分子生物学试题及答案 一名词解释 1cDNA与cccDNWord文档下载推荐.docx
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是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TATA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。
12.DNA探针:
是带有标记的一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。
13.SD序列:
是核糖体与mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。
14.单克隆抗体:
只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。
15.考斯质粒:
是经过人工构建的一种外源DNA载体,保留噬菌体两端的COS区,与质粒连接构成。
16.蓝-白斑筛选:
含LacZ基因(编码β半乳糖苷酶)该酶能分解生色底物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)产生蓝色,从而使菌株变蓝。
当外源DNA插入后,LacZ基因不能表达,菌株呈白色,以此来筛选重组细菌。
称之为蓝-白斑筛选。
17.顺式作用元件:
在DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。
18.Klenow酶:
DNA聚合酶I大片段,只是从DNA聚合酶I全酶中去除了5’→3’外切酶活性
19.锚定PCR:
用于扩增已知一端序列的目的DNA。
在未知序列一端加上一段多聚dG的尾巴,然后分别用多聚dC和已知的序列作为引物进行PCR扩增。
20.融合蛋白:
真核蛋白的基因与外源基因连接,同时表达翻译出的原基因蛋白与外源蛋白结合在一起所组成的蛋白质。
蛋白质的生物合成
(一)名词解释
1.翻译(translation):
以mRNA为模板,氨酰-tRNA为原料直接供体,在多种蛋白质因子和酶的参与下,在核糖体上将mRNA分子上的核苷酸顺序表达为有特定氨基酸顺序的蛋白质的过程。
2.密码子(codon):
mRNA中碱基顺序与蛋白质中氨基酸顺序的对应关系是通过密码实现的,mRNA中每三个相邻的碱基决定一个氨基酸,这三个相邻的碱基称为一个密码子。
3.密码的简并性(degeneracy):
—个氨基酸具有两个以上密码子的现象。
4.同义密码子(synonymcodon):
为同—种氨基酸编码的各个密码子,称为同义密码了。
5.变偶假说(wobblehypothesis):
指反密码子的前两个碱基(3’-端)按照标准与密码子的前两个碱基(5’-端)配对,而反密码子中的第三个碱墓则有某种程度的变动,使其有可能与几种不同的碱基配对。
6.移码突变(frame-shiftmutation):
在mRNA中,若插入或删去一个核苷酸,就会使读码发错误,称为移码,由于移码而造成的突变、称移码突变。
7,同功受体(isoacceptor):
转运同一种氨基酸的几种tRNA称为同功受体。
8.反密码子(anticodon):
指tRNA反密码子环中的三个核苷酸的序列,在蛋白质合成过程中通过碱基配对,识别并结合到mRNA的特殊密码上。
9.多核糖体(polysome):
mRNA同时与若干个核糖体结合形成的念珠状结构,称为多核糖体。
核酸的生物合成
1.中心法则(centraldogma):
生物体遗传信息流动途径。
最初由Crick(1958)提出,经后人的不断补充和修改,现包括反转录和RNA复制等内容。
2.半保留复制(简称复制)(semiconservativereplication):
亲代双链DNA以每条链为模板,按碱基配对原则各合成一条互补链,这样一条亲代DNA双螺旋,形成两条完全相同的子代DNA螺旋,子代DNA分子中都有一条合成的“新”链和一条来自亲代的旧链,称为半保留复制。
3.DNA聚合酶(DNApolymerase):
指以脱氧核苷三磷酸为底物,按5’→3’方向合成DNA的一类酶,反应条件:
4种脱氧核苷三磷酸、Mg+、模板、引物。
DNA聚合酶是多功能酶,除具有聚合作用外,还具有其它功能,不同DNA聚合酶所具有的功能不同。
4.解旋酶(helicase):
是一类通过水解ATP提供能量,使DNA双螺旋两条链分开的酶,每解开一对碱基,水解2分子ATP。
5.拓扑异构酶(topoisomerase):
是一类引起DNA拓扑异构反应的酶,分为两类:
类型I的酶能使DNA的一条链发生断裂和再连接,反应无需供给能量,类型Ⅱ的酶能使DNA的两条链同时发生断裂和再连接,当它引入超螺旋时,需要由ATP供给能量。
6.单链DNA结合蛋白(single-strand
bindingprotein,SSB):
是一类特异性和单链区DNA结合的蛋白质。
它的功能在于稳定DNA解开的单链,阻止复性和保护单链部分不被核酸酶降解。
7.DNA连接酶(DNAligase):
是专门催化双链DNA中缺口共价连接的酶,不能催化两条游离的单链DNA链间形成磷酸二酯键。
反应需要能量。
8.引物酶及引发体(primase&primosome):
以DNA为模板,以核糖核苷酸为底物,在DNA合成中,催化形成RNA引物的酶称为引物酶及引物体。
大肠杆菌的引物酶单独没有活性,只有与其它蛋白质结合在一起,形成一个复合体,即引发体才有生物活性。
9.复制叉(replicationfork):
复制中的DNA分子,末复制的部分是亲代双螺旋,而复制好的部分是分开的,由两个子代双螺旋组成,复制正在进行的部分呈丫状叫做复制叉。
10.复制眼θ结构:
在一段DNA上,正在复制的部分形成眼状结构。
复制眼在环状DNA上形成的结构与字母θ相象,所以叫θ结构。
11.前导链(1eadingstrand):
在DNA复制过程中,以亲代链(3’→5’为模板时,子代链的合成(5’→3’)是连续的.这条能连续合成的链称前导链。
12.冈崎片段(Okazakifragment)、后随链(1aggingstrand):
在DNA复制过程中,以亲代链(5’→3’)为模板时,子代链的合成不能以3’→5’方向进行,而是按5’→3’方向合成出许多小片段,因为是冈崎等人研究发现,因此称冈崎片段。
由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。
13.半不连续复制(Semidiscontinuousreplication):
在DNA复制过程中,一条链的合成是连续的,另一条链的合成是不连续的,所以叫做半不连续复制。
14.逆转录(reversetranscription):
以RNA为模板合成DNA的过程。
15.逆转录酶(reversetranseriptase):
催化以RNA为模板合成DNA的逆转录过程的酶。
Temin(1960)首次从劳氏肉瘤病毒中发现。
逆转录酶具有多种酶活性:
依赖RNA的DNA聚合酶活性;
依赖DNA的DNA聚合酶活性,RNA水解酶活性,DNA合成方向5’→3’。
合成时需要引物与模板。
16.突变(mutation):
基因组DNA顺序上的任何一种改变都叫做突变。
分点突变和结构畸变。
17.点突变(Pointmutation):
是指一个或几个碱基对被置换(replacement),这种置换又分两种形式:
转换(transition)一--指用一个嘌呤碱置换另一个嘌呤碱,一个嘧啶碱置换另一个嘧啶碱;
颠换(transversion)一--指用嘌呤碱置换嘧啶碱或用嘧啶碱置换嘌呤碱。
18.结构畸变:
基因中的缺口、或插入(insertion)或缺失(deletion)某些碱基造成移码突变使DNA的模板链失去功能。
19.诱变剂(mutagen):
使基因组发生突变的物理、化学、生物因素叫诱变剂。
20.修复(repair):
除去DNA上的损伤,恢复DNA的正常结构和功能是生物机体的一种保护功能。
21.光裂合酶修复(又称光复活)(photoreactivation):
可见光将光裂合酶激活,它分解DNA上由紫外线照射而形成的嘧啶二聚体,使它们恢复成两个单独的嘧啶碱。
22.切除修复(excisionrepair):
在一系列酶的作用下,将DNA分子中受损伤部分切除,以互补链为模板,合成出空缺的部分,使DNA恢复正常结构的过程。
23.重组修复(recombinationrepair):
DNA在有损伤的情况下也可以复制,复制时子代链跃过损伤部位并留下缺口,通过分子间重组,从完整的另一条母链上将相应的核苷酸序列片段移至子链缺口处,然后用再合成的多核苷酸的序列补上母链的空缺,此过程称重组修复。
24.诱导修复和应急反应(inductionrepairandSOSresponse)(SOS修复):
由于DNA受到损伤或复制系统受到抑制所诱导引起的一系列复杂的应急效应,称为应急反应。
SOS反应主要包括两个方面:
DNA损伤修复(SOS修复或称诱导修复)和诱变效应。
SOS修复是一种易出差错的修复过程,虽能修复DNA的损伤而避免死亡。
但却带来高的变异率。
25.DNA重组(recombination):
DNA重组是指在真核生物减数分裂过程中,细菌细胞的转化中、病毒转导中等发生的DNA片段的交换或插入。
26.基因工程(又称基因重组技术)(gene/geneticengineering):
是将外源基因经过剪切加工,再插入到一个具有自我复制能力的载体DNA中,将新组合的DNA转移到一个寄主细胞中,外源基因就可以随着寄主细胞的分裂进行繁殖,寄主细胞也借此获得外源基因所携带的新特性。
27.转录(transcription):
由依赖于DNA的RNA聚合酶催化,以DNA的一条链的一定区段为模板,按照碱基配对原则,合成一条与DNA链互补的RNA链的过程。
28.模板链(templatestrand)[又称负(-)链,反意义链(antisensestrand)]:
转录过程中用作模板的这条DNA链,称模板链。
29.非模板链(nontemplatestrand)[又称正(+)链,编码链(codingstrand),有意义链(sensestrand)]:
与模板链互补的那条DNA链,称非模板链。
30.不对称转录(asymmetrictranscription):
因为RNA的转录只在DNA的任一条链上进行,所以把RNA的合成叫做不对称转录。
31.启动子(promoter):
DNA链上能指示RNA转录起始的DNA序列称启动子。
32.转录单位(transcriptionunit):
RNA的转录只在DNA的一个片段上进行,这段DNA序列叫转录单位。
33.内含子(intron):
真核生物基因中,不为蛋白质编码的、在mRNA加工过程中消失的DNA序列,称内含子。
34.外显子(exon):
真核生物基因中,在mRNA上出现并代表蛋白质的DNA序列,叫外显子。
35.转录加工(post-transcriptionalprocessing):
细菌中很多RNA分子和几乎全部真核生物的RNA在合成后都需要不同程度的加工,才能形成成熟的RNA分子,这个过程叫转录后加工。
36.核内不均一RNA(hnRNA):
是真核生物细胞核内的mRNA前体分子,分子量较大,并且不均一,含有许多内含子。
37.RNA的复制(RNAreplication):
某些病毒RNA既可以做为模板合成病毒蛋白质又可在RNA复制酶(RNAreplicase)的催化下,以自身RNA为模板,合成互补的RNA新链,合成方向5'
→3’,这一过程叫RNA复制。
二、填空
1.DNA的物理图谱是DNA分子的(限制性内切酶酶解)片段的排列顺序。
2.RNA酶的剪切分为(自体催化)、(异体催化)两种类型。
3.原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1)、(IF-2)和(IF-3)。
4.蛋白质的跨膜需要(信号肽)的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质)。
5.启动子中的元件通常可以分为两种:
(核心启动子元件)和(上游启动子元件)。
6.分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学)、(基因表达与调控)、(DNA重组技术)三部
7.证明DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠)、(T2噬菌体感染大肠杆菌)这两个实验中主要的论点证据是:
(生物体吸收的外源DNA改变了其遗传潜能)。
8.hnRNA与mRNA之间的差别主要有两点:
(hnRNA在转变为mRNA的过程中经过剪接,)、
(mRNA的5′末端被加上一个m7pGppp帽子,在mRNA3′末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴)。
9.蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对DNA的利用来说是一种经济的方法)、(可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响)、(活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭)。
10.蛋白质折叠机制首先成核理论的主要内容包括(成核)、(结构充实)、(最后重排)。
11.半乳糖对细菌有双重作用;
一方面(可以作为碳源供细胞生长);
另一方面(它又是细胞壁的成分)。
所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;
同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。
有G时转录从(S2)开始,无G时转录从(S1)开始12.DNA重组技术也称为(基因克隆)或(分子克隆)。
最终目的是(把一个生物体中的遗传信息DNA转入另一个生物体)。
典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤:
①提取供体生物的目的基因(或称外源基因),酶接连接到另一DNA分子上(克隆载体),形成一个新的重组DNA分子。
②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。
③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。
④对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。
13、质粒的复制类型有两种:
受到宿主细胞蛋白质合成的严格控制的称为(严紧型质粒),不受宿主细胞蛋白质合成的严格控制称为(松弛型质粒)。
14.PCR的反应体系要具有以下条件:
a、被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物(约20个碱基左右)。
b、具有热稳定性的酶如:
TagDNA聚合酶。
c、dNTP
d、作为模板的目的DNA序列
15.PCR的基本反应过程包括:
(变性)、(退火)、(延伸)三个阶段。
16、转基因动物的基本过程通常包括:
①将克隆的外源基因导入到一个受精卵或胚胎干细胞的细胞核中;
②接种后的受精卵或胚胎干细胞移植到雌性的子宫;
③完成胚胎发育,生长为后代并带有外源基因;
④利用这些能产生外源蛋白的动物作为种畜,培育新的纯合系。
17.杂交瘤细胞系的产生是由(脾B)细胞与(骨髓瘤)细胞杂交产生的,由于(脾细胞)可以利用次黄嘌呤,(骨细胞)提供细胞分裂功能,所以能在HAT培养基中生长。
18.随着研究的深入第一代抗体称为(多克隆抗体)、第二代(单克隆抗体)、第三代(基因工程抗体)。
19.目前对昆虫病毒的基因工程改造主要集中于杆状病毒,表现在引入(外源毒蛋白基因);
(扰乱昆虫正常生活周期的基因);
(对病毒基因进行修饰)。
20.哺乳类RNA聚合酶Ⅱ启动子中常见的元件TATA、GC、CAAT所对应的反式作用蛋白因子分别是(TFIID)、(SP-1)和(CTF/NF1)。
21.RNA聚合酶Ⅱ的基本转录因子有、TFⅡ-A、TFⅡ-B、TFII-D、TFⅡ-E他们的结合顺序是:
(D、A、B、E)。
其中TFII-D的功能是(与TATA盒结合)。
22.与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与DNA结合的功能域常见有以下几种(螺旋-转角-螺旋)、(锌指模体)、(碱性-亮氨酸拉链模体)。
23.限制性内切酶的切割方式有三种类型分别是(在对称轴5'
侧切割产生5'
粘端)、(在对称轴3'
侧切割产生3'
粘端)(在对称轴处切割产生平段)。
24.质粒DNA具有三种不同的构型分别是:
(SC构型)、(oc构型)、(L构型)。
在电泳中最前面的是(SC构型)。
25.外源基因表达系统,主要有(大肠杆菌)、(酵母)、(昆虫)和(哺乳类细胞表)。
26.转基因动物常用的方法有:
(逆转录病毒感染法)、(DNA显微注射法)、(胚胎干细胞法)。
1.蛋白质的生物合成是以__mRNA为模板,以__
氨酰-tRNA__为原料直接供体,以__核糖体__为合成杨所。
2.生物界共有_64__个密码子,其中__61_个为氨基酸编码,起始密码子为_AUG_;
终止密码子为_UAA_、UAG_、_UGA__。
3.原核生物的起始tRNA以_tRNAf_表示,真核生物的起始tRNA以tRNAi_表示,延伸中的甲硫氨酰tRNA以_tRNAm__表示。
4.植物细胞中蛋白质生物合成可在____核糖体___、_线粒体____和__叶绿体___三种细胞器内进行。
5.延长因子T由Tu和Ts两个亚基组成,Tu为对热___不稳定___蛋白质,Ts为对热__稳定_蛋白质。
6.原核生物中的释放因子有三种,其中RF-1识别终止密码子_UAA_、_UAG__;
RF-2识别_UAA_、_UGA_;
真核中的释放因子只有_RF_一种。
7.氨酰-tRNA合成酶对___氨基酸__和相应的__tRNA__有高度的选择性。
8.原核细胞的起始氨基酸是__甲酰甲硫氨酸___,起始氨酰-tRNA是___甲酰甲硫氨酰-tRNA___。
9.原核细胞核糖体的__小___亚基上的___16SrRNA___协助辨认起始密码子。
l0.每形成一个肽键要消耗__4_个高能磷酸键,但在合成起始时还需多消耗__1___个高能磷酸键。
11.肽基转移酶在蛋白质生物合成中的作用是催化___肽键__形成和_肽酰-tRNA___的水解。
12.肽链合成终止时,__终止因子__进人“A”位,识别出_终止密码子_,同时终止因子使_肽基转移酶__的催化作用转变为_水解作用。
13.原核生物的核糖体由__30S___小亚基和_50S__大亚基组成,真核生物核糖体由_40S__小亚基和__60S___大亚基组成。
14.
蛋白质中可进行磷酸化修饰的氨基酸残基主要为__Ser___、__Thr___、___Tyr____。
(三)填空题
1.Meselson-Stahl的DNA半保留复制证实试验中,区别不同DNA用__同位素示踪__方法。
分离不同DNA用_超速离心__方法,测定DNA含量用__紫外分光光度_方法,
2.DNA聚合酶I(E.coli)的生物功能有_聚合作用___、__5’→3’外切酶作用__和_3’→5’外切酶__作用。
用蛋白水解酶作用DNA聚合酶I,可将其分为大、小两个片段,其中__大___片段叫Klenow片段,具有__5’→3’聚合酶作用__和__3’→5’外切酶____作用,另外一个片段具有__5’→3’外切酶__活性。
3.在E.coli中,使DNA链延长的主要聚合酶是_DNA聚合酶Ⅲ__,它由_7__亚基组成。
DNA聚合酶Ⅱ主要负责DNA的_修复_作用。
4.真核生物DNA聚合酶有__DNA聚合酶α_____,___DNA聚合酶β_,__DNA聚合酶γ____,__DNA聚合酶δ___。
其中在DNA复制中起主要作用的是___DNA聚合酶α____和___DNA聚合酶σ__。
5.解旋酶的作用是___使DNA双螺旋打开____,反应需要ATP_提供能量,结合在后随链模板上的解旋酶,移动方向__5’→3’____,结合在前导链的rep蛋白,移动方向___3’→5’____。
6.在DNA复制过程中,改变DNA螺旋程度的酶叫__拓扑异构酶___。
7.SSB的中文名称___单链DNA结合蛋白____,功能特点是___使单链保持伸长状态____。
8.DNA连接酶只能催化_双__链DNA中的缺口形成3’,5’-磷酸二酯键,不能催化两条游离的单链间形成3’,5’-磷酸二酯键,真核生物DNA连接酶以_ATP_作为能源,大肠杆菌则以NAD+作为能源,DNA连接酶在DNA_复制_、___修复_、_重组__中起作用。
9.DNA生物合成的起始,需要一段___RNA____为引物,引物由__引物_____酶催化完成,该酶需与—些特殊___蛋白质____结合形成___引物体____复合物才有活性。
10.DNA生物合成的方向是5’→3’,冈奇片段合成方向是5’→3’。
11.由逆转录酶所催化的核酸合成是以_RNA__为模板,以__三磷酸脱氧核苷酸(dNTP)__为底物,产物是__与RNA互补的DNA链__。
12.DNA突变主要分为__点突变_____和__结构畸变_____两大类。
13.诱变剂大致分为__物理诱变剂_____、_化学诱变剂______、__生物诱变剂_____三种类型。
14.RNA生物合成中,RNA聚合酶的活性需要__DNA_____模板,原料是__ATP__、__GTP__、__UTP_、___CTP。
15.大肠杆菌RNA聚合酶为多亚基酶,亚基组成α2ββ’δ_,称为__全__酶,其中_α2ββ’__亚基组成称为核心酶,功能__合成RNA链__;
σ亚基的功能__σ保证RNA聚合酶对启动子的特异识别。
16.用于RNA生物合成的DNA模板链称为_反意义链__或__负链___。
17.RNA聚合酶沿DNA模板3’→5’方向移动,RNA合成方向5’→3’___。
18.真核生物RNA聚合酶共三种RNA聚合酶I、RNA聚合酶Ⅱ、RNA聚合酶Ⅲ_,它们分别催化_rRNA__、mRNA__和tRNA5SrRNA__的生物合成。
19.某DNA双螺旋中,单链5’…ATCGCTCGA…3’为有意义链,若转录mRNA,其中碱其排列顺序为5’…__AUCGCUCGA___…3’。
20;
能形成DNA--RNA杂交分子的生物合成过程有__转录_____、___逆转录____。
形成的分子基础是__碱基互补配对_____。
21.DNA复制中,___前导__链的合成是___连续__的,合成的方向和复制叉移动方向相同;
_后随_链的合成是___不连续____的,合成的方向与复制叉方向相反。
22.一条单链DNA(+)