质量研究项目及基本方法Word下载.docx
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9.636
9.652
9.631
9.742
辅料
7.750
3批自制样品和上市样品主峰的保留时间与对照品主峰的保留时间一致，空白辅料没有干扰。
10.4、检查
10.4.1、重量差异
取本品三批，各取20片，精密称定总重量，求得平均片重后，再分别精密称定各片的重量，求出片重差异，结果见表10-4～10-8。
表10-4、片重差异测定结果
序号
20100901
20100902
20100903
片重（g）
片重差异（%）
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
总重
平均片重
结论
符合规定
3批样品的片重差异符合中国药典2010年版二部附录规定。
10.4.2、含量均匀度
据中国药典2010年版二部附录XE规定，并参考国家药品标准WS1-（X-066）-2003Z，考察本品的含量均匀度。
取本品10片，置50ml（5mg规格）或100ml（10mg规格）量瓶中，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）适量，超声震荡10分钟，使溶解，冷却后，加上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过；
取续滤液作为供试品溶液。
照含量测定项下的方法测定，应符合规定（中国药典2010年版二部附录XE）。
表10-9、含量均匀度测定结果
含量（%）
X
S
A+1.80S
结果表明，本品三批样品含量均匀度符合中国药典2010年版的要求。
10.4.4、有关物质
参考中有关物质测定项方法，采用高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录VD），对本品有关物质的检查方法进行研究。
1、方法
1.1、仪器与试剂
1.2、色谱条件
2、方法的建立
2.1、色谱柱
C18柱，5μm，250×
4.6mm，XXX公司。
2.2、溶剂
乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）（附图10-31）
2.3、破坏试验（破坏强度根据产品性能而定，要使破坏后主峰面积达到80%~90%，并与上市样品主降解产物峰一致）
（1）空白辅料：
按处方量称取辅料（约相当于16mg），置100ml量瓶中，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）适量，超声，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，结果表明辅料在7～8分钟有吸收峰，但能与主峰及其杂质峰能很好的分离，对主峰的测定无干扰（附图10-34）。
（2）样品：
精密称取本品细粉适量（约相当于16mg），置100ml的量瓶中，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）适量，超声使辛伐他汀溶解，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
结果表明各杂质峰与主峰、辅料之间均能达到有效分离（附图10-35）。
（3）破坏试验
A、强酸破坏：
取本品及上市样品细粉适量（约相当于16mg），置100ml量瓶中，加1.0mol/L盐酸1ml，80℃加热30分钟使降解，放冷，用1.0mol/L氢氧化钠调至中性，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）稀释至刻度，摇匀，滤过，备用。
B、强碱破坏：
取本品及上市样品细粉适量（约相当于16mg），置100ml量瓶中，加1.0mol/L氢氧化钠1ml，80℃加热5分钟使降解，放冷，用1.0mol/L盐酸调至中性，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
C、氧化破坏：
取本品及上市样品细粉适量（约相当于16mg），置100ml量瓶中，加30%双氧水1ml，80℃加热10分钟使降解，放冷，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
D、高温破坏：
取本品及上市样品细粉适量（约相当于16mg），置100ml量瓶中，在105℃恒温干燥箱内放置6小时，放冷至室温，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）稀释至刻度，摇匀，滤过。
E、光照破坏：
取本品及上市样品细粉适量（约相当于辛16mg），置100ml量瓶中，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）稀释至刻度，摇匀，在4500±
500lx强光照射下放置12天，放冷，滤过。
分别取上述测试液各20μl注入色谱仪，结果见附图10-36~10-40。
结果表明，各杂质峰与主峰均能达到有效分离，辅料不干扰有关物质检测，破坏试验产生的各杂质峰均能完全分离。
上述色谱条件适合本品的有关物质检测。
2.4、理论板数、拖尾因子和分离度
取对照品溶液（浓度为0.16mg/ml）10μl注入色谱仪，计算主峰的理论板数和拖尾因子及二者之间的分离度，结果见表10-12及附图10-48。
表10-12、理论板数和拖尾因子计算结果表
名称
理论板数
分离度
（与洛伐他汀之间）
拖尾因子
18.533
11274.193
13.456
1.024
结论：
在上述色谱条件中，理论板数按计算不低于3000，主峰的拖尾因子在0.95~1.05之间，符合系统适用性要求。
2.5、检出限
取逐级稀释的稀溶液注入色谱仪，记录谱图，改变溶液浓度和进样量，当峰信号高度为基线噪音的3倍时，作为HPLC测定的最小检出限。
附图10-49。
最小检出限：
16.24mg/100ml×
1ml/100ml×
7.5μl=0.12ng
2.6、定量限
取逐级稀释的稀溶液注入色谱仪，记录谱图，改变溶液浓度和进样量，当峰信号高度为基线噪音的10倍时，作为HPLC测定的最小定量限。
2.7线性和范围（针对已知杂质）
2.8准确度（针对已知杂质）
2.9精密度（按液相方法，取对照品溶液10μl注入色谱仪，进样6针，计算RSD）
2.10耐用性
改变色谱条件（流速、流动相比例等）进样，计算主峰的理论板数和拖尾因子及二者之间的分离度。
方法研究结论：
结果表明，上述色谱条件适合本品有关物质的检查。
3、样品有关物质测定结果
3批样品及上市对照样品的测定结果见下表（附图10-50～10-64）：
表10-13、有关物质测定结果
最大杂质（%）
总杂质（%）
3批样品和上市样品的总有关物质均小于%。
10.4.5、溶出度
参考溶出度项测定方法，采用高效液相色谱法进行研究。
1、仪器
ZRS-8G智能溶出度试验仪（天津大学无线电厂）
岛津LC-2010A液相色谱仪
CLASS-Vpver.6.1
2、方法参考标准方法
3、方法学试验
3.1、色谱条件与系统适用性试验
见有关物质考察。
3.2、线性参照溶出度方法最少做5个浓度
表10-14、XXX溶出度测定线性考察结果表
编号
浓度C（μg/ml）
峰面积A
2.023
2651
4.046
5307.5
6.069
7959
9.103
11933.5
12.138
15944
16.184
21310
20.230
26459
线性方程：
y=1311x+9.9807，相关系数r=1。
本品在2μg/ml~20μg/ml的范围内呈线性关系。
3.3、回收率
取对照品8.8、11.0、13.2mg各三份，精密称定，分别置1000ml量瓶中，并分别加入按10mg规格处方的空白辅料，加磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36g，加水900ml溶解，用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至4.5，加水至1000ml，混匀，即得）-正丙醇（2:
1）溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置10ml量瓶中，用上述溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；
另取辛伐他汀对照品适量，精密称定，加上述溶液溶解并稀释制成每1ml中约含6μg的溶液作为对照品溶液。
分别精密量取上述两种溶液各20μl分别注入液相色谱仪，记录谱图，计算回收率。
结果见下表。
表10-15、XXX片溶出度测定回收率测定结果
主药量
（mg）
回收率（%）
平均（%）
80%
8.95
100.7
100.9
8.98
101.7
8.85
100%
11.19
100.6
11.35
100.4
11.24
120%
13.35
101.3
13.55
13.28
101.2
本方法的回收率均在100%左右，说明方法准确，辅料对测定无干扰，适合片（5mg、10mg规格）溶出度的测定。
3.4、精密度
取本品细粉6份，照溶出度测定项下的方法，制成供试品溶液，取20μl，注入色谱仪，记录谱图，另取对照品同法测定，计算RSD%，结果见表10-16。
表10-16、XXX片溶出度测定精密度试验结果表
溶出度（%）
溶出度平均值（%）
RSD%
98.97
99.94
1.04
99.80
101.5
100.5
98.64
100.2
精密度试验的相对标准偏差小于2%，说明本法精密度好。
3.5、溶液稳定性
取精密度试验项下的溶液，放置，于0，1，4，24小时取样测定，结果见下表。
表10-17、溶出度测定溶液稳定性试验结果表
放置时间（h）
100.1
99.92
24
99.57
说明溶液在24小时内稳定。
3.9、溶出曲线
取本品及上市样品，照溶出度测定法（中国药典2010版二部附录XC第二法），以磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36g，加水900ml溶解，用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH值至4.5，加水至1000ml，混匀，即得）-正丙醇（2:
1）900ml为溶剂，转速为每分钟50转，依法操作，经5、10、15、30、45、60分钟时取溶液10ml，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
精密量取样品续滤液5ml，置10ml量瓶中，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；
另取对照品适量，精密称定，加上述溶液溶解并稀释制成每1ml中约含6μg的溶液作为对照品溶液。
照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录ⅤD）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-0.025mol/L磷酸二氢钠溶液（pH4.5）（65:
35）为流动相；
检测波长为238nm；
与两峰之间的分离度应大于3，理论板数不低于2010。
分别精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算每片的溶出量。
分别对3批样品及上市样品进行60分钟溶出曲线测定。
结果见表10-21~表10-33（附图10-66~78）。
表10-21、溶出均一性测定结果（批号：
20100901）
片号
时间
平均±
SD（%）
5分钟
97.76
90.97
98.24
99.69
94.39
100.0
96.85±
3.51
10分钟
102.5
100.8
102.0
99.70
102.3
101.2±
1.21
15分钟
101.8
103.2
99.82
102.6
101.4±
1.29
30分钟
101.1
99.98
101.3
103.0
103.3
101.5±
1.39
45分钟
99.32
101.0
102.1
103.5
101.1±
1.52
60分钟
102.4
1002
1.61
表10-22（批号：
20100902）
表10-23（批号：
20100903）
表10-24（上市样品）
本品三批样品与上市样品的溶出规律基本一致，溶出均一性良好。
10.4.6、微生物限度
照微生物限度检查法（中国药典2010年版二部附录ⅪJ）检测，结果见表10-35。
表10-35、微生物检查结果
细菌数（个/g）
<
100
霉菌数（个/g）
大肠杆菌（个/g）
1g中未检出
活螨（个/g）
未检出
本品的微生物检查结果符合要求。
10.5、含量测定
10.5.1、方法
1、仪器与试剂
同有关物质项下。
2、测定法
测定法取本品20片，精密称定，研细，精密称取细粉适量（约相当于16mg），置100ml的量瓶中，加乙腈-0.05mol/L醋酸钠（pH4.0）（8:
2）适量，超声使溶解，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；
另取对照品适量，精密称定，加上述溶液溶解并稀释制成每1ml中约含0.16mg的溶液，作为对照品溶液，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得。
10.5.2、方法研究
（1）色谱条件与系统适用性实验见有关物质项下。
（2）辅料影响实验及专属性见有关物质项下。
（3）线性
取对照品40.15mg，置50ml量瓶中，加乙腈32.5ml振摇使溶解，用0.025mol/L磷酸二氢钠溶液（pH4.5）稀释至刻度，摇匀，分别精密量取该溶液，置量瓶中，加流动相稀释制成64.24、96.36、160.60、240.90、401.50μg/ml的系列溶液。
取供试品溶液10μl注入液相色谱仪，记录谱图；
结果见表10-39及附图10-79。
表10-39、含量测定线性考察结果表
峰面积
64.24
2112.5
96.36
3161
160.60
5250.5
240.90
7735
401.50
13076
y=32.42x+19.085（r=0.9999），表明本品在64.24ug/ml~401.50ug/ml的范围内线性关系良好。
含量测定供试品溶液的浓度选择为：
0.16mg/ml；
进样量为：
10μl。
（4）回收率实验
取对照品12.8、16.0、19.2mg各三份，精密称定，分别置100ml量瓶中，按处方量加入空白辅料。
另取对照品16mg，均照含量测定法项下的方法配制，取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。
按外标法以峰面积计算回收率，结果见下表。
表10-40、XXX片含量测定回收率测定结果
加入量（mg）
12.9
99.50
12.8
98.55
15.8
16.1
15.7
19.2
98.69
18.9
98.98
本方法的回收率均在100%左右，说明方法准确、辅料对测定无干扰，适合含量的测定。
（5）精密度
取本品一批，照上述含量测定法，称取六份进行测定。
表10-41、精密度试验测定结果
样品
平均含量（%）
RSD（%）
99.60
0.50
100.4
99.23
100.3
6份样品平行测定时，RSD为0.50%。
说明该方法具有良好的精密度。
（6）溶液稳定性
取精密度项下的溶液，照含量测定法分别于24小时内测定含量，结果见下表。
表10-42、XXX片溶液稳定性考察试验结果
0h
99.28
2h
99.33
4h
99.13
8h
99.00
24h
98.78
本品的含量测定方法在不同时间测定相同的样品结果比较平行，说明该溶液稳定性较好。
（9）样品含量测定结果
12批样品及上市样品中的含量测定结果见下表。
表10-46、XXX片含量测定结果
100.6
12批样品中的含量均在90.0%~110.0%之间。
胶囊剂尚需研究崩解时限
10.6、参考文献
10.7、附图
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