酮体的生成实验报告Word文档下载推荐.docx

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反应式如下：

　　ch3coch3十3I2十4naohchI3十ch3coona十3naI十3h2o

　　I2十2na2s2o3na2s4o6十2naI

　　【实验材料】

　　1.实验器材

　　试管；

移液管；

锥形瓶；

滴定管及架。

2.实验试剂

（1）0.1%淀粉液。

（2）0.9%nacl溶液。

（3）15%三氯乙酸。

（4）10％naoh溶液。

（5）10％hcl溶液。

　　（6）0.5mol/L丁酸溶液：

取5ml丁酸溶于100ml0.5mol/Lnaoh中。

　　（7）0.1mol/L碘液：

I212.5g和KI25g加水溶解，稀释至刻度1L，用0.1mol/Lna2s2o3

　　标定。

　　（8）0.02mol/Lna2s2o3:

24.82gna2s2o3·

5h2o和400mg无水na2co3溶于1L刚煮沸的

　　水中，配成0.1mol/L溶液，用0.1mol/LKIo3标定。

临用时将标定na2s2o3溶液稀释成0.02mol/L。

　　【实验操作】

　　1.标本的制备：

　　将兔致死，取出肝脏，用0.9%nacl洗去污血，放滤纸上，吸去表面的水分，称取肝组织5g置研钵中，加少许0.9%nacl至总体积为10ml，制成肝组织匀浆。

另外再取后腿肌肉5g，按上述方法和比例，制成肌组织匀浆。

　　2.保温和沉淀蛋白质：

　　取试管3只，编号，按下表操作：

　　摇匀后，用滤纸过滤，将滤液分别收集在3支试管中,为无蛋白滤液。

　　3.酮体的测定

　　摇匀，静置10分钟，向各管中加入10%hcl3ml,加1%淀粉液1滴呈兰色，分别用0.02mol/Lna2s2o3滴定至溶液呈亮绿色为止。

　　【实验结果与计算】

　　肝脏生成的酮体量（mmol/g）=（c－A）×

na2s2o3的摩尔数×

1/6肌肉利用的酮体量（mmol/g）=（c－b）×

1/6

　　A:

滴定样品1消耗的na2s2o3ml数。

b:

滴定样品2消耗的na2s2o3ml数。

c:

滴定样品3消耗的na2s2o3ml数。

　　【思考题】

　　为什么只有在肝外组织，酮体才可以被氧化利用？

　　experiment11productionandDegradationofKetonebodies

　　【purpose】

　　understandtheproductionorgansandmasterthemethodusedforproductionanddegradationofketonebodiesmeasurement.

　　【principle】

　　withinthemitochondriaofliver,theexcessacetyl-coAproducedduringfattyacidβ-oxidationisconvertedtoacetoacetate,β-hydroxybutyrate,andacetone,thisgroupofmoleculesiscalledtheketonebodies.Livercannotuseketonebodiesasanenergysource.onlyinseveraltissuesoutofliver,mostnotablycardiacandskeletalmuscle,ketonebodiesareconvertedtoacetyl-coA,theacetyl-coAisthenoxidatedtogenerateenergy.

　　weusebutyricacidasinitialstuffinthisexperiment,thebutyricacidisheatedwiththeliverplasm,andthenmeasurethecontentofketonebodiesinliverplasm.moreover,measurethecontentofketonebodiesundertheconditionofcoexistenceofliverplasmandskeletalmuscleinreactionsystem.wecancomprehendtheabovetheoriesfromthedifferenceoftheketonebodiescontentunderthetwodifferentconditions.wedeterminethecontentofacetoneinthisexperiment.

　　Theketonebodiesmeasurementprincipleisshownbelow:

Inalkalineaquatheiodinecanoxidizeacetonetobecomeiodoform,titratetheremainderiodineinthereactionsystemwithhyposulphite,wecancalculatetheconsumptionofiodineaccordingtotheresultofhyposulphitetitra（:

酮体的生成实验报告）tion,wecanalsocalculatethecontentofketonebodies（takeacetoneastorepresent）accordingtothetitrationresult.TheequationofReactionisasfollows:

　　ch3coch3十3I2十chI3十ch3coona十3naI十3h2o

　　【materials】

　　1.Apparatus:

　　Tubes,pipets,Flasksburettesandburettesupport.2.Reagents:

（1）0.1%aquaofstarch.

（2）0.9%aquaofnacl.

　　（3）15%trichlorineaceticacid.（4）10%aquaofnaoh.（5）10%aquaofhcl.

　　（6）0.5mol/Lbutyricacid:

Dissolve5mlbutyricacidin100ml0.5mol/Lnaoh.

　　⑺0.1mol/Laquaofiodine:

DissolveI212.5gandKI25gindistilledwater,dilutethesolutionto1L,demarcatethesolutionwith0.1mol/Lna2s2o3.

　　⑻0.02mol/Lna2s2o3:

Dissolve24.82gna2s2o3·

5h2oand400mganhydrousna2co3in1Lfreshboiledwatertoget0.1mol/Lsolution,demarcatethesolutionwith0.1mol/LKIo3.Dilutethesolutionto0.02mol/Ljustbeforeusing.

　　【procedures】

　　1.preparationofthespecimen:

　　executetherabbit,takeouttheliver,scouroffthebloodwith0.9%nacl,puttheliveron

　　filterpapertosuckawaythesurfacehumidity,weigh5goftheliverorganize,placeitintothemortar,addafew0.9%nacltototalvolume10ml.Thentake5gmuscleofrearleg,makeitintotheliverorganizationplasmaccordingtoabove-mentionedmethodandcomparisons.

　　2.heatpreservationandprecipitationoftheprotein:

　　Takethreetubes,numberthetubesandoperateasthetablefollowed：

　　Filterwiththefilterpaper

　　aftershakingevenly,collectthefiltraterespectivelyin3tubes,thenwegetthefiltratewithoutprotein.

　　3.Determinationoftheketonebodies

　　placestaticallyfor10minutesaftershakingevenly,add10%hcl3mltoeachtube,andaddonedropof1%starchliquidtoeachtube,thenwecanseethesolutionpresentsthecoloroforchid,titratewith0.02mol/Lna2s2o3untilthesolutionpresentsthecolorofbrightgreenrespectively.【Resultandcalculation】

　　Ketonebodiesproducedinliver（mmol/g）=（c－A）×

moorecontentofthena2s2o3×

1/6Ketonebodiesconsumedinmuscle（mmol/g）=（c－b）×

volumeofthena2s2o3（ml）consumedduringtitrationofsample1b:

volumeofthena2s2o3（ml）consumedduringtitrationofsample2c:

volumeofthena2s2o3（ml）consumedduringtitrationofsample３

　　【Advisementafterexperiment】

　　Ketonebodiesareoxidatedtogenerateenergyonlyinseveraltissuesoutofliver.why?

　　篇二：

实验五肝中酮体的生成

　　实验五肝中酮体的生成

　　一、课堂目标

　　1．说出酮体在体内生成的必要条件及过程

　　2．注意观察比较和记录实验结果，分析原因，得出明确的结论3．深入理解为什么酮体的生成是肝特有的功能二、原理

　　酮体是乙酰乙酸，β—羟丁酸和丙酮三种物质的总称。

肝脏中含有合成酮体的酶系，用丁酸作为底物与新鲜的肝匀浆混合后保温，即有酮体生成，酮体与含亚硝基铁氰化钠的显色粉作用产生紫红色化合物。

经同样处理的肌匀浆，因缺乏酮体生成的酶则不产生酮体，无显色反应。

通过本实验能证明酮体生成部位。

三、试剂

　　1．生理盐水

　　2．洛克溶液氯化钠0．9克、氯化钾0．042克、氯化钙0．024克、碳酸氢钠0．02克、葡萄糖0．1克，将以上物质混合溶于水中，溶解后加入蒸馏水至100毫升。

3．0．5摩尔／升丁酸溶液取44．0克丁酸溶于0．1摩尔／升氢氧化钠溶液中，并用0．1摩尔／升氢氧化钠稀释至100毫升。

　　4．0．1摩尔／升磷酸缓冲液（ph7．6）准确称取磷酸氢二钠7．74克和磷酸二氢钠0．897克，用蒸馏水稀释至500毫升，精确测定ph值。

5．15％三氯醋酸溶液6．显色粉亚硝基铁氰化钠四、器材

　　试管及试管架、滴管，解剖剪刀、搅拌机、恒温水浴箱、台式天平、离心机、小药匙。

五、操作

　　1，肝匀浆和肌匀浆的制备；

取家兔一只，处死后迅速取出肝和大腿肌肉

　　各约10克，分别放入搅拌机磨成浆，然后各加入生理盐水20毫升混匀，过滤，备用。

2．取试管4支，标号，按下表操作

　　3．将各管摇匀后，置入37℃水浴中保温40~50分钟。

　　4．取出各管，各加入15％三氯醋酸10滴，混匀，离心5分钟（3000转／分）。

　　5．分别取出上述各管上清液，放入显色粉一小匙，观察和记录所产生的颜色反应，并分析结果。

　　六、实验报告

　　2．简答

（1）何谓酮体?

酮体在何处生成?

何处利用?

为什么?

（2）酮体生成有何生理意义?

　　实验日期：

____月____日评分____________评改老师___________

　　篇三：

　　酮体是脂肪酸在肝内分解氧化时的正常中间代谢产物，它包括乙酰乙酸、β-羟丁酸及丙酮三种有机物质。

其中β-羟丁酸含量较多，丙酮含量极微。

（1）酮体的生成

　　以乙酰coA为原料，在肝线粒体经酶催化先缩合，后再裂解而生成酮体，除肝之外，肾也含有生成酮体的酮体系。

酮体的合成过程可分三步进行。

　　①首先由两分子乙酰coA在硫解酶的作用下缩合生成乙酰乙酰coA，同时释放出一分子coA-sh。

【反应式1】②然后，乙酰乙酰coA再与一分子乙酰coA结合生成6个碳的3-羟甲基戊二酸单酰coA（hmgcoA），并释放出coA-sh，此反应是由hmgcoA合成酶催化的，该酶在肝线粒体含量极高。

【反应式2

　　】

　　③乙酰乙酸被还原生成β-羟丁酸，该还原反应是由紧密结合在线粒体内膜上的β-羟丁酸脱氢酶（此酶在肝中活性极高）催化，还原反应所需的氢由nADh提供。

该

　　+反应速度取决于nADh／nAD之比值。

部分乙酰乙酸还可缓慢地自发脱羧，亦可经乙

　　酰乙酸脱羧酶催化脱羧生成丙酮。

　　【肝内酮体的生成】

　　肝含有合成酮体的酶体系，故能生成酮体，但肝缺乏利用酮体的酶，因此不能氧化酮体，肝产生的酮体需经血液运输到肝外组织进一步氧化分解。

（2）酮体的利用

　　酮体被氧化的关键是乙酰乙酸被激活为乙酰乙酸辅酶A，激活的途径有两种：

一是在肝外组织细胞的线粒体内，β－羟丁酸经β－羟丁酸脱氢酶作用，被氧化生成乙酰乙酸，乙酰乙酸与琥珀酰coA在β－酮脂酰coA转移酶（β-ketoacylcoAtransferase）（3-氧酰coA转移酶），即琥珀酰coA；

乙酰乙酸辅酶A转移酶催化下，生成乙酰乙酰coA，同时放出琥珀酸。

另一途径是在有hscoA和ATp存在时，由乙酰乙酸硫激酶催化，使乙酰乙酸形成乙酰乙酰辅酶A，后者再经硫解生成两分子乙酰coA。

乙酰coA进入三羧酸循环被彻底氧化。

【肝外组织对酮体的利用】

　　丙酮不能按上述方式氧化，它可随尿排出。

丙酮易挥发，如血中浓度过高时，丙酮还可经肺直接呼出。

　　肝是生成酮体的器官，但缺乏氧化酮体的酶，故肝中酮体不能氧化；

肝外组织缺乏hmgcoA裂解酶，不产生酮体，却可氧化利用酮体。

　　【酮体的性质】

　　（3）酮症

　　正常情况下，血中酮体含量很少，每1ooml血中酮体含量低于3mg（0.3mmol／L）。

但在饥饿、高脂低糖膳食及糖尿病时，脂肪动员加强，脂肪酸氧化增多，酮体生成过多，超过肝外组织利用酮体的能力，引起血中酮体升高，当高过肾回收能力时，则尿中出现酮体，即为酮症（ketosis）。

因酮体中乙酰乙酸及β－羟丁酸都是相对强的有机酸，如在体内堆积过多可引起代谢性酸中毒。

　　饥饿、高脂低糖膳食及糖尿病均造成体内糖氧化利用的减低，呈现胰高血糖素与胰岛素的比值升高，，则大量脂酰coA转移入线粒体进行氧化，产生大量乙酰coA。

另外还使脂解作用增强，则长链脂酰coA增多而堆积起来。

在线粒体内，此时由于脂酰coA特别是长链脂酰coA增多，通过别构抑制柠檬酸合成酶，致使乙酰coA难于进入三羧酸循环氧化，在肝内堆积的乙酰coA缩合生成酮体。

过多的酮体将随血液循环运至肝外组织氧化利用，肝外组织氧化酮体是有一定限度的。

当血酮体过高，如超过肝外组织氧化能力时，则血中酮体将堆积，尿中出现大量酮体，呈现酮症。

　　【糖代谢紊乱与酮症的关系】

　　（4）酮体生成的生理意义

　　①肝脏输出酮体为肝外组织提供了能源。

　　②肝脏输出酮体对低血糖时保证脑的供能，以维持其正常生理功能方面起着重要作用。

　　甘油的代谢

　　甘油在组织细胞内的氧化，必须先在甘油磷酸的催化下，形成α-甘油磷酸，后者脱氢后生成二羟丙酮磷酸，然后再沿糖代谢的途径分解或沿酵解逆行的途径生成糖。

肝、肾和肠粘膜等组织含有丰富的甘油磷酸激酶，但在肌肉和脂肪组织细胞内，这种酶的活性很低。