性病实验室检测.ppt

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性病实验室检测性病实验室检测性病实验室在性病防治中的作用性病实验室在性病防治中的作用效果评价效果评价临床服务临床服务疫情监测疫情监测科学研究科学研究实验室诊断实验室诊断性病实验室在性病疫情监测中的任务性病实验室在性病疫情监测中的任务专项性病患病率调查专项性病患病率调查疾病准确诊断疾病准确诊断n梅毒梅毒n淋病淋病n沙眼衣原体感染沙眼衣原体感染淋球菌耐药监测淋球菌耐药监测l分离株收集分离株收集lMICMIC检测检测实验室质量控制实验室质量控制实验室检测实验室检测一、梅一、梅毒毒概述-梅毒病原体小而纤细的螺旋状微生物小而纤细的螺旋状微生物小而纤细的螺旋状微生物小而纤细的螺旋状微生物长长长长555520m20m20m20m，粗细，粗细，粗细，粗细0.2m0.2m0.2m0.2m有有有有666612121212个规则的螺旋个规则的螺旋个规则的螺旋个规则的螺旋基本结构为一原生质的圆柱体，基本结构为一原生质的圆柱体，基本结构为一原生质的圆柱体，基本结构为一原生质的圆柱体，为两层膜所围绕为两层膜所围绕为两层膜所围绕为两层膜所围绕行动缓慢而有规律行动缓慢而有规律行动缓慢而有规律行动缓慢而有规律-围绕其长轴旋转中前后移动围绕其长轴旋转中前后移动围绕其长轴旋转中前后移动围绕其长轴旋转中前后移动-伸缩其圈间之距离而移动伸缩其圈间之距离而移动伸缩其圈间之距离而移动伸缩其圈间之距离而移动-全身弯曲如蛇行全身弯曲如蛇行全身弯曲如蛇行全身弯曲如蛇行检测方法-病原体检查nn梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳梅毒螺旋体检查是诊断早期梅毒的最佳方法。

方法。

nn诊断一期梅毒、二期梅毒时，可取患者诊断一期梅毒、二期梅毒时，可取患者的渗出液或淋巴结穿刺术得到的组织的渗出液或淋巴结穿刺术得到的组织液，在暗视野显微镜下观察螺旋体的液，在暗视野显微镜下观察螺旋体的特征性形态和运动方式特征性形态和运动方式.nn病原学检查的主要方法有暗视显微镜检病原学检查的主要方法有暗视显微镜检查、镀银染色法和直接荧光法查、镀银染色法和直接荧光法检测方法检测方法-病原体检查的临床意义病原体检查的临床意义1.1.暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克暗视野显微镜检查、镀银染色和荧光抗梅毒螺旋体单克隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可隆抗体等检查方法，直接镜检到梅毒螺旋体，在临床可确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。

暗视野确诊梅毒，且具有快速、方便、易操作的特点。

暗视野显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项显微镜检查已被世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。

目之一。

2.2.螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最佳方法，对于患者的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十的早期诊断、及时治疗、预后和尽早切断传染源都有十分重要的意义。

分重要的意义。

3.3.如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性如未见到梅毒螺旋体，并不能排除患梅毒的可能性.暗视野显微镜检查暗视野显微镜检查检测方法检测方法-血清学检测血清学检测根据检测所用抗原不同，临床血根据检测所用抗原不同，临床血清试验分为两大类：

清试验分为两大类：

1.1.非梅毒螺旋体抗原血清试验非梅毒螺旋体抗原血清试验2.2.梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体抗原血清试验检测方法检测方法-非梅毒螺旋体血清试验非梅毒螺旋体血清试验n所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本所有的非梅毒螺旋体血清试验的抗原基本成分都一样成分都一样,其基本成分是心磷脂其基本成分是心磷脂、卵磷脂、卵磷脂和胆固醇和胆固醇n抗原抗体结合形成复合物抗原抗体结合形成复合物凝集成网状沉淀凝集成网状沉淀颗粒颗粒被肉眼所见被肉眼所见n敏感性和特异性都基本相似敏感性和特异性都基本相似非梅毒螺旋体血清试验原理示意图非梅毒螺旋体血清试验原理示意图检测方法检测方法-非梅毒螺旋体血清试验非梅毒螺旋体血清试验n性病研究实验室试验（性病研究实验室试验（VDRLVDRL）n不加热血清反应素试验（不加热血清反应素试验（USRUSR）n血浆反应素环状卡片试验（血浆反应素环状卡片试验（RPRRPR）n甲苯胺红不加热血清试验（甲苯胺红不加热血清试验（TRUSTTRUST）检测方法检测方法-非梅毒螺旋体血清试验非梅毒螺旋体血清试验nRPRRPR试验特点：

试验特点：

在在USRUSR试剂成分的基础上试剂成分的基础上加入黑色碳颗粒加入黑色碳颗粒作为沉作为沉淀的指示物淀的指示物用白色的硬纸片替代玻片用白色的硬纸片替代玻片血清不需要灭活血清不需要灭活不需要显微镜观测结果不需要显微镜观测结果可作定量试验可作定量试验有现成的试剂盒有现成的试剂盒携带方便携带方便操作简单操作简单价格便宜价格便宜试验的结果可长期保存试验的结果可长期保存检测方法检测方法-非梅毒螺旋体血清试验非梅毒螺旋体血清试验n甲苯胺红试验甲苯胺红试验（TRUST）（TRUST）特点：

特点：

其原理和成分与其原理和成分与RPRRPR试验相同试验相同用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒用红色的甲苯胺红替代了碳颗粒其余的特点均与其余的特点均与RPRRPR相同相同检测方法检测方法非梅毒螺旋体血清试验临床意义非梅毒螺旋体血清试验临床意义n非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、敏感性和特异性较好。

适用于大量人群的筛查。

感性和特异性较好。

适用于大量人群的筛查。

n早期梅毒硬下疳出现早期梅毒硬下疳出现11周周-2-2周后，血清可呈阳性。

周后，血清可呈阳性。

n经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。

观察、判愈、复发或再感染的指征。

检测方法检测方法-非梅毒螺旋体血清试验特点非梅毒螺旋体血清试验特点n前带现象前带现象指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存指非梅毒螺旋体抗原血清试验中，有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性在高浓度的抗体时出现的弱阳性、不典型或阴性反应的结果，而临床上又象二期梅毒，此时将血反应的结果，而临床上又象二期梅毒，此时将血清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现清稀释后再进行试验，出现了阳性的结果，该现象称为前带现象。

象称为前带现象。

检测方法检测方法-梅毒螺旋体血清试验梅毒螺旋体血清试验采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体反应。

采用梅毒螺旋体作抗原，是特异性的抗原体反应。

n梅毒螺旋体血球凝集试验（梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHATPHA）n梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TP-PATP-PA）n荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABSFTA-ABS）、）、n梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验（ELSA-TPELSA-TP）n梅毒螺旋体蛋白印迹试验（梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB-TestWB-Test）检测方法检测方法-梅毒螺旋体血清试验梅毒螺旋体血清试验nnTPPATPPATPPATPPA试验原理与试验原理与TPHATPHA试验基本相同。

试验基本相同。

TPPATPPA试验用试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHATPHA试验中致敏羊红细胞，试验中致敏羊红细胞，此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可见的凝集反应，具有较高的敏感性。

明胶粒子为洋红可见的凝集反应，具有较高的敏感性。

明胶粒子为洋红色，在操作部步上也较为方便，出结果较快。

色，在操作部步上也较为方便，出结果较快。

+SheepredcellT.pallidum+SensitisedcellSensitisedcellSpecificAntibodyHemagglutinationTPPA/TPHATPPA/TPHA检测方法检测方法-梅毒螺旋体血清试验梅毒螺旋体血清试验nFTA-ABSFTA-ABS其原理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸收其原理是将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸收剂（用剂（用ReiterReiter螺旋体制备而成）吸收过的梅毒患者血清形螺旋体制备而成）吸收过的梅毒患者血清形成抗原抗体复合物，再加入荧光素（成抗原抗体复合物，再加入荧光素（FTICFTIC）标记的抗人）标记的抗人免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗体结合，形成荧光的抗原免疫球蛋白，与抗梅毒螺旋体抗体结合，形成荧光的抗原抗体复合物。

在荧光显微镜下，螺旋体显出苹果绿色的荧抗体复合物。

在荧光显微镜下，螺旋体显出苹果绿色的荧光，即为阳性反应。

光，即为阳性反应。

FTA-ABSFTA-ABS试验是检测梅毒的试验是检测梅毒的“金标准金标准”试验。

试验。

检测方法检测方法-梅毒螺旋体血清试验的临床意义梅毒螺旋体血清试验的临床意义n作为非梅毒螺旋体抗原血清试验作为非梅毒螺旋体抗原血清试验（如如RPRRPR等等）初筛阳性标本初筛阳性标本的确证试验。

的确证试验。

n梅毒患者经过抗梅治疗后，梅毒患者经过抗梅治疗后，TPPATPPA试验仍可阳性，故试验仍可阳性，故TPPATPPA试验阳性不能作为疗效观察的指标。

试验阳性不能作为疗效观察的指标。

nTPPATPPA阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒阳性不能区分既往感染和现症感染，应结合非梅毒螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。

螺旋体抗原血清试验结果进行诊断。

非梅毒螺旋体抗原血清学试验结果解释示意图早早期期晚晚期期一期一期二期二期早期潜伏早期潜伏晚期潜伏晚期潜伏三期三期nn治疗前治疗前治疗前治疗前治疗后治疗后治疗后治疗后阳性阳性阴性阴性梅毒螺旋体抗原血清学试验结果解释示意图梅毒螺旋体抗原血清学试验结果解释示意图早早期期一期一期二期二期早期潜伏早期潜伏晚晚期期晚期潜伏晚期潜伏三期三期nn治疗前治疗前治疗前治疗前治疗后治疗后治疗后治疗后阳性阳性阴性阴性梅毒血清学试验结果的临床意义总汇梅毒血清学试验结果的临床意义总汇USRTPHAUSRTPHA意义意义RPRTPPARPRTPPAVDRLFTA-ABSVDRLFTA-ABS____排除梅毒排除梅毒一期梅毒的早期一期梅毒的早期艾滋病患者合并梅毒艾滋病患者合并梅毒+现症梅毒现症梅毒（梅毒孕妇所生梅毒孕妇所生的婴儿除外的婴儿除外）+-+-生物学假阳性生物学假阳性-+-+早期梅毒经治疗后早期梅毒经治疗后前带现象前带现象二、淋二、淋病病概况-病原学nn淋病是指由淋病奈瑟菌淋病是指由淋病奈瑟菌（NeisseriaNeisseriagonorrhoeaegonorrhoeae,简称淋球菌简称淋球菌）引起的各种引起的各种化脓性感染，是一种经典的常见的性传化脓性感染，是一种经典的常见的性传播疾病播疾病.nn淋球菌为革兰阴性双球菌，大小约淋球菌为革兰阴性双球菌，大小约0.60.80.60.8mm。

通常成对生长，两菌接。

通常成对生长，两菌接触面平坦。

触面平坦。

淋病的实验室诊断方法nn直接显微镜检查；直接显微镜检查；nn分离培养淋球菌；分离培养淋球菌；nn非非培培养养技技术术检检测测淋淋球球菌菌细细胞胞成成份份如如抗抗原原或或DNADNA（EIA,PCR/LCREIA,PCR/LCR）直接显微镜检查染色方法染色方法染色方法染色方法:

革兰染液革兰染液革兰染液革兰染液美兰染液美兰染液美兰染液美兰染液姬姆萨染液姬姆萨染液姬姆萨染液姬姆萨染液荧光抗体荧光抗体荧光抗体荧光抗体革革革革兰兰兰兰染染染染色色色色为为为为一一一一传传传传统统统统方方方方法法法法，因因因因简简简简便便便便、快快快快捷捷捷捷及及及及价价价价廉廉廉廉、仍仍仍仍然然然然为为为为最最最最广广广广泛泛泛泛采采采采用用用用的的的的方方方方法法法法。

革革革革兰兰兰兰染染染染色色色色将将将将菌菌菌菌分分分分为为为为二二二二大大大大类类类类，即即即即染染染染成成成成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。

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