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第二章第二章血液一般检查血液一般检查临床检验教研室临床检验教研室李新岳李新岳l重点重点:

l掌握掌握白细胞计数白细胞计数、红细胞计数红细胞计数、白细胞白细胞分类计数分类计数、血小板计数的原血小板计数的原理理、方法、方法、评价、评价、临床意义、临床意义l难点难点:

l细胞形态学细胞形态学血液一般检查在临床上应用最广泛血液一般检查在临床上应用最广泛红细胞红细胞参数检查参数检查包括包括白细胞白细胞参数检查参数检查血小板血小板参数检查参数检查其中其中红细胞计数红细胞计数(RBC)(RBC)血红蛋白测定血红蛋白测定(Hb)(Hb)白细胞计数白细胞计数(WBC)(WBC)白细胞分类计数白细胞分类计数(DC)(DC)等四项应用最多等四项应用最多,旧旧称为血常规称为血常规。

l血液血液一般一般检验的方法有两种:

检验的方法有两种:

l手工法:

用手工法:

用显微镜显微镜单项计数;单项计数;l血液分析仪法血液分析仪法:

多多项计数项计数三分群血液分析仪结果报告单三分群血液分析仪结果报告单WBCWBC白细胞计数白细胞计数LYM#LYM#淋巴细胞绝对值淋巴细胞绝对值LYMLYM淋巴细胞百分比淋巴细胞百分比MID#MID#中间细胞绝对值中间细胞绝对值MIDMID中间细胞百分比中间细胞百分比GRAN#GRAN#中性粒细胞绝对值中性粒细胞绝对值GRANGRAN中性粒细胞百分比中性粒细胞百分比RBCRBC红细胞计数红细胞计数HbHb血红蛋白测定血红蛋白测定lHCTHCT血细胞比容血细胞比容lMCVMCV红细胞平均体积红细胞平均体积lMCHMCH红细胞平均血红蛋白含量红细胞平均血红蛋白含量lMCHCMCHC红细胞平均血红蛋白浓度红细胞平均血红蛋白浓度lRDWRDW红细胞体积分布宽度红细胞体积分布宽度lPLTPLT血小板计数血小板计数lMPVMPV血小板平均体积血小板平均体积lPCTPCT血小板比容血小板比容lPDWPDW血小板体积分布宽度血小板体积分布宽度三分群血液分析仪检测指标(三分群血液分析仪检测指标(2121项)项)白细胞直方图白细胞直方图红细胞直方图红细胞直方图血小板直方图血小板直方图第二第二节节白细胞白细胞参数检查参数检查l一、白细胞计数一、白细胞计数l【显微镜法原理显微镜法原理】l用稀醋酸溶液,将血液稀释一用稀醋酸溶液,将血液稀释一定倍数并破坏红细胞,混匀充入计定倍数并破坏红细胞,混匀充入计数池,在显微镜下计数一定体积内数池,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经过换算求得每升血的白细胞数,经过换算求得每升血液中的细胞数。

液中的细胞数。

有二个有二个计数池,每计数池,每个计数池有个计数池有9个大方格,个大方格,每个大方格每个大方格长、宽均是长、宽均是1mm,加特,加特制盖片后高制盖片后高度为度为0.1mm。

故。

故1个大方个大方格体积为格体积为0.1mm3。

计数板的结构计数板的结构白细胞白细胞白细胞白细胞白细胞白细胞白细胞白细胞红红红红红【计算计算】WBC/L=10201064四大格白细胞总数四大格白细胞总数=-10920四大格白细胞总数四大格白细胞总数44:

算出每大格内平均白细胞数:

算出每大格内平均白细胞数(0.1l)(0.1l)1010:

换算为:

换算为1l1l的容积的容积;2020:

稀释倍数:

稀释倍数106:

换算成每升血中浓度:

换算成每升血中浓度【结果报告结果报告】WBCWBC:

101099/L/L第二节第二节白细胞白细胞参数检查参数检查l【方法学评价方法学评价】l1.1.显微镜计数法:

为血液分析显微镜计数法:

为血液分析仪校准的基本方法(严格规范下)。

仪校准的基本方法(严格规范下)。

简单易行,不需昂贵仪器。

但影响简单易行,不需昂贵仪器。

但影响因素多:

微量吸管、计数板、细胞因素多:

微量吸管、计数板、细胞分布范围、人为因素等,重复性差。

分布范围、人为因素等,重复性差。

l2.2.血液分析仪法:

快速、标准血液分析仪法:

快速、标准化、精确性高、适合大规模人群检化、精确性高、适合大规模人群检查。

但某些人为或病理因素可干扰查。

但某些人为或病理因素可干扰白细胞计数。

白细胞计数。

第二节第二节白细胞白细胞参数检查参数检查l【质量控制质量控制】l

(一)计数误差

(一)计数误差l11、技术误差:

是由于操作不正规或、技术误差:

是由于操作不正规或使用器材不准确造成的误差。

使用器材不准确造成的误差。

l

(1)

(1)器材:

清洁、干燥、校准器材:

清洁、干燥、校准l(22)标本要求:

采血迅速)标本要求:

采血迅速,避免避免凝血凝血,深度适宜深度适宜,不能过度挤压,稀释不能过度挤压,稀释度要准度要准。

l(3)(3)盖片放置方式:

推式加盖玻盖片放置方式:

推式加盖玻片法片法,更能保证充液体积高度为更能保证充液体积高度为0.1mm0.1mm。

第二节第二节白细胞白细胞参数检查参数检查l(44)充池要求充池要求:

l(55)细胞分布较均匀)细胞分布较均匀,若每大格间若每大格间细胞数相差细胞数相差88个时,应重新充池计数个时,应重新充池计数,二次重复计数结果相差不二次重复计数结果相差不10%10%。

l【质量控制质量控制】

(一)计数误差

(一)计数误差11、技术误差:

、技术误差:

第二节第二节白细胞白细胞参数检查参数检查l(66)对压线细胞的计数原则对压线细胞的计数原则:

l数上不数下数上不数下l数左不数右数左不数右l【质量控制质量控制】第二节第二节白细胞白细胞参数检查参数检查l(77)白细胞稀释液不能破坏有核)白细胞稀释液不能破坏有核红细胞红细胞,因此在病理情况下周围血出现因此在病理情况下周围血出现有核红细胞时有核红细胞时,可使白细胞数偏高可使白细胞数偏高,l应进行校正:

应进行校正:

l【质量控制质量控制】WBC/L(真值真值)=X-100100+YY100100X:

X:

校正前白细胞数校正前白细胞数YY:

分类:

分类100100个白细胞时个白细胞时,遇到的有核红细胞遇到的有核红细胞数数第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

在每次计数时,在每次计数时,不可避免产生的误差,包括:

不可避免产生的误差,包括:

l计数域误差计数域误差l吸管误差吸管误差固有误差固有误差l计数室误差计数室误差第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

l11)计数域误差:

)计数域误差:

l由于每次充池后由于每次充池后,细胞在计数池细胞在计数池分布不可能完全相同所造成的误差分布不可能完全相同所造成的误差,叫叫计数域误差。

计数域误差。

一、白细胞计数一、白细胞计数第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

l11)计数域误差:

细胞在计数室内随)计数域误差:

细胞在计数室内随机分布符合机分布符合PoissonPoisson分布,其细胞计数的分布,其细胞计数的标准差标准差(s)(s)为为:

ls=m,ms=m,m为重复计数均值为重复计数均值l细胞计数域的变异系数(细胞计数域的变异系数(CV)CV)为为:

lCV(%)=s/mCV(%)=s/m100%100%l=m/m=m/m100%100%l=1=1/mm100%100%l意义:

意义:

CVCV可以通过计数细胞增多而变小。

可以通过计数细胞增多而变小。

第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

l11)计数域误差:

)计数域误差:

当白细胞当白细胞3.015.015.01010/L/L可适当增可适当增加稀释倍数加稀释倍数。

第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

l11)计数域误差:

)计数域误差:

22)吸管、计数室误差:

由于不精)吸管、计数室误差:

由于不精密所致。

密所致。

可通过计数次数越多,即使用吸管、可通过计数次数越多,即使用吸管、计数室次数越多误差将减少。

计数室次数越多误差将减少。

第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l22、固有误差:

、固有误差:

l11)计数域误差:

)计数域误差:

l22)吸管、计数室误差:

)吸管、计数室误差:

33)固有误差总变异系数的数学公固有误差总变异系数的数学公式:

式:

10010022+4.64.622+4.74.722CV=nnbbnnccnnppnnbb所数细胞总数所数细胞总数nncc计数板使用次数计数板使用次数nnpp吸管使用次数吸管使用次数第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l33、生理状况的影响:

、生理状况的影响:

l运动、劳动运动、劳动、冷热水浴、冷热水浴、酷、酷热热、严寒可出现一过性增高、严寒可出现一过性增高,一日一日内可差内可差11倍;倍;l吸烟者平均比不吸烟者高吸烟者平均比不吸烟者高30%,30%,l所以所以,最好是定时检查最好是定时检查一、白细胞计数一、白细胞计数【质量控制质量控制】

(一)计数误差

(一)计数误差第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l

(二)质量考核与评价

(二)质量考核与评价l【显微镜计数法显微镜计数法】尚无完善考核尚无完善考核评价评价l11、经验控制:

、经验控制:

l(11)与红细胞数相对比较,)与红细胞数相对比较,周围周围血红细胞血红细胞/白细胞白细胞=500=500600:

1600:

1一、白细胞计数一、白细胞计数【质量控制质量控制】

(一)计数误差

(一)计数误差第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l

(二)质量考核与评价

(二)质量考核与评价l【显微镜计数法显微镜计数法】l11、经验控制:

、经验控制:

l(22)将白细胞计数结果与血涂)将白细胞计数结果与血涂片中白细胞分布情况对照。

片中白细胞分布情况对照。

lWBCWBC(101099/L/L)血片中血片中WBCWBC数数/HPl44727244l77949466l10101361361010l1313181018102020第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l【质量控制质量控制】l2.2.两差比值评价法:

即同一标本或同两差比值评价法:

即同一标本或同一病人在短时间内两次计数细胞数之差和一病人在短时间内两次计数细胞数之差和两次细胞计数的标准差之比。

两次细胞计数的标准差之比。

lr:

r:

为两差比值;为两差比值;lrr=XX11、XX22:

两两次次镜镜下下细细胞胞数数l计计分分:

质质量量得得分分100-100-(两两差差比比值值20.120.1)l20.1:

20.1:

为失分系数为失分系数l评价:

同变异百分数评价法。

评价:

同变异百分数评价法。

l9090分为分为AA级级(优优);80-8980-89分为分为BB级级(良良);l70-7970-79分分为为CC级级(中中);60-6960-69分分为为DD级级(及及格格);l6060分为分为EE级级(不级格不级格)。

X1X2X1+X233、双、双份份计数标准差计数标准差评价法:

评价法:

采用多个标本采用多个标本,每个标本均作双份计每个标本均作双份计数数,用每个标本的双份计数之差计算标准用每个标本的双份计数之差计算标准差差,再求变异系数及质量得分再求变异系数及质量得分。

本法适合于个人技术考核和室间质控本法适合于个人技术考核和室间质控第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查l【参考参考值】lWBCWBC:

成人(:

成人(4.04.010.010.0)101099/L/Ll新生儿新生儿(15(1520)20)101099/L/Ll66月月22岁(11(1112)12)101099/L/LlGRANGRAN:

50507070lGRANGRAN:

(:

(2.02.07.27.2)101099/L/L(绝对值)第二节第二节白细胞参数检查白细胞参数检查一、白细胞计数

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