回答:

(1)过程①是以mRNA为模板,在①酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在②的作用下合成双链DNA,从而获得所需基因。

(2)过程②需要使用③扩增目的基因,需要在反应体系中添加的有机物质有引物、模板DNA、4种脱氧核糖核苷三磷酸和④。

(3)CarE基因和表达载体用⑤切割后,通过DNA连接酶连接,以构建重组表达载体。

(4)过程③是将目的基因导入大肠杆菌细胞,在基因工程中通常用什么方法?

A.Ca2+处理大肠杆菌B.显微注射法

C.农杆菌转化法D.基因枪法

(5)过程④可利用⑦(分子检测技术)鉴定目的基因是否已导入受体细胞。

(6)以上过程中,⑧是基因工程的核心步骤。

A.过程①和②B.构建重组表达载体

C.过程③D.过程④

题组4:

利用制糖废弃物糖渣生产工业酒精,是一种既能缓解能源危机,也能有效降低环境污染的符合可持续发展战略的清洁能源技术。

下面是利用糖渣来生产乙醇的流程:

微生物微生物蒸馏

12提纯等

(1)为获取微生物1的菌种,应选取富含①的土壤并制备适宜浓度梯度的悬浮液,在无菌条件下用②将悬浮液涂布在相应的固体培养基上,经培养获得单菌落。

(2)随后挑取部分菌落,接种到③培养基中进行扩大培养得大量微生物1。

同时,为了提高生产效率,也可大量提取微生物1所含的酶,并将该酶固定在适宜介质上制成④。

(3)微生物2主要是⑤。

为了确保酒精发酵正常进行,发酵时要注意⑥。

发酵获得的低浓度酒精经蒸馏、提纯等加工,就可以得到浓度大于90%的工业酒精。

(4)下列有关涂布分离法的叙述错误的是(⑦)

A.为减少细菌受损,稀释或取样时应尽量避免振荡

B.接种前,涂布工具需先在酒精灯火焰上灼烧

C.涂布分离法比划线分离法更易获得大量单菌落

D.培养后菌落在整个平板表面分散均匀

(5)下列有关固定化酶的说法中错误的是(⑧)

A.固定化酶可以重复利用,降低生产成本

B.固定化酶既易溶于水又有酶的活性

C.固定化酶的不足是由于与底物的接触面积下降导致催化效率有所下降

D.固定化酶活性的发挥需适宜的温度和pH值

“现代生物科技”模块(10分)

请回答下列有关基因工程和胚胎工程方面的问题:

(1)科学家以卡那霉素抗性为标记基因,将来自加州月桂的硫酯酶编码基因(te)转入双低油菜品种中,获得了高油酸和高豆蔻酸转基因油菜新品种。

在获取硫酯酶编码基因(te)的过程中,常使用①对供体的核酸分子进行特异性切割。

为了提高重组DNA分子导入细菌的概率,一般常用②处理。

最终的受体细胞表达产生

,标志转基因初步成功。

(2)“二娃”政策实施后,大量高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎:

要使精子和卵细胞在体外成功融合,首先须采集到成熟的卵细胞,此时需要用④(激素)处理女方,达到⑤的目的;

同时对于男方提供的精子,须经系列处理与培养,以达到⑥状态。

受精卵形成后,经人工培养至特定阶段,借助胚胎移植技术回输至女方体内,经过自然孕育,即得试管婴儿。

(3)下列关于基因工程的叙说正确的是(⑦)

A.标记基因在受体细胞中的表达标志转基因育种成功

B.限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶

C.卡那霉素抗性基因的表达提高了目的基因的导入概率

D.虽然目的基因来源于自然界,但依然存在安全性问题

(4)关于胚胎工程的正确叙述是(⑧)

A.“试管婴儿”体外受精阶段,为提高受精概率,宜将精子与卵细胞等量培养

B.多胚胎移植在提高妊娠率的同时,常可获得性状完全相同的孩子

C.胚胎移植回输时,受体仅需要做同步发情处理即可

D.在胚胎干细胞培养过程中,加入的饲养层细胞分泌一些物质既能抑制细胞分化又能促进细胞生长

题组5:

果酒果醋作为一种新型调味品或饮料受到广大消费者的喜爱。

某研究小组利用苹果进行果酒果醋的制作,请回答以下问题。

(1)为提高苹果的利用率,工厂化生产时,可加入果胶酶和纤维素酶,其中果胶酶可来自

①等微生物。

由于酶在水溶液中不稳定,因此常将酶固定在某种介质上制成②。

(2)下列有关果酒发酵和果醋发酵的叙述正确的是③

A.苹果汁装入发酵瓶时,为了造成无氧环境,有利于发酵,最好将瓶装满

B.先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵

C.果酒发酵菌种无具膜细胞器

D.适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖

(3)醋化醋杆菌是严格好氧细菌,广泛存在于自然界中,为了能从野生菌群样液中更好的分离出菌种,常用④法,通常对获得的纯菌种可以依据⑤的形状、大小等特征进行初步的鉴定,分离得到的菌种可以在⑥进行扩大培养,再接种到发酵瓶中。

该发酵过程理论上⑦(填“有”、“无”)CO2产生。

(4)在上述细菌培养过程中,有关操作正确的是⑧

A.涂布器只能用火焰灼烧进行灭菌

B.培养基分装到培养皿后进行灭菌

C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行

D.分离得到的菌落应先接种在平板上,培养24h后,置于4℃冰箱保存

“现代生物科技”模块(10分

随着科学技术的发展,人们可以根据人类的需求来改造生物的性状,目前已在许多领域取得了可喜的成果,下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解,请据图分析回答问题。

(1)在此工程中涉及的现代生物技术主要有___________________________。

(2)在基因工程中,②表示__________;

②在进入③之前要用___________________________等工具来构建基因表达载体,能实现②进入③的常用方法是_____________。

(3)图中①一般经____________处理可以得到③,从③到④的过程中一般采用未受精的卵细胞去核后作为受体,不用普通的体细胞,原因是_____________________________________。

(4)从下图A~D中选出④到⑤过程中正确的操作方法是_____,把⑤送入⑥的最佳时期是_____________期。

题组1答案

①脲酶②参与了氮循环(或维持氮平衡)

(分子式、符号、条件缺一不可)

④不能 ⑤70%酒精⑥无菌水⑦A⑧B

题组2答案

(1)涂布分离法

(2)需要因为需要判断培养基是否被污染

(3)1.61×

108

(4)压蒸汽灭菌不可

(5)C(6)A

①脱分化②再分化③营养物质和生长调节剂④⑤核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术(答对其中两个即可)⑥D⑦遗传密码⑧C

题组3答案

(1)①无氧②假丝酵母(或酵母菌)③乳酸菌(②③可调换)④(腌制过的)泡菜汁

(2)⑤D(3)⑥C(4)⑦光电比色⑧光密度值

①逆转录(1分)②DNA聚合酶(1分)③PCR(1分)④耐热性的DNA聚合酶(1分)

⑤相同的限制性核酸内切酶(1分)⑥A(2分)⑦DNA分子杂交(1分)⑧B(2分)

题组4答案

“生物技术实践’’模块(10分)

纤维素或糖渣(1分)玻璃刮刀或三角刮刀(1分)液体或发酵(1分)

固定化酶(1分)酵母菌(1分)确保无氧(1分)

A(2分)B(2分)

“现代生物科技”模块(10分) 

(1) 

限制性核酸内切酶(1分)

氯化钙(1分)

硫酯酶(1分)

(2)

促性腺激素(1分)

超数排卵(1分)

获能(1分)

(3) D(2分)(4)D(2分)

题组5答案

(1)黑曲霉苹果青霉固定化酶

(2)D

(3)涂布分离法菌落液体培养基无

(4)C

(1)核移植技术、动物细胞培养等

(2)目的基因限制性核酸内切酶、DNA连接酶和载体显微注射法

(3)胰蛋白酶卵细胞大易操作,体细胞的细胞核在卵细胞的细胞质中才能表现出全能性(4)D桑椹胚或囊胚

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