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16.转导

通过噬菌体将一个细胞的基因传递给另一个细胞的过程

17.转染

通过生物学、物理学和化学等方法使病毒或噬菌体的裸露DNA分子引入受体细胞,并在受体细胞内稳定维持和表达的过程。

18.发酵工程

利用微生物的生长和代谢活动来生产各种有用物质的工程技术

19.固定化酶

限制在一定空间但仍具有催化活性的酶。

20.酶活力

酶催化一定化学反应的能力。

21.酶传感器

利用酶的催化作用,在常温常压下将糖类、醇类、有机酸、氨基酸等生物分子氧化或分解,然后通过换能器将反应过程中化学物质的变化转变为电信号记录下来,进而推导出相应的生物物质浓度的间接型传感器。

22.酶反应器

以酶为催化剂进行反应所需要的容器及其附属设备

23.酶工程

利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能,或通过对酶进行修饰改造,并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的一项技术

24.蛋白质工程

在基因工程的基础上,结合蛋白质结晶学、蛋白质化学、计算机辅助设计等多学科的基础知识,通过对基因的人工定向改造等手段,对蛋白质进行修饰、改造、拼接以生产能满足人类需要的新型蛋白质技术

25.蛋白质组学

研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学

26.蛋白质一级结构

由许多氨基酸按照一定的排列顺序,通过肽键相连而成的多肽链结构。

27.生物农药

可用来防治病、虫、草等有害生物的生物体本身,或源于生物并可作为“农药”的各种生理活性物质

 

填空题(5*2)

1、生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。

2、酶工程包括酶的固定化、细胞的固定化、酶的修饰改造和酶反应器的设计等技术。

3、游离酶在应用时的不足之处主要有:

(1)酶的稳定性较差

(2)酶使用后通常不能回收(3)产物的分离纯化较困难等三个方面。

4、固定化酶的主要缺点是酶易失活

5、微生物产酶过程中,提高酶产量可以通过添加诱导物、添加产酶促进剂、表面活性剂、控制阻遏物浓度等措施实现。

6、利用载体结合法进行酶的固定化的途径主要有吸附法、包埋法、共价结合法、共价交联法。

7、酶的发酵生产方式有两种,一种是固体发酵,另一种是液体深层发酵。

液体深层培养主要控制条件有温度、__通气和搅拌__和__PH_____。

8、依据培养基在发酵工业中的用途,可以将培养基分成___孢子培养基___、______种子培养基___和___发酵培养基____。

9、工业发酵按微生物对氧的不同需求可分为按培养基的物理性状可分为固体发酵、液体发酵;

按发酵菌的种类可分为好养型发酵及厌氧型发酵两种发酵形式。

10、细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、干细胞技术、克隆技术。

11、植物细胞融合技术的主要过程主要包括制备原生质体、诱导细胞融合、筛选杂合细胞三个步骤。

12、动物细胞融合途径主要有_化学诱导融合、电极诱导融合和__病毒诱导融合_。

13、细胞融合技术中杂合体的鉴别与筛选技术主要包括显微镜鉴别、互补法、细胞与分子生物学的方法、再生体植株表型等手段。

14、植物组织培养过程中生长素对细胞分裂素的比值低有利于促进胚芽及胚根的诱导分化。

15、植物组织培养主要包括预备阶段、诱导去分化阶段、继代增殖阶段、生根发芽阶段、移栽成活阶段等环节。

16、植物脱病毒的途径主要有物理学方法、化学方法、生物学方法、综合脱毒法等四种。

17、人工种子由___人工种皮_____、___人工胚乳__和____胚状体__构成。

18、分批培养微生物时,微生物表现出典型的生长周期,包括延滞期、加速期、指数生长期__、减速期_、稳定期_和_衰亡期。

19、基因工程技术是生物技术的核心技术。

20、基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。

21、基因工程的实施包括四个必要条件:

工具酶、基因、载体和受体细胞。

22、现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。

23、重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道转化法。

导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒颗粒转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。

24、限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端平末端、黏性末端。

25、Cosmidvector的特点主要包括具有λ噬菌体的特性、具有质粒载体的特性、方便的选择、高容量的克隆能力。

26、PCR定点诱变法可分为重组PCR定点诱变法和大引物诱变法。

27、PCR包括三个步骤变性、退火、延伸。

28、蛋白质工程主要研究手段是利用反向生物学技术。

29、蛋白质溶液的pH大于等电点,该蛋白质颗粒带负电荷,反之则带正电荷。

30、蛋白质全新设计可分为功能设计和结构设计。

目前的研究重点和难点侧重从结构设计出发,从蛋白质的二级结构开始。

31、改变蛋白质结构的核心技术是基因的定点诱变技术。

32、生物农药可分为____生物体农药___和____生物化学农药____。

33、基因治疗根据对宿主病变基因采取的措施不同,可分为__基因置换__、__基因修正___、___基因修饰_和基因失活四大策略。

34、目前的肿瘤疫苗根据其组成可分为四种_肿瘤细胞疫苗_、_肿瘤核酸疫苗__、____肿瘤肽疫苗_____和___肿瘤基因工程疫苗___。

35、人类基因组计划的最终任务是__要破译人类遗传物质DNA分子所携带的全部遗传信息_。

单项选择题(10*2)

1.单克隆抗体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是(A)。

A.能使杂交细胞大量增殖B.产生特异性强的个体

C.是细胞融合容易进行D.是产生的抗体纯度更高

2.蛋白质工程是在基因工程基础上,延伸出来的第二代基因工程,其结果产生的蛋白质是(D)。

A.氨基酸种类增多B.氨基酸种类减少

C.仍为天然存在蛋白质D.可合成天然不存在蛋白质

3.基因工程的基本程序一般不包括(A)。

A.工具酶的改造B.制备目的DNA

C.目的DNA与载体的连接D.导入寄主细胞

4.英国克隆羊"

多利"

的产生、"

抗虫棉"

的培育、"

番茄马铃薯"

的创造、单克隆抗体的制备、抗生素的生产依次是下列哪项生物技术取得的成果。

①基因工程②细胞工程③发酵工程④酶工程(B)

A.①②②③④B.②①②②③C.①②④③③D.①②①③②

5.最早问世的转基因动物(B)。

A.转基因羊B.转基因老鼠C.转基因猪D.转基因牛

6.人工种子由三部分构成,不属于这三部分的是(D)。

A.人工种皮B.人工胚乳C.胚状体D.胚轴

7.目前国际社会对植物性转基因食品的检测,属于检测表达的重组蛋白质的方法是(C)。

(+ELISA法)

A.PCR法B.Northern杂交C.Western杂交D.生物芯片技术

8.cDNA是指(A)。

A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA

B.在体外经反转录合成的与DNA互补的DNA

C.在体内经反转录合成的与RNA互补的DNA

E.在体内经转录合成的与DNA互补的RNA

9.当前国内外研究最多,应用最广泛的杀虫细菌是(C)。

A.白僵菌B.昆虫病毒C.苏云金杆菌D.膦丝菌素

10.植物基因工程最常用的质粒载体是(C)。

A.F质粒B.R质粒C.Ti质粒D.COLE

11.目前国际社会对植物性转基因食品的检测,不属于检测插入的外源基因的方法是(C)。

12.发酵过程中,pH值取决于(D)。

A.菌种B.培养基C.培养条件D.以上都是

13.与传统育种相比,植物体细胞杂交在育种作物新品种方面的重大突破表现在(B)。

A.证明杂种细胞具有全能性B.克服远缘杂交不亲和的障碍

C.缩短育种周期,减少盲目性D.快速培育无病毒植株,保留杂种优势

14.可用于水产、香肠、奶油、生面条的保藏的是(C)。

A.谷氨酸钠B.葡萄糖氧化酶C.溶菌酶D.甜味剂

15.以下不属于生物技术在食品包装中的应用的是(D)。

A.酶工程B.基因工程C.生物信息技术D.免疫学技术

16.发酵工程的主要内容包括(D)。

A.生产菌种的选育B.发酵条件的优化与控制

C.反应器的设计及产物的分离D.以上都是

17.下列不属于植物细胞工程的应用是(D)。

A.快速无性繁殖B.原生质体融合

C.种质资源保存D.抗病毒作物培育

18.花药培养的主要目的是(A)。

A.单倍体育种B.形成成熟花粉C.形成正常胚D.形成花粉管

19.生产青霉素等抗生素的生物技术主要是(A)。

A.发酵技术B.转基因技术C.克隆技术D.酶工程技术

20.植物组织培养过程的顺序是(A)。

①离体的植物器官、组织或细胞②根、芽③愈伤组织

④脱分化⑤再分化⑥植物体

A.①④③⑤②⑥B.①④③②⑤⑥

C.①⑤④③②⑥D.⑥①④③⑤②

判断题(10*1)

1.现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。

T

2.基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。

F

3.基因是一个功能单位,但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位T

4.如果需要得到真核生物基因的完整序列,必须用基因组文库方能达到。

5.cDNA文库不包含内含子。

6.cDNA是以DNA为起始材料,经过复制得到的互补DNA。

(在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA)F

7.DNA的复制是全保留不连续复制。

8.用自身作引物合成的cDNA链,往往cDNA并不完整。

9.所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板,这样产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。

10.核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关,碱基数相同的情况下,其含量越高,则Tm越高。

11.有一些来源不同的限制性内切酶识别的是同样的核苷酸序列,这类酶称为同裂酶。

12.E.coliDNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。

13.只有具有互补黏性末端的DNA片段才可以被连接起来。

14.只有粘粒端才可以被连接起来。

15.Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。

16.Western杂交是DNA—RNA之间的杂交。

17.Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。

18.质粒DNA进行电泳时,其三种构型中,开环DNA跑的最快,共价闭环形DNA跑得最慢。

19.重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞。

20.无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体。

21.农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的有效方法。

22.目的基因来源于各种生物,其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。

23.聚合酶链反应技术可在短时间内扩增出大量拷贝数的待扩增DNA片段,但目前只能应用于基因工程目的基因的制备。

24.1977年,美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物——人生长激素释放抑制剂激素。

25.假基因不能合成功能蛋白质,是相应的正常基因突变引起的。

26.通过DNA重排技术进行酶基因的体外随机突变可以获得大量的正突变基因F

27.转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。

28.转基因生物直接食用的,称为“转基因食品”,而作为加工原料生产的食品,则不能被称为“转基因食品”。

29.动物细胞融合的途径包括:

病毒诱导融合、化学诱导融合、电极诱导融合T

30.植物组织培养的诱导去分化阶段需在培养基中添加较高浓度的细胞分裂类激素,诱导外植体产生愈伤组织。

F

31.工业化植物细胞培养系统主要为悬浮培养系统和固定化细胞培养系统,后者细胞生长缓慢,但次生代谢物含量相对较高。

32.碳源是微生物细胞生命活动的基础,向细胞提供碳素化合物的营养物质是其唯一作用。

33.任何细胞都可用作受体细胞。

34.原核生物细胞是最理想的受体细胞。

35.固定化原生质体由于细胞内的结构完整可以保持细胞原有的生命活动能力F

36.克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。

37.克隆子就是重组子。

38.进入细菌的外来DNA之所以被降解,是因为细菌只修饰自身DNA,不修饰外来DNA。

39.酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。

40.包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。

41.酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度,反应速度越大,意味着酶活力越高。

42.角叉菜胶也是一种凝胶,在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。

43.α-淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化,但不称为糊精化酶。

44.酶法产生饴糖使用α-淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。

45.液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。

46.目前蛋白质工程主要集中在改变现有蛋白质结构这一领域,其核心技术是基因的人工定点突变。

47.PCR技术不仅用于细菌、螺旋体等病原菌的检测,还可用于病毒的检测。

48.ELISA方法是检测转基因作物中的重组蛋白质产物的常用方法。

49.检测外源基因的导入时,PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。

50.在生物技术的五大工程中生化工程是核心技术,它能带动其他技术的发展F

51.生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。

52.生物技术是一门新兴学科,它包括当代生物技术和现代生物技术两部分。

53.生物技术主要包括五项技术(工程)。

54.现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。

55.本世纪初,遗传学的建立及其应用,产生了遗传育种学,并于60年代取得了辉煌的成就,被誉为“第一次绿色革命”。

简答题(4*5)

1.简述生物农药的意义,并列出几种常用的生物农药。

意义:

1)生物农药的毒性通常比传统农药低

2)选择性强,不易产生抗药性

3)只对病虫害有作用,对人、畜及水生生物等都比较安全。

4)高效低残留易分解,对生态环境影响小,环境安全。

常用的生物农药有苏云金杆菌、井冈霉素、浏阳霉素、阿维菌素等。

2.抗病虫转基因作物的优势主要表现在哪些方面?

1)它是一种无环境污染的防治策略,可显著减轻农业对化学农药的依赖,有助于可持续农业系统的建立。

2)抗性基因的来源广阔,不受不同生物个体间生殖隔阂的限制,可以在整个生物界中挑选、组合目的基因

3)抗病虫特性具有时间和空间上的整体性。

4)育种周期短,防治病虫成本低

3.用于申请专利的生物技术发明必须满足什么条件?

(1)具有新颖性

(2)具有创造性

(3)具有应用价值

(4)在申请专利说明书对发明做详尽的描述,使在同一领域的其他人能够了解执行。

4.列举构建转基因动物导入外源基因的主要方法。

1、显微注射法:

用显微注射器直接把外源DNA注射到受精卵细胞的原核或细胞质中。

优点:

准确、快捷。

缺点:

成本很高

2、病毒载体法:

最常用的病毒载体是逆转录病毒

3、脂质体介导法:

用脂质体作为人工膜包裹DNA,以此作为载体将外源DNA导入细胞

4、精子介导法:

成熟的精子与外源DNA共育再给卵子受精,外源DNA通过受精作用进入到受精卵并整合到受体的基因组中

5、胚胎干细胞法

6、原始生殖细胞法

5.分离目的基因的途径有哪些?

(1)酶切法

(2)PCR法(3)化学合成法(4)基因组或cDNA文库法

6.生物技术在培育抗逆性作物品种中的应用有哪些?

1、培育抗除草剂作物

2、培育抗病毒病作物

3、培育抗病虫害作物

4、培育抗重金属镉的作物

5、培育适应极端气候条件的新品种

6、抗盐碱、抗旱

7.发酵培养基由哪些成分组成?

碳源,氮源,无机盐,微量元素,生长因子,水,产物形成诱导物、前体和促进剂

8.单倍体植株形单体弱,为什么科学家仍热衷于诱发产生单倍体植株?

1)单倍体植株经染色体加倍后,在一个世代中即可出现纯合的二倍体,从中选出的优良纯合系后代不分离,表现整齐一致,可缩短育种年限。

2)单倍体植株中由隐性基因控制的性状,虽经染色体加倍,但由于没有显性基因的掩盖而容易显现。

有利于研究诱变育种和突变遗传

3)在诱导频率较高时,单倍体能在植株上较充分地显现重组的配子类型,可提供新的遗传资源和选择材料

4)中国首先应用单倍体育种法改良作物品种,已育成了一些烟草、水稻、小麦等优良品种。

单倍体育种如能进一步提高诱导频率并与杂交育种、诱变育种、远缘杂交等相结合应用,则在作物品种改良上的作用将更显著。

因此科学家热衷于诱发单倍体植株。

9.简述对生物技术发明进行保护的几种主要形式及其优缺点。

主要形式有:

专利保护、商业秘密。

①优点:

专利持有者在专利保护期内对产品和工艺保持绝对垄断的地位,一经取得专利后对保持专利容易管理。

②缺点:

专利到期后必须将专利的内容公布,这将有利于竞争者。

由于各专利法缺乏一致性从而引发许多问题,其他未被专利覆盖到的商业领域可能容许对专利的滥用。

10.作为基因克隆载体一般应具备的条件是什么?

1容易进入宿主细胞,而且进入效率越高越好

2能在宿主细胞中复制繁殖,最好要有较高的自主复制能力

3容易插入外来核酸片段,且插入后不影响其进入宿主细胞和在细胞中的复制。

这就要求载体DNA上要有合适的限制性核酸内切酶位点

4容易从宿主细胞中分离纯化出来,便于重组操作

5有容易被识别筛选的标志,当其进入宿主细胞或携带外来核酸序列进入宿主细胞时都能被辨认和分离出来

11.cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些?

1)基因组文库克隆的是任何基因,包括未知功能的DNA序列;

cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因,包括调节基因

2)基因组文库克隆的是全部遗传信息,不受时空影响;

cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列,受发育和调控因子的影响

3)基因组文库中的编码基因是真实基因,含有内含子和外显子;

cDNA文库克隆的是功能基因,不含内含子

4)基因组文库的片段来源是基因组DNA的一部分;

cDNA文库的片段来源是mRNA逆转录的cDNA。

12.人工种子利用有何优点?

1可以一年四季进行工厂化生产

2有利于保存该种系的优良形状

3成本更低,适合机械化田间播种

4可在人工胚乳中添加适量的营养物、激素、农药、抗生素、除草剂等,以利于胚状体的健康生长。

13.固定化酶有哪些指标?

①相对酶活力②酶的活力回收率③固定化酶的半衰期

14.以pBR322说明基因工程中载体的基本要求及pBR322的优缺点。

基本要求:

(1)具有对受体细胞的可转移性,并在宿主细胞内能独立复制

(2)有选择性标记

(3)有一段多克隆位点。

(4)分子量小,拷贝数多

(5)容易从宿主细胞中分离纯化

1)带有一个复制起始位点,保证了该质粒只在大肠杆菌的细胞中行使复制的功能

2)质粒载体pBR322相对分子质量较小,有较高的拷贝数

3)有两种抗生素抗性基因,可供转化子的选择标记

保留了转移蛋白mob的作用位点。

能够被ColK质粒编码的mob蛋白识别,如果再有F质粒的参与,就有可能转移。

15.pH对发酵过程的影响及发酵过程中影响pH值的主要因素有哪些?

1影响酶的活性

2影响微生物细胞膜所带电荷的状态,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收及代谢产物的排泄

3影响培养基中某些组分和中间代谢产物的解离,从而影响微生物对这些物质的利用

4pH不同,往往引起菌体代谢过程的不同,使代谢产物的质量和比例发生改变

5pH还会影响某些霉菌的形态。

6所用的菌种、培养基的成分和培养条件、培养基中营养物质的代谢都会引起pH变化

16.PCR的基本步骤及特点分别是什么?

基本步骤:

1DNA变性:

反应系统加热至90~95℃,双链DNA变性成为两条单链DNA,作为互补链聚合反应的模板

2退火:

降温至37~60℃,两种引物分别与模板DNA链的3’一侧的互补序列杂交(复性)

3延伸:

升温至70~75℃,耐热性DNA聚合酶催化引物按5’→3’方向延伸,合成模板DNA链的互补链。

重复以上过程,经过3次循环,就可以出现待扩增的特异性DNA片段。

特点:

特异性强、灵敏度高、操作简便、省时、可以扩增mRNA

分析题(2*15)

1.基因工程研究的理论依据是什么?

试述基因工程操作的基本技术路线。

理论依据:

(1)基因是可切割的

(2)基因是可以转移的

(3)基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代

(4)基因与多肽之间存在对应关系

(5)不同基因具有相同的物质基础

(6)遗传密码是通用的

基本技术路线:

(画图)

2.请分析开展干细胞研究对人类的积极意义及其争议性。

干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能。

积极意义:

1)在体外鉴别、分离、纯化、扩增和培养人体胚胎干细胞,并以这样的干细胞为“种子”,可培育出一些人的组织器官。

2)干细胞及其衍生组织器官的广泛临床应用,将产生一种全新的医疗技术,也就是再造人体正常的甚至年轻的组织器官,从而使人能够用上自己的或他人的干细胞或由干细胞所衍生出的新的组织器官,来替换自身病变的或衰老的组织器官,对人类寿命的延长给予了一个新的研究方向

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