食品毒理学实验讲义文档格式.docx

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实验前1d停止投饵，选择身体健康，反应灵敏，大小基本一致的幼鱼随机分组。

2.实验试剂

CuSO4,先配制成质量浓度为3000mg/L的母液,再根据需要稀释成各质量浓度。

3.实验仪器

聚乙烯塑料水族箱，小型鱼类充氧机。

四、实验方法与步骤

1.实验动物的驯养

实验鱼在水族箱中驯养7d以上，暂养期间活动正常，无病，死亡率低于5%；

实验前1d停止投饵。

2.实验动物的分组

采用随机实验进行分组，将21只鲫鱼随机分成7组，其中一组为空白对照组，另外六组为实验组。

3.实验动物的染毒

采用静水法生物测试，实验期间不更换实验液，全天充气。

为防止饵料影响，实验期间不喂食。

为确定质量浓度的大致范围,先作预实验,估计CuSO4的7个质量浓度值,在每一个质量浓度的水族箱内放入3尾鲫鱼,分别观察24h、48h、96h,找出各金属的100%致死质量浓度和最大耐受质量浓度。

再根据预实验结果设6个质量浓度组及1个对照组,每一质量浓度放鱼5尾,在曝露的过程中观察它们的形态损伤。

五、中毒症状观察

染毒后认真观察中毒发生、发展过程，中毒特点和毒作用靶器官，记录各组幼鱼24、48、96h的形态损伤。

中毒症状的观察现象填入附录中的表格中。

六、注意事项

1.防止操作者中毒。

2.剩余受试化学物应在教师指导下销毁

实验一附录：

预实验实验结果：

（在实验报告上所有的图表自己手写）

CuSO4浓度

（mg/L）

24h形态损伤

48h形态损伤

96h形态损伤

游动是

否活跃

皮肤是否

出现溃烂

是否死亡

及死亡个数

皮肤是否出现溃烂

6.3

是（0）

是

（1）

14.4

23.4

是

（2）

32.4

43.2

是（3）

54.0

0（对照）

无（0）

正式实验实验结果：

浓度1

浓度2

浓度3

浓度4

浓度5

浓度6

经上述实验可得，重金属铜对鲫鱼的形态损伤表现为：

实验二毒物的急性毒性试验

1.掌握急性毒性试验的基本步骤及如何设计染毒的剂量与分组；

2.掌握LD50的测定方法及计算方法。

急性毒性是机体一次接触或24h内多次接触大剂量外源化学物后所引起的快速剧烈的中毒效应。

硫酸铜是常见的一种化学毒物，鱼类早期发育是整个生活史中对各种污染物最为敏感的阶段，用以作为急性毒性试验具有快速、敏感、经济有效等特点，是生物测试保护天然水体的重要方法。

本实验以鲫鱼为研究对象，向其生长环境中加入重金属硫酸铜，观察硫酸铜急性毒性反应的特征。

1.实验试剂

硫酸铜，先配制成质量浓度为3000mg/L的母液,再根据需要稀释成各质量浓度。

2.实验仪器

3.实验动物

四、实验方法及步骤

1.实验动物驯养及分组

实验动物驯养及分组见实验一。

2.预试验

为防止饵料影响，实验期间不喂食，估计硫酸铜的7个质量浓度值，求出受试化学物的大致致死范围（0-100%）。

3.正式试验

根据预备实验结果设6个质量浓度组及一个对照组,每一质量浓度放鱼5尾,在曝露的过程中观察它们死亡效应。

中毒后,多次刺激无反应判断为死亡个体,从水中随时捞出。

五、LD50的计算

记录各组幼鱼24、48、96h死亡数,计算死亡率,画出硫酸铜浓度与死亡率的曲线.找出各重金属的半数致死质量浓度（LD50）。

实验数据填写在附录中的表格中。

1.不要一味将注意力集中在高剂量组的动物，因为这些动物往往死亡很快，反而不容易观察到中毒的发展过程。

2.观察记录应尽量完整、具体。

实验二附录：

24h死亡率

48h死亡率

96h死亡率

死亡个数

死亡率

浓度2

对照

实验数据：

依据上述实验数据分别画出染毒24h、48h、72h及96h后的剂量-反应曲线，得染毒24h、48h、72h及96h后的LD50，各曲线如下所示：

（此区域画曲线）

由上述曲线可得，染毒24h、48h及96h后的LD50分别为：

实验三毒物的安全浓度实验

1.掌握安全浓度的概念；

2.掌握安全浓度测定的基本步骤及计算方法。

安全质量浓度即为某一毒物对动物体不造成损伤的质量浓度范围，通常由LC50×

0.1计算出。

本实验以鲫鱼为研究对象，向其生长环境中加入重金属硫酸铜，计算硫酸铜对鲫鱼的安全质量浓度。

三、实验动物、试剂及仪器

CuSO4,先配制成质量浓度为3000mg/L的母液,再根据需要稀释成各质量浓度。

聚乙烯塑料水族箱、小型鱼类充氧机。

四、实验步骤

2.染毒步骤与方法

为确定质量浓度的大致范围,先作预备实验,估计CuSO4的7个质量浓度值,在每一个质量浓度的水族箱内放入3尾鲫鱼,分别观察24h、48h、96h，找出各金属的100%致死质量浓度和最大耐受质量浓度。

再根据预实验结果设6个质量浓度组及一个对照组,每一质量浓度放鱼5尾,在曝露的过程中观察它们的行为、中毒症状、死亡等效应。

中毒后，多次刺激无反应判断为死亡个体,从水中随时捞出。

五、安全质量浓度的计算

记录各组幼鱼24、48、96h死亡数,计算死亡率,画图求出各重金属的半数致死质量浓度（LC50），由公式LC50×

0.1计算出安全质量浓度。

2.观察记录应尽量完整、具体。

3.剩余受试化学物应在教师指导下销毁。

结果计算填以下内容：

由实验二得染毒24h、48h、及96h后的LD50，分别为，，，由下列公式：

安全质量浓度=LC50×

0.1

得染毒24h、48h及96h的安全质量浓度分别为，，。