免疫复习总结Word文档格式.docx
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多克隆抗体:
抗原通常带有多个表位,免疫动物后、可刺激产生针对同一抗原不同表位的抗体,所以免疫血清实质上包含了多种质与量均不同的抗体,故称多克隆抗体。
杂交瘤技术:
利用细胞融合技术,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤的技术。
嵌合抗体(chimericantibody):
从鼠源单抗功能性V区基因,经基因重组与人抗体C区基因连接成嵌合基因,插入适当的表达载体中,转染宿主细胞,表达嵌合抗体。
改形抗体(reshapedantibody,RAb):
在嵌合抗体基础上用人抗体可变区的骨架区序列取代鼠源单抗CDR以外的骨架区序列,重新构成既有鼠源单抗的特异性又保持抗体亲和力的人源化抗体,该抗体对人体几乎无免疫原性。
凝集反应(agglutinationreaction):
指颗粒性抗原或覆盖了可溶性抗原(或抗体)的颗粒性载体与相应抗体(或抗原)结合后,出现的肉眼可见的凝集现象。
试管凝集试验:
是在试管内颗粒性抗原与相应的抗体直接结合,在一定条件下出现肉眼可见的凝集现象。
间接凝集反应(indirectagglutination):
将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联在适当大小的颗粒性载体表面,然后与相应抗体(或抗原)作用,在适当电解质存在的条件下,出现特异性的凝集现象,称为间接凝集反应或被动凝集反应。
协同凝集反应(coagglutinationreaction):
与间接凝集反应的原理相类似。
载体为金黄色葡萄球菌。
SPA能与IgG的Fc段结合,当葡萄球菌与IgG抗体连接时,就成为抗体致敏的颗粒载体。
当与相应的抗结合时,则出现凝集反应。
间接血凝试验(indirecthemagglutinationtest):
以红细胞为载体的间接凝集试验。
将可溶性Ag(或Ab)吸附于人O型RBC或绵羊、家兔的RBC制成致敏的RBC,与相应Ab(或Ag)作用,在有电解质存在的条件下,经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象。
沉淀反应(precipitation):
指在适当条件下,可溶性的抗原和相应的抗体特异性结合后形成沉淀物的现象。
液相沉淀反应(fluidphaseprecipitation):
指可溶性抗原与相应抗体在液体介质中发生的沉淀反应。
单向免疫扩散试验(singleimmunodiffusion):
待测抗原从凝胶孔中向含有相应定量抗体的凝胶四周自由扩散,在二者浓度比例合适处形成白色沉淀环。
沉淀环大小与抗原的浓度呈正相关。
双向免疫扩散(doubleimmunodiffusion):
将抗原和抗体溶液分别放在凝胶的对应孔中,让两者在凝胶中自由扩散,当抗原与抗体相遇在浓度比例合适处便形成可见的白色沉淀线。
对流免疫电泳(counterimmunoelectrophoresis):
是在电场作用下,抗原和抗体在凝胶中定向、加速的双向免疫扩散技术。
补体结合试验(complementfixationtest,CFT)是利用抗原抗体复合物可结合补体,而游离的抗原或抗体不能结合补体的特点,以溶血素致敏的绵羊红细胞为指示系统,指示补体是否被结合,从而判断抗原抗体是否对应。
荧光免疫技术:
是将抗原抗体反应的特异性与荧光物质检测的敏感性和直观性结合起来的一种免疫分析技术,是免疫标记技术中发展最早的一种检测方法荧光免疫显微技术:
以荧光显微镜为检测工具,用荧光素标记特异性抗体或抗抗体,检测固定组织细胞上的抗原.。
或血清中的抗体,常用于定性和定位检查的一门技术。
数字共聚焦技术:
用镧系稀土元素螯合物(如Eu3+螯合物)标记Ag或Ab,Ag与Ab反应后,利用时间分辨荧光分析仪检测标本中的相应Ab或Ag时间分辨荧光免疫测定:
用镧系稀土元素螯合物(如Eu3+螯合物)标记Ag或Ab,Ag与Ab反应后,利用时间分辨荧光分析仪检测标本中的相应Ab或Ag。
荧光偏振免疫测定(FPIA):
一种均相竞争荧光免疫分析法。
待测的小分子抗原和荧光素标记的小分子抗原(恒量)与相应抗体(恒量)竞争结合。
RIA:
即放射免疫分析,是以放射性核素标记抗原和待测抗原竞争结合一定量的特异性抗体,待测抗原量与抗原抗体复合物放射性强度呈反比,用来测定待测抗原含量的一种竞争免疫学方法。
IRMA:
即免疫放射分析,是以放射性核素标记的抗体与待测抗原发生非竞争性结合反应,待测抗原量与抗原抗体复合物放射性强度呈正比,从而测定待测抗原含量的一种非竞争免疫学方法。
酶免疫技术:
是用酶作标记物标记抗原或抗体,将抗原抗体反应的特异性和酶高效催化反应的专一性结合在一起的一种免疫检测技术。
酶联免疫吸附试验(ELISA)原理:
抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面,受检样品和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原抗体复合物,加入酶反应底物后,底物被酶催化形成有色产物,通过定性或定量分析。
酶免疫印迹试验(enzymeimmunoblottingtest):
是一种以膜为载体的酶免疫技术,以膜为载体吸附抗原,加入抗体和酶标二抗,反应后在膜表面形成免疫复合物,加底物显色进行检测。
发光免疫技术:
是将发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。
这种方法不仅具有发光分析的高灵敏度而且具有抗原抗体反应的高度特异性,包括光致发光免疫技术和化学发光免疫测定技术。
化学发光免疫技术:
是将化学发光分析和免疫反应相结合而建立的一种新的免疫分析技术。
该方法不仅具有发光分析的高灵敏度和抗原抗体反应的高度特异性,而且还具有分离简便,可以实现自动化分析的特点,包括发光酶免疫分析、化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。
化学发光酶免疫测定:
是采用以催化反应参与发光的酶如HRP或ALP作为标记物,标记检测用的抗原或抗体,待测标本与检测试剂进行免疫反应后,形成酶标抗原抗体复合物,结合在复合物上的酶催化其底物发生反应并产生发光效应。
胶体金免疫技术(colloidalgoldimmunoassay)是指利用胶体金颗粒标记特异性蛋白,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,从而进行定性或半定量检测。
免疫金(immunogold)是指胶体金与Ag或Ab的结合物,有时称之为金探针。
斑点金免疫层析:
以NC膜为载体,结合抗原抗体反应、金标技术与蛋白质层析技术的快速固相膜免疫分析技术。
免疫金银染色:
是在金免疫技术基础上发展起来的更为敏感的技术,利用金免疫技术测定产物上的金颗粒将银离子还原成银颗粒,在金颗粒表面形成一色泽更深的黑色层,可增强金免疫技术的敏感性。
胶体金:
是金盐被还原成金原子后形成的金颗粒悬液,胶体金颗粒有一个基础金核(金原子Au)及包围在外的双离子层构成,紧连在金核表面的是内层负离子(AuCL2),外层离子层H则分散在胶体金溶液中,以维持胶体金游离羽溶胶间的悬液状态。
免疫组织化学(Immunohistochemistry):
用显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位,通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的免疫学检测技术。
亲合组织化学技术是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础,建立的组织细胞化学技术。
葡萄球菌蛋白A(SPA):
金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质,作为桥抗体或标记抗体不受种属特异性的限制,它能和人及许多动物IgG结合,对IgG免疫球蛋白亚型的结合有选择性。
凝集素(1ectin):
从各种植物、无脊椎动物和高等动物中提纯的糖蛋白或结合糖的蛋白,能凝集红细胞。
免疫芯片:
将抗原抗体反应的特异性与电子芯片高密度集成原理相结合产生的生物芯片检测技术。
外周血单个核细胞PBMC:
外周血单个核细胞主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验中最常用的细胞群,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。
E花环试验:
T细胞表面有特异性绵羊红细胞(SRBC)受体,即E受体。
将T细胞与SRBC按一定比例混匀,置4至少2h或过夜,T细胞表面的E受体能与SRBC结合形成以T细胞为中心,四周环绕SRBC的花环样结构,镜检计数可得总花环(Et)形成率,亦即T细胞的百分率。
淋巴母细胞转化试验:
细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后,细胞出现一系列的增殖反应,主要表现为胞内蛋白质和核酸合成增加,并发生形态返祖变化,如细胞变大、胞质增多、胞质出现空泡、核染色质疏松、核仁明显,这种淋巴细胞增殖反应又称淋巴细胞母细胞转化(lymphoblasttransformation)。
溶血空斑试验:
该方法用于检测实验动物抗体形成细胞数目。
其基本原理是抗体形成细胞分泌的Ig与SRBC上的抗原结合,在补体作用下出现溶血反应。
方法是将SRBC与其免疫的小鼠脾细胞、补体及适量琼脂糖液混合倾注平板,或者将吸附有已知抗原的SRBC与待检B细胞、补体及适量琼脂糖液混合倾注平板,温育一定时间,抗体形成细胞释放的抗体会使周围SRBC致敏,并在补体作用下出现肉眼可见的溶血空斑,每一空斑中央含有一个抗体形成细胞,因此空斑数量即代表抗体形成细胞数。
NBT还原试验:
活化的中性粒细胞与NBT一起温育,由于中性粒细胞吞噬杀菌过程中产生超氧阴离子(O),使被吞进细胞内的NBT由原来呈淡黄色还原成不溶性的蓝黑色颗粒,沉积在细胞浆中,称为NBT阳性细胞。
光学显微镜下计数NBT阳性细胞,其百分率可反映中性粒细胞的杀菌功能。
流式细胞术:
是指借助流式细胞仪,精确、快速地对生物细胞的理化特性和生物学特性进行多参数定量分析,并对特定细胞群体分选的新技术。
细胞分选:
是指从细胞群体中将选定的细胞分离出来。
ListMode方式:
是指用表格将每一个被测细胞的众多原始数据全部记录下来,形成数据文件。
荧光补偿技术:
是指利用已知标准样品或根据细胞样品的生物学意义,合理设置各荧光信号之间的相互补偿值。
依赖细胞株:
是指人们为检测某一种细胞因子而筛选的,该细胞株的分裂增殖只依赖于某一种细胞因子的存在,并在一定浓度范围内与细胞增殖程度呈正相关。
若培养基中缺乏这种细胞因子,依赖株则不能存活。
细胞因子活性单位:
细胞因子使相应细胞达到最大程度增殖的50时所需细胞因子的含量称为细胞因子的一个活性单位。
免疫球蛋白超家族:
该类细胞黏附分子具有与Ig相似的结构特征,即具有一个或多个IgV样或C样结构域,具有黏附分子功能,种类繁多,统称为IgSF,其识别的配体多为IgSF分子和整合素家族分子。
主要参与介导细胞间黏附和信号传递,参与淋巴细胞法与分化,炎症反应和免疫应答及淋巴细胞的归巢和再循环。
E-selectin:
选择素家族成员,主要表达于血管内皮细胞上,其与配体结合后,参与介导白细胞向炎症区和肿瘤细胞转移。
粘附分子:
指介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的一类分子糖蛋白,分布于细胞表面或细胞外基质,参与细胞信号传导与活化、细胞的伸展和移动、细胞的生长及分化、肿瘤转移和创伤愈合。
准确度:
即待测物的测定值与其真值的一致性程度。
准确度不能直接以数值表示,通常以不准确度来间接衡量。
对一分析物重复多次测定,所得均值与其真值或参考靶值之间的差异亦即偏差,即为测定的不准确度。
精密度:
在一定条件下所获得的独立的测定结果之间的一致性程度。
与准确度一样,精密度同样也是以不精密度来间接表示。
测定不精密度的主要来源是随机误差,以标准差(SD)和/或变异系数(CV)具体表示。
SD或CV越大,表示重复测定的离散度越大,精密度越差,反之则越好。
质量保证:
为一产品或服务项目、为满足特定的质量要求而提供的具有充分可信性所进行的、有计划和系统的措施。
室内质量控制:
由实验室工作人员采取一定的方法和步骤,连续评价本实验室工作的可靠程度,目的是监测和控制本室常规工作的精密度,提高本室常规工作中批内、批间样本检验的一致性,以确定测定结果是否可靠、可否发出报告的一项工作。
室间质量评价:
为客观比较一实验室的测定结果与靶值的差异,由外单位机构采取一定的方法,连续、客观地评价实验室的结果,发现误差并校正结果,使各实验室之间的结果具有可比性。
这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价,而不是用来决定实时的测定结果的可接受性。
标准品(物):
指性质纯正的己知含量或成分的物质,通常用以比较检测未知的物质或成分。
标准品有WHO国际标准品和国家标准品。
质控物(品):
是用以校准物相同的介质制备的,具有较好的稳定性和重复性,其作用主要是控制仪器的稳定性,以保证仪器、试剂、工作环境具高度的稳定性。
超敏反应(hypersensitivity):
机体对某些抗原初次应答后,再次接受相同抗原刺激时,发生的一种以机体生理功能紊乱或组织损伤为主的免疫应答。
变应原(allergen):
引起超敏反应的抗原物质变应素(allergins):
引起型超敏反应的抗体主要是IgE类抗体,亦称变应素(allergins)自身免疫病(autoimmunedisease,AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。
自身免疫耐受(autoimmune-tolerance)是免疫系统对自身的组织和细胞不产生或仅产生微弱的免疫应答。
自身抗体(autoantibody):
某些原因使自身免疫耐受遭到破坏时,免疫系统就会对自身组织成分发生免疫应答,产生针对自身成分的抗体。
自身免疫(autoimmunity):
某些原因使自身免疫耐受遭到破坏时,免疫系统对自身组织成分发生免疫应答产生针对自身成分的自身抗体和/或自身反应性淋巴细胞的现象。
抗核抗体(ANA):
是泛指针对真核细胞核成分的一类自身抗体的总称。
ANA是诊断SLE重要指标。
类风湿因子RF:
RF是一种存在于人或动物体内抗变性IgGFc的自身抗体,常见的有IgM、IgG、IgA、IgE型,其中IgM型被认为是RF的主要类型。
免疫球蛋白病:
是外周血中免疫球蛋白和/或免疫球蛋白片段超常增高或尿中出现异常免疫球蛋白片段的疾病。
单克隆蛋白:
单克隆免疫球蛋白病时,由于单株浆细胞异常增殖所产生的大量理化性质十分均一的免疫球蛋白,称为单克隆蛋白(monoclonalprotein,MP或M蛋白),M蛋白多无免疫活性,又称副蛋白(paraprotein)。
冷球蛋白:
温度低于30时易自发形成沉淀,加温后又可溶解的免疫球蛋白。
免疫缺陷病(immunodeficiencydisease,IDD):
是由于遗传因素或其他因素造成免疫系统先天发育障碍或后天损伤引起的各种临床综合征。
原发性免疫缺陷病(primaryimmunodeficiencydisease,PIDD):
是免疫系统的遗传缺陷或先天发育不全所致的临床综合征。
继发性免疫缺陷病(secondaryimmunodeficiencydisease,SIDD):
是免疫系统受到后天因素,如感染、肿瘤、营养不良、代谢疾病和其他疾病作用引起免疫功能低下所致的临床综合征。
联合免疫缺陷病(combinedimmunodeficiencydisease,CID):
是指T细胞和B细胞均有分化发育障碍,导致细胞免疫和体液免疫联合缺陷所致的疾病。
ASO:
是A族溶血性链球菌的代谢产物之一,对所有真核细胞的细胞膜、细胞质和细胞器都有毒性,链球菌溶血素“0”具有抗原性,能刺激机体产生对应的抗体,中和其溶细胞活性,称之为抗链球菌溶血素“0”(anti-streptolysin“0”,ASO)。
TORCH:
优生优育筛选检测部分致畸因素被综合称为“TORCH”。
其中“T”代表弓形体(Toxoplasmagondii),“R代表风疹病毒(rubellavirus),“C”代表巨细胞病毒(cytomegalovirus),“H”代表单纯疱疹病毒(herpessimplexvirus),“O”(otherinfections)指其他相关病原体如:
梅毒螺旋体、柯萨奇病毒、衣原体或支原体等的感染。
这是一组可通过宫内感染直接影响胎儿发育,并引起相似临床症状和体征如围生期感染、流产、死胎、早产、先天性畸形和智力障碍等的感染因素。
VDRL:
本试验是用从牛心肌中提取的心类脂、加入一定量的卵磷脂和胆固醇作为抗原,简称VDRL抗原。
试验时,将加热(56)处理过的待检血清加一滴于玻片上,再加等量抗原悬液并混合振摇,观察凝集颗粒。
可作为定性和定量检测梅毒患者血清中反应素的筛选试验。
COPT:
是一种抗原-抗体反应,虫卵抗原与病人血清中相应抗体能特异性结合,一旦虫卵与抗体结合,虫卵周围形成泡状、指状或条状并有明显折光性的沉淀物。
COPT的操作简便,成本不高,敏感性较高,沿用至今。
侵袭力:
即指细菌突破机体防御屏障,在体内定居、繁殖、扩散的能力。
肿瘤特异性抗原(TSA):
是指仅表达于某种肿瘤细胞表面而不存在于正常细胞的新抗原。
肿瘤相关性抗原(TAA):
:
是指非肿瘤细胞所特有的,既存在于肿瘤组织或细胞,也存在于正常组织或细胞的抗原物质,只是其在肿瘤细胞的表达量远远超过正常细胞,此类抗原只表现出量的变化而无严格的肿瘤特异性。
肿瘤标志物(TM)是指在肿瘤发生、发展过程中,由肿瘤本身所产生的或是由机体对肿瘤细胞反应而产生的,反映肿瘤存在和生长的一类物质。
宿主抗移植物反应(HVGR):
在实质器官移植中,宿主对供者器官产生的排斥反应移植物抗宿主反应(GVHR):
在骨髓移植或其他免疫细胞移植中,移植物中的淋巴细胞可识别宿主抗原,进而攻击宿主的靶组织产生的排斥反应。
免疫性不孕:
是由针对生殖系统抗原的自身免疫或同种异体免疫引起,例如针对精子、精浆、卵子透明带等抗原产生的免疫应答。
重症肌无力(MG):
胸腺发育异常或未知原因产生乙酰胆碱受体抗体,突触后膜终板胆碱受体遭到破坏,数量减少,导致肌细胞动作电位产生障碍。
多发性硬化症(MS):
是一种病因未明的,以中枢神经系统炎性、多灶性、脱髓鞘性病变为特征的疾病。
简答题抗原抗体反应的影响因素有哪些?
一、反应物自身因素:
1、抗原:
抗原的理化性状、分子量、抗原表位的种类及数目均可影响抗原抗体反应结果。
2、抗体:
抗体来源;
抗体的浓度;
抗体的特异性和亲和力。
二、反应的环境因素1、电解质;
2、酸碱度;
3、温度。
抗原抗体反应基本类型有哪些?
抗原抗体反应基本类型有:
凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应、免疫反应。
简述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性,既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖,经过克隆化后称为单个细胞克隆,分泌的抗体即为单克隆抗体。
简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增殖培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。
简述火箭免疫电泳的原理及主要用途。
原理:
火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。
抗原在电场作用下,在含有适量抗体的琼脂糖凝胶中向正极泳动,逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成沉淀,随着抗原量的减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样沉淀,峰形高低与抗原量呈正相关。
用已知量标准抗原作对照,绘制标准曲线,根据检测样品沉淀峰的高度可算出待测抗原含量。
主要用途:
1、抗原蛋白定量;
2、C3、C4及其裂解产物检测;
3、AFP等检测。
免疫浊度分析的影响因素有哪些?
1、抗体的质量;
2、抗原、抗体比例;
3、反应的条件;
4、增浊剂的作用;
5标本的因素。
沉淀反应的技术分类有哪些?
1、液相沉淀反应;
2、凝胶中沉淀反应;
免疫浊度检测荧光免疫显微技术技术类型及方法学评价:
技术类型:
直接法、间接法、补体结合法、双标记法方法学评价:
共同优点:
定性、定位检查。
直接法:
操作简便、特异性高,敏感性偏低。
间接法:
敏感性较高,易出现非特异性荧光。
补体结合法:
可检测多种抗原或抗体,敏感性较高,易出现非特异性荧光,操作较复杂。
时间分辨荧光免疫测定技术类型:
固相双位点夹心法/、固相抗原竞争法、/固相抗体竞争法/、间接法/、捕获法免疫复合物与游离抗原常用分离方法吸附去附游离抗原法、化学沉淀法、双抗体法、PR试剂法固相分离法。
(1)IRMA与RIA的区别:
IRMARIA标记物质抗体抗原标记物用量过量限量反应方式直接结合竞争性结合B、F分离方法固相抗体法等第二抗体法等酶联免疫吸附试验(ELISA)技术类型及原理和用途双抗体夹心法:
Ag-Ab反应后形成固相Ab-Ag-Ab1*,加入底物后,在酶的作用下生成有色产物,其量与待检抗原的量成正比。
常用于检测抗原间接法:
将Ag联接到固相载体上,样品中待检Ab与之结合成Ag-Ab,加Ab1*,形成Ag-Ab-Ab1*,加底物显色,确定待检抗体含量。
常用于测定抗体竞争法:
小分子抗原或半抗原缺乏1个以上抗体结合位点,可用竞争法测定。
用于测抗原或抗体捕获法:
先将针对IgM的第二抗体(Ab)结合于固相载体,加入样品,样品中所有IgM被捕获。
洗涤后加入特异抗原与待检IgM结合;
再加入抗原特异的酶标抗体(sAb),反应形成固相酶标抗体复合物,加入底物显色后,即可对样品中待检IgM的存在及其含量进行测定。
主要用于IgM抗体测定酶免疫测定的应用:
1.病原体及其抗体测定2.蛋白质测定3.非肽类激素测定4.药物和毒品测定化学发光与荧光的根本区别是什么?
简述化学发光的基本原理化学发光和荧光的根本区别是形成激发态分子的激发能原理不同,荧光是发光物质吸收了激发光后使分子产生发射光,化学发光是化学反应过程中所产生的化学能使分子激发产生的发射光。
化学发光反应系统中以化学反应为基础,首要条件是吸收了化学能而处于激发态的分子或原子必须能释放出光子或者能将能量转移到另一个物质的分子上并使这种分子激发,当这种分子回到基态时能释放出光子。
免疫金的制