Rh血型抗体的检测及结果分析.docx

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Rh血型抗体的检测及结果分析

Rh血型抗体的检测及结果分析

作者：

吴远军,吴勇,陈宝婵,刘艳

【摘要】　　目的:

调查Rh血型抗体的检出率及其特异性分布特点,分析Rh血型抗体的临床意义及产生规律。

方法:

采用微柱凝胶抗球蛋白技术筛查和鉴定红细胞血型不规则抗体,对鉴定为Rh血型抗体者,采用单克隆抗D、抗C、抗c、抗E、抗e鉴定红细胞Rh血型抗原,以确认抗体的准确性;检测抗体的效价、Ig类型及37℃反应性,以明确其临床意义;询问孕产史、输血史,如果为新生儿检测其母亲血浆中是否有相同特异性的抗体,以分析抗体产生的原因。

结果:

就诊者54000例,共检出Rh血型抗体47例,检出率为0.087%,其中有妊娠史者27例,有输血史者13例,既有妊娠史又有输血史者1例,抗体来自母体的新生儿6例;抗体的特异性为:

抗E29例（61.70%）、抗D8例（17.02%）、抗cE5例（10.64%）、抗c4例（8.51%）、抗C1例（2.13%）;47例Rh血型抗体均为IgG或IgG+IgM类,37℃均可与具有相应抗原的红细胞反应,抗体效价介于1～4096。

结论:

被检就诊者Rh血型抗体的检出率低于白种人;在检出的Rh血型抗体中,抗E占绝对多数,而抗D的检出率呈逐步减少的趋势;妊娠和输血引起的同种免疫是Rh血型抗体产生的原因,新生儿自母体被动获得的Rh血型抗体是NonABOHDN最主要的致病抗体。

【关键词】Rh血型不规则抗体免疫溶血性输血反应新生儿溶血病微柱凝胶抗球蛋白试验

　　[Abstract]AIM:

TostudytheprevalenceanddistributionofantiRhbloodgroupantibodiesinChinesepopulationanditsclinicalsignificance.METHODS:

IrregularantibodieswerescreenedandidentifiedbyMicrocolumGelCoomb’stest.ForthoseidentifiedaspositiveantiRhsamples,monoclonalantibodies（antiD,C,c,Eande）wereusedtoidentifythespecificantigenandconfirmtheaccuracyoftheirregularantibodytests.Thetiters,Igtypesand37℃reactivityweretestedtoconfirmitsclinicalsiginificance.Forevaluationoftheoriginofirregularantibodies,historiesofpregnancyandtransfusionwerereviewed.Forthenewbornswhohadpositiveantibodies,theirmothersweretestedsimultaneouslytoconfirmtheoriginoftheantibodies.RESULTS:

47outof54000（0.087%）patientswereidentifiedaspositivewithRhbloodgroupantibodies.Ofthem,27caseshadhistoryofpregnancy,13hadtransfusionand1hadthehistoriesofboth.6newbornshadantibodiesderivedformtheirmothers.Thespecificityoftheantibodywasasfollows:

29withantiE（61.70%）,8withantiD（17.02%）,anticE5（10.64%）,4withantic（8.51%）and1withantiC（2.13%）.Allthe47RhbloodgroupantibodieswereIgGorIgG+IgM,andwerereactivetoredbloodcellswithcorrespondingantigensat37℃,withahighesttiterof1∶4096.CONCLUSION:

TheprevalenceofRhantibodiesislowerinChinesepopulationascomparedwiththatinWhitepopulation.Ofalltheantibodies,antiEismostfrequentlyidentifiedandantiDwasdeclining.AlloimmunizationbypregnancyandtransfusionisthemajorcausofRhantibodyproduction.RhbloodgroupantibodiesderivedfrommothersarethemajorcauseofNonABOHDN.

　　[Keywords]Rhbloodgroup;irregularantibodies;immunehemolytictransfusionreaction;haemolyticdiseaseofthefetusandnewborn;MicrocolumGelCoomb'stest

　　Rh血型抗体是除ABO血型系统以外最具临床意义的红细胞血型抗体,常引起免疫溶血性输血反应（HTR）及新生儿溶血病（HDN）,调查Rh血型抗体的检出率及特异性分布情况,了解Rh血型抗体产生的规律,对预防HTR及HDN具有重要的临床意义。

我们采用微柱凝胶抗球蛋白技术,检测了54000例就诊者的红细胞血型不规则抗体,共检出Rh血型抗体47例,并对其产生的原因进行了调查分析。

　　1材料和方法

　　1.1材料研究对象:

2004-05/2007-05,在我院就诊的手术患者、需要或预备输血的非手术患者、孕妇、部分新生儿及健康体检者共54000例,其中男25000例,女29000例,年龄1d～99岁。

仪器试剂:

微柱凝胶抗球蛋白卡及专用孵育器、离心机为长春博迅生物技术有限责任公司生产;筛检红细胞、谱红细胞为上海市血液生物医药有限公司生产;0.2mol/L2Me（2巯基乙醇）为本实验室配制;单克隆抗D、抗C、抗c、抗E、抗e为美国DBL公司生产。

　　1.2方法

　　1.2.1红细胞血型不规则抗体的筛查被检者EDTA·k2抗凝血标本3mL,3000r/min离心5min后,采用微柱凝胶抗球蛋白技术,使被检者血浆与筛检红细胞（3人份O型红细胞）反应,筛查红细胞血型不规则抗体。

被检者血浆与3人份筛检红细胞中任何1、2人份或3人份有凝集者为阳性,与3人份筛检红细胞均无凝集者为阴性。

　　1.2.2红细胞血型不规则抗体的特异性鉴定将红细胞血型不规则抗体筛查结果为阳性研究对象的血浆,采用微柱凝胶抗球蛋白技术分别与由10人份O型红细胞组成的谱红细胞及自身红细胞（均为1%）反应。

与谱红细胞中1至数人份凝集,与自身红细胞不凝集者为特异性抗体,并根据与谱红细胞的反应格局判定抗体的特异性;对鉴定为Rh血型抗体者,采用单克隆抗D、抗C、抗c、抗E、抗e试剂检测Rh血型以确认所检抗体的准确性,并询问孕产史、输血史,如果为新生儿检测其母亲血浆中是否有相同特异性的抗体,以分析抗体产生的原因。

　　1.2.3Rh血型抗体免疫球蛋白类型的鉴定取检出Rh血型抗体者的血浆0.2mL加入等量0.2mol/L2Me后密封,37℃孵育30min后用生理盐水倍比稀释,采用微柱凝胶抗球蛋白技术与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应,效价与2Me处理前无变化者为IgG类抗体,效价与2Me处理前有所降低、但仍有反应者为IgG+IgM抗体,2Me处理后与具有相应血型抗原的红细胞无反应者为IgM类抗体。

　　1.2.4Rh血型抗体37℃反应性的鉴定采用盐水法、试管间接抗球蛋白试验2种方法分别使被检者血浆与具有相应Rh血型抗原的红细胞反应,只要其中任何一种方法在37℃有凝集即可判断为37℃有反应的抗体,具有临床意义。

　　1.2.5Rh血型抗体效价测定取检出Rh血型抗体者的血浆用生理盐水倍比稀释后,采用微柱凝胶抗球蛋白试验,与具有抗体对应的Rh血型抗原的红细胞反应以检测其效价。

　　1.2.6检出Rh血型抗体的新生儿血型血清学试验对检出Rh血型抗体的新生儿,鉴定Rh血型、做红细胞直接抗球蛋白试验（DAT）及红细胞放散试验,并鉴定放散液中的抗体及其特异性。

　　2结果

　　2.1Rh血型抗体的检出率及在不同就诊人群中的分布就诊者54000例,检出Rh血型抗体47例（检出率为0.087%）,其中男13例（占被检男性0.052%）,女34例（占被检女性的0.117%）。

检出的47例Rh血型抗体阳性者中41例为成人（占87.234%）,6例为出生1d的新生儿（占12.766%）。

41例Rh血型抗体阳性成人中,有妊娠史者27例（占57.447%）,其中孕妇12例（占25.532%）;有输血史者13例（占27.660%）;既有妊娠史又有输血史者1例（占2.128%）。

6例新生儿的抗体均来自母体,其母亲均为以上检出Rh血型抗体的12例孕妇中的6例,新生儿抗体特异性与其母亲抗体特异性完全一致,新生儿红细胞直接抗球蛋白试验（DAT）及红细胞放散试验均为阳性,符合NonABOHDN诊断,占同时期检出的11例NonABOHDN患儿的54.545%。

12例Rh血型抗体阳性的孕妇中除6例所产新生儿被诊断为NonABOHDN外,另有2例发生了宫内死胎,其余4例孕妇Rh血型抗体效价均≤4,所产新生儿血浆中均未检出Rh血型抗体。

除新生儿外,既无妊娠史又无输血史者均未检出Rh血型抗体。

　　2.2Rh血型抗体的特异性分布检出47例Rh血型抗体的特异性分布为:

抗E29例（61.702%）、抗D8例（17.021%）、抗cE5例（10.638%）、抗c4例（8.511%）、抗C1例（2.128%）。

　　2.3Rh血型抗体的效价、Ig类型及37℃反应性检出的47例Rh血型抗体效价介于1～4096,其中效价为4096者1例（抗D）,效价为2048者2例（抗D、抗E各1例）,效价为256者1例（抗D）,效价为128者1例（抗cE）,效价为64者3例（均为抗E）,效价为32者5例（抗D1例、抗E2例、抗cE2例）,效价介于1～16者33例（抗E23例、抗D4例、抗cE2例、抗c4例、抗C1例）。

47例Rh血型抗体均为IgG或IgG+IgM,在37℃均可与具有相应抗原的红细胞反应。

　　3讨论

　　Rh血型系统是已发现的29个人类红细胞血型系统中最具遗传多态性的红细胞血型系统,所表达的血型抗原多