肠杆菌科Word格式.docx

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（1）O-Ag：

菌体抗原，为细胞壁LPS最外侧的重复寡糖单位，决定O抗原的特异性。

（2）H-Ag：

鞭毛抗原，蛋白质成分，不耐热，特异性强；

可发生H-O变异。

（3）K/Vi-Ag：

为荚膜成分，如大肠杆菌的K抗原、伤寒杆菌Vi抗原，能阻抑O凝集

（4）F-Ag：

菌毛抗原，是细菌表面的黏附结构，能阻断O凝集

（5）肠道杆菌共同抗原：

抗原决定簇位于LPS的核心多糖上，在细菌鉴定和分类中有一定的意义

7.三种菌属比较

大肠细菌Escherichia

1.大肠细菌（E.coli）：

为埃希菌属（Escherichia）代表菌。

为人和动物肠道中的常居菌，一般多不致病，在一定条件下可引起肠道外感染，统称病普通大肠杆菌。

某些血清型菌株的致病性强，引起腹泻，统称病致病大肠杆菌。

2.普通大肠杆菌：

为正常菌群成员，具有刺激免疫系统、提供营养成分、构成肠道生物屏障、解毒等作用。

（1）作为水源是否被污染的依据：

　　我国饮水；

细菌总数≤100个/ml,大肠菌群数≤3个/L;

　　饮料：

细菌总数≤100个/ml,大肠菌群数≤5个/100ml。

（2）普通大肠杆菌所致疾病

A.肠道外感染：

多为内源性感染，泌尿系感染为主，如尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎、上行性尿道感染多见于已婚妇女。

也可引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎等。

B.婴儿、年老体弱、慢性消耗性疾病、大面积烧伤患者，大肠杆菌可侵入血流，引起败血症。

C.早产儿，尤其是生后30天内的新生儿，易患大肠杆菌性脑膜炎。

3.致病性E.coli

（1）肠产毒性大肠杆菌（ETEC）：

引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度腹泻，也可呈严重的霍乱样症状即大量的米泔水样便。

腹泻常为自限性，一般2～3天即愈。

营养不良者可达数周，也可反复发作。

致病因素是LT或ST，或两者同时致病。

有些菌株具有定居因子，常见者为O6:

K15:

H16、O25:

K7:

H42。

鉴定ETEC主要测定大肠杆菌肠毒素，血清型有一定参考意义。

（2）肠致病性大肠杆菌（EPEC）：

是婴儿腹泻的主要病原菌，有高度传染性，严重者可致死；

成人少见。

细菌侵入肠道后，主要在小肠大量繁殖。

发热、恶心、呕吐、非血性便。

切片标本中可见细菌粘附于绒毛，导致刷状缘破坏、绒毛萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损，造成严重腹泻,作用与志贺毒素相似，具有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。

常见者为O26、O55、O86。

鉴定EPEC可根据临床表现、生化反应与血清型。

（3）肠侵袭性大肠杆菌（EIEC）：

为粪—口途径感染，与菌痢的发病机理相似，临床症状也类于菌痢即里急后重，且无动力故易误诊为细菌性痢疾。

常见者为O28、O124等。

鉴定EIEC可根据内毒素与定居因子。

（4）肠出血性大肠杆菌（EHEC）：

引起散发性或暴发性出血性结肠炎，可产生志贺毒素样细胞毒素（Vero毒素）。

EHEC的主要菌型是O157：

H7，还可有O26、OⅢ等。

鉴定EHEC可根据临床表现、生化反应志贺毒素与血清型。

（5）肠集聚性大肠杆菌（EAEC）：

引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便，不侵袭细胞。

毒素为肠集聚耐热毒素（enteroaggregativeheat-stabletoxin,EAST）；

另一类毒素似大肠埃稀菌的α溶血素。

4.致病物质及其作用

5.LT、ST性质比较

6.致病物质

（1）定居因子（Colonizationfactor,　CF）：

也称粘附素（Adhesin），即大肠杆菌的菌毛。

具有较强的免疫原性，能刺激机体产生特异性抗体。

（2）胞壁脂多糖的类脂A具有毒性。

（3）O特异多糖有抵抗宿主防御屏障的作用。

（4）大肠杆菌的K抗原有抗吞噬作用。

（5）肠毒素：

外毒素（只有肠产毒性大肠杆菌产生）

A.不耐热肠毒素（Heatlabileenterotoxin,LT）：

对热不稳定，65℃经30分钟即失活。

为蛋白质，有免疫原性。

由A、B两个亚单位组成。

LT的免疫原性与霍乱弧菌肠毒素相似，两者的抗血清交叉中和作用。

B.耐热肠毒素（Heatstableenterotoxin,ST）：

对热稳定，100℃经20分钟仍不被破坏，免疫原性弱。

ST可激活小肠上皮细胞的鸟苷酸环化酶，使胞内cGMP增加，在空肠部分改变液体的运转，使肠腔积液而引起腹泻。

ST与霍乱毒素无共同的抗原关系。

7.微生物学检查法

（一）卫生细菌学检查

1．细菌总数：

检测每毫升或每克样品中所含细菌数，采用倾注培养计算。

我国规定的

卫生标准是每毫升饮水中细菌总数不得超过100个。

2．大肠菌数指数：

指每立升中大肠菌群数，采用乳糖发酵法检测。

我国的卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群；

瓶装汽水、果汁等每100ml大肠菌群不得超过5个。

大肠杆菌不断随粪便排出体外，污染周围环境和水源、食品等。

取样检查时，样品中大肠杆菌越多，表示样品被粪便污染越严重，也表明样品中存在肠道致病菌的可能性越大。

故应对饮水、食品、饮料进行卫生细菌学检查。

8.临床微生物学检查

（1）形态学特征：

G-杆菌，大小0.4～0.7×

1～3μm,大多数菌株有动力，有普通菌毛与性

菌毛，有些菌株有多糖类包膜，无芽胞。

在血琼脂平板上，有些菌株β溶血。

在SS或CB选择性培养基上形成有颜色、直径2～3mm的光滑型菌落。

大部分菌株发酵乳糖产酸产气，IMViC试验为“++--”，即为大肠菌群。

C（IMVIC）++--、KIAAA+-、MIU++-、

9.抗原构造：

较复杂，有O、K、H、F四种抗原。

表明大肠杆菌血清型的方式是按O：

K：

H排列，例如O111:

K58:

H2。

（1）O抗原为脂多糖，H鞭毛抗原。

（2）K抗原为荚膜脂多糖抗原。

从病人新分离的大肠杆菌多有K抗原，有抗吞噬和补体杀菌作用。

（3）F抗原至少有5种，与大肠杆菌的粘附作用有关。

10.抵抗力：

（1）该菌对热的抵抗力较其他肠道杆菌强，

（2）55℃经60分钟或60℃加热15分钟仍有部分细菌存活。

（3）在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更久。

（4）胆盐、煌绿等对大肠杆菌有抑制作用。

（5）对磺胺类、链霉素、氯霉素等敏感，但易耐药，是由带有R因子的质粒转移而获得的。

11.临床微生物学检查：

肠内感染、ETEC分离培养+生化+血清分型+毒素、

毒素检测、乳鼠灌胃试验ST、CHOLT。

（1）标本：

血液、脓液、脑脊液等，腹泻者取粪便。

（2）分离培养与鉴定：

粪便标本直接接种肠道杆菌选择性培养基（s-s琼脂）。

血液需先经肉汤增菌，再转种血琼脂平板。

采用一系列生化反应进行鉴定。

肠致病性大肠杆菌须先作血清学定型试验。

必要时检定肠霉毒素。

（3）EPEC：

分离培养+生化+血清学试验（ELISA）

（4）EIEC：

①分离培养+生化反应+血清分型+毒力试验；

②赖氨酸脱羧酶阴性；

③无动力；

④不发酵或迟缓发酵乳糖（O152O124乳糖阴性）；

上述与志贺菌相似，鉴别试验为醋酸钠、葡萄糖铵利用和粘质酸盐产酸试验

EIEC阳性；

志贺菌阴性

（5）EHEC：

山梨醇麦康凯琼脂，不发酵山梨醇，为无色菌落，次代培养后用胶乳凝集试

验决定抗原为O157。

12.防治原则：

在肠产毒性大肠杆菌的免疫预防研究中，发现其菌毛抗原在自然感染和人工自动免疫中是一种关键性抗原。

治疗可选用庆大霉素、丁胺卡那霉素等。

沙门菌属（Salmonella）

1.目前至少有67种O抗原和2000个以上血清型，所致疾病称沙门菌病。

根据其对宿主的致病性，可分为三类：

①对人致病；

②对人和动物均致病；

③对动物致病。

与人类关系密切的沙门菌有：

伤寒沙门菌（S.typhi），甲、乙、丙型副伤寒沙门，鼠伤寒沙门菌，猪霍乱沙门菌，肠炎沙门菌等十余种。

2.致病物质：

（1）侵袭力：

沙门杆菌侵入小肠粘膜上皮细胞，穿过上皮细胞层到达上皮下组织。

细菌虽被细胞吞噬，但不被杀灭，并在其中继续生长繁殖。

菌毛的粘附作用也是细菌侵袭力的一个因素。

（2）内毒素：

引起发热、白细胞减少。

大剂量时可发生中毒性休克

（3）肠毒素：

有些沙门杆菌，如鼠伤寒杆菌可产生肠毒素，性质类似肠产毒性大肠杆菌的肠毒素。

3.人类的沙门菌病：

肠热证、急性胃肠炎、败血症

（1）肠热症：

①是伤寒病和副伤寒病的总称，主要由伤寒杆菌和甲、乙、丙型副伤寒杆菌引起。

②第1周，细菌在肠系膜淋巴结及其他淋巴组织中繁殖，经胸导管进入血流，引起第一次菌血症。

称前驱期。

③第2～3周，细菌随血流至骨髓、肝、脾、肾、胆囊、皮肤等并在其中繁殖，再次进入血流，引起第二次菌血症。

部分病例皮肤出现玫瑰疹。

④第4周，部分菌可再次侵入肠壁淋巴组织，出现超敏反应，进入恢复期，患者逐渐康复。

⑤典型伤寒的病程约3～4周。

病愈后部分患者可自粪便或尿液继续排菌3周至3个月，称恢复期带菌者。

约有3%的伤寒患者成为慢性带菌者。

⑥副伤寒病与伤寒病症状相似，但一般较轻，病程较短，约1～3周即愈。

（2）急性胃肠炎（食物中毒）：

是最常见的沙门杆菌感染。

多由鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆菌、肠炎杆菌等引起。

系因食入未煮熟的病畜病禽的肉类、蛋类而发病。

潜伏期短，病程较短，一般2～4天内可完全恢复。

（3）败血症：

常由猪霍乱杆菌、丙型副伤寒杆菌、鼠伤寒杆菌、肠炎杆菌等引起。

病菌进入肠道后，迅速侵入血流，导致组织器官感染，如脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、肾盂肾炎、心内膜炎等。

出现高热、寒战、厌食、贫血等。

4.免疫性：

①伤寒或副伤寒病后有牢固的免疫性，很少再感染。

主要依靠细胞免疫。

②体液免疫方面，局部抗体较重要，尤其是SlgA具有特异性防止伤寒杆菌粘附

于肠粘膜表面的能力。

5.微生物学检查

6.病原学检查

7.形态与染色：

大小0.6～1.0×

2～3um，无芽胞，一般有鞭毛，无荚膜，多数有菌毛，革兰阴性杆菌。

8.培养特性：

兼性厌氧菌，在普通琼脂平板上形成中等大小、半透明的S型菌落。

在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。

9.常见沙门菌的主要生化特性

菌种

KIA

MIU

甲基红

（Mr）

枸橼酸盐

（C）

苯 

丙 

氨 

酸

斜面

底层

产气

硫化氢

动力

吲哚

脲酶

大肠埃希菌

A

+

-

福氏志贺菌

K

-/+

+/-

宋内氏志贺菌

伤寒沙门氏菌

甲型副伤寒菌

乙型副伤寒菌

肺炎克雷伯菌

变形杆菌

10.生化反应特点：

大多产生硫化氢。

发酵1、3、4，不发酵2、5，除伤寒杆菌产酸不产气外，其他沙门菌均产酸产气。

11.抗原结构

　表面抗原Vi抗原（伤寒、PC）、M抗原、S抗原

O抗原分群依据，A~F群（IgM）

H抗原分型依据，分2个相：

第一相---特异相；

第二相---非特异相（IgG）

12.噬菌体分型：

有些沙门菌在血清学分型的基础上，可借噬菌体进一步分型。

分为96个噬菌体型。

我国常见者有12个型。

伤寒杆菌的噬菌体分型在追踪传染源及发现新型菌株上有实际意义。

13.抵抗力：

（1）对热抵抗力不强，60℃1小时或65℃经15～20分钟可被杀死。

（2）在水中能存活2～3周，类便中可活1～2个月，可在冰冻土壤中过冬。

（3）胆盐、煌绿等对本属细菌的抑制作用较对其他肠道杆菌为小，故可用其制备肠道杆菌选择性培养基，利于分离粪便中的沙门菌。

14.变异

（1）H-O变异：

（2）S-R变异：

失去O抗原变为R型菌落，细菌的毒力也随之消失。

（3）位相变异：

是第1相、部分是第2相的不同菌落。

（4）V-W变异：

指有Vi抗原的菌株（V型）失去Vi抗原（W型），即细菌与抗O血清凝集而不再与抗Vi血清凝集，称为V-W变异。

（5）位相变异：

将具有第1相和第2相H抗原的沙门杆菌接种于琼脂平板上，所得单个菌落，有些是第1相，有些是第2相。

如任意挑选一个菌落（第1相或第2相），在培养基上多次移种后，其后代又出现部分是第1相，有些是第2相。

15.肥达反应（Widaltest）：

（1）用伤寒杆菌O抗原和伤寒杆菌、甲、乙型副伤寒杆菌的H抗原与待检血作定量凝集试验。

根据抗体含量多少及其增长情况，辅助临床诊断肠热症。

判定结果时必须考虑下述情况：

O≥1:

80感染急性期;

H≥1:

160确定感染细菌;

（2）Widaltest：

（3）Widaltest解释

A.正常抗体水平：

正常人因隐性感染或预防接种，血清中可含有一定量抗体，其效价随各地区情况而不同。

一般说来，O凝集价≥1:

80、H凝集价≥1:

160时才有诊断价值。

B.动态观察：

判断肥达反应结果须结合临床症状、病期等。

单次凝集效价增高，有时不能定论。

如间隔数天重复采用，若效价随病程延长而逐渐上升4倍以上，有诊断意义。

（4）Widaltest结果分析

O与H抗体在诊断上的意义：

①若H、O凝集效价均超过正常值，则感染伤寒、副伤寒的可能性大；

②H与O效价均低，则患肠热症的可能性甚小；

③若H效价高而O不高，可能系预防接种或非特异性回忆反应；

④如O效价高而H不高，可能是感染早期或其他沙门菌感染。

其他：

少数病例在整个病程中，肥达试验始终呈阴性。

可能是

①发病早期曾用大量或多种抗生素治疗；

②患者免疫功能低下。

故本试验阴性时，不宜匆忙地否定诊断。

16.防治原则

（1）采用皮下多次接种死菌苗，虽有一定的保护作用，但常引起局部和全身反应。

（2）可采用氯霉素、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素等，中药白花蛇舌草，穿心莲等有效。

志贺菌属（Shigella）

1.志贺菌属是一类革兰阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。

2.临床特征

（一）致病物质

志贺菌的菌毛能粘附于回肠末端和结肠粘膜的上皮细菌表面，继而在侵袭蛋白作用下穿入上皮细胞内，一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶。

各型痢疾杆菌都具有强烈的内毒素，作用于肠壁，使其通透性增高，促进内毒素吸收，引起发热，神志障碍，甚至中毒性休克等。

能破坏粘膜，形成炎症、溃汤，出现典型的脓血粘液便。

内毒素还作用于肠壁植物神经系统，至肠功能紊乱、肠蠕动失调和氢挛，尤其直肠括约肌痉挛最为明显，出现腹痛、里急后重（频繁便意）等症状。

（3）外毒素——志贺毒素：

为蛋白质，不耐热，75～80℃1小时被破坏。

该毒素具有三种生物活性：

神经毒性，作用于中枢神经系统，引起四肢麻痹、死亡；

细胞毒性，对人肝细胞、猴肾细胞和HeLa细胞均有毒性；

肠毒性，具有类似大肠杆菌、霍乱弧菌肠毒素的活性，可以解释疾病早期出现的水样腹泻。

（二）所致疾病

（1）细菌性痢疾：

最常见的肠道传染病,夏秋两季患者最多。

人类对志贺菌易感，10～200个细菌可使10～50%志愿者致病。

传染源为病人和带菌者，粪口途径传播，潜伏期1-3天。

（2）急性细菌性痢疾：

发病急，常在腹痛、腹泻未出现，呈现严重的全身中毒症状。

（3）慢性细菌性痢疾：

急性菌痢治疗不彻底，或机体抵抗力低、营养不良或伴有其他慢性病时，易转为慢性，病程多在二个月以上。

部分患者可成为带菌者，带菌者不能从事饮食业、炊事及保育工作。

（4）急性中毒型菌痢：

以小儿多见，在消化道症状未出现前，内毒素从肠道吸收入血，引起全身严重的中毒症状，高热、休克、昏迷、呼吸衰竭。

死亡率高。

3.免疫性：

病后免疫力不牢固，机体对菌痢的免疫主要依靠肠道的局部免疫，即肠道粘膜细胞吞噬能力的增强和SlgA的作用。

SlgA可阻止痢疾杆菌粘附到肠粘膜上皮细胞表面，病后三天左右即出现，但维持时间短，由于痢疾杆菌不侵入血液，故血清型抗体（lgM、lgG）不能发挥作用。

4.微生物学检查

（1）形态与染色：

大小为0.5～0.7　×

2～3μm，无芽胞，无荚膜，无鞭毛。

多数有菌毛。

革兰阴性杆菌。

（2）抗原构造与分类：

:

有K和O抗原。

K抗原在血清学分型上无意义，但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。

O抗原分为群特异性抗原和型特异性抗原，根据志贺菌抗原构造的不同，可分为四群48个血清型（包括亚型）。

（3）变异：

S-R型变异：

当菌落变异时，常伴有生化反应、抗原构造和致病性（毒到无毒）的改变。

耐药性变异：

由于广泛使抗生素，志贺菌的耐药菌株不断增加，给防治工作带来多困难。

营养缺陷型变异：

南斯拉夫Mel（1963年）首创的依赖链霉素的志贺菌株（依链株，Sd），作为口服菌苗可预防志贺菌痢疾。

（4）培养特性：

兼性厌氧菌，能在普通培养基上生长，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。

宋内志贺菌形成粗糙型菌落

（5）生化反应：

分解葡萄糖，产酸不产气。

VP试验阴性，不分解尿素，不形成硫化氢，不能利用枸橼酸盐作为碳源。

宋内志贺菌能迟缓发酵乳糖（37℃3～4天）。

志贺菌属生化反应分类：

志贺菌属的分类

A群:

又称痢疾志贺菌（Sh.dysenteriae）,通称志贺痢疾杆菌。

B群：

又称福志贺菌（Sh.flexneri），通称福痢疾杆菌。

C群：

又称鲍志贺菌（Sh.boydii），通称鲍痢疾杆菌。

D群：

又称宋内志贺菌（Sh.sonnei），通称宋内痢疾杆菌。

根据志贺菌的菌型分布调查，我国一些主要城市在过去二、三十年中均以福菌为主。

其次为宋内菌；

志贺菌与鲍菌则较少见。

但近年来，志贺菌Ⅰ型的细菌性痢疾已发展为世界性流行趋势。

了解菌群分布与菌型变迁情况，对制备菌苗，预防菌痢具有重大意义。

5.抵抗力：

①本菌对理化因素的抵抗力较其他肠道杆菌为弱。

②不耐热，一般56～60℃经10分钟即被杀死。

③较耐寒，在冰块中存活96天。

④对化学消毒剂敏感，1%石碳酸15～30分钟死亡。

耶尔森菌属Yersinia

1.革兰阴性小杆菌，包括11个菌种；

鼠疫耶尔森菌；

小肠结肠炎耶尔森菌；

假结核耶尔森菌；

2.鼠疫的发生：

自然疫源性

3.致病性与免疫性：

①贮存宿主：

啮齿类动物（野鼠、家鼠、黄鼠）；

②传播媒介：

主要是鼠蚤；

③传播方式：

鼠→蚤→人；

④致病物质：

内毒素、鼠疫毒素；

⑤毒力决定因子:

F1、VW、Pgm、PI-C-F；

⑥所致疾病：

鼠疫（腺型、败血症型、肺型）；

⑦免疫性：

感染后能获得牢固持久免疫力，再次感染罕见。

4.抗原构造：

F1抗原（封套抗原）:

抗原性强,特异性高,不耐热；

V/W毒力抗原：

抗吞噬作用；

T抗原（鼠疫毒素）；

外膜抗原；

5.防治原则：

灭鼠灭蚤，消灭疫源、切断传播途径；

鼠疫菌苗预防接种；

早期足量使用抗菌药物治疗；

6.微生物学检查法：

①法定报告疾病；

②标本：

血液、痰液、淋巴结穿刺液；

③直接涂片镜检；

④分离培养与鉴定：

BAPR型菌落；

⑤生化反应、血清学试验；

⑥检测核酸；

⑦动物试验：

检查毒力；

鼠疫耶尔森菌Yersiniapestis

1.鼠疫（Plague）是引起烈性传染病的病原菌。

也是帝国主义使用的致死性细菌战剂。

革兰阴性短粗杆菌

2.兼性厌氧；

肉汤培养基48h后“钟乳石现象”；

触酶+；

IMViC－＋－－；

3.抵抗力：

对理化因素抵抗力较弱；

自然环境在痰液中能存活36天，在蚤粪、土壤中能存活1年左右。

小肠结肠炎耶氏菌（Y.enterocolitica）

1.革兰阴性短粗杆菌；

O抗原分>

50型；

培养：

低温（22～25℃）生长，BAP溶血型菌落，NyE无色菌落；

生化反应：

脲酶＋；

2.临床特征：

人畜共患疾病；

致病物质：

耐热肠毒素；

小肠结肠炎【胃肠炎（或小肠结肠炎）型；

回肠末端炎、阑尾炎和肠系膜淋巴结炎型；

结节性红斑与关节炎型（自身免疫病）；

败血症型；

】

3.微生物学检查法

（1）标本：

粪便；

（2）冷增菌培养：

按1/10接种量接种到胰蛋白胨水，置26℃4h～6h进行预增菌，然后再取1.0mL预增菌液转种专用培养基；

（3）分离培养与鉴定：

MAC、NyE、CIN；

（4）生化反应：

KIA、MIU、脲酶；

（5）血清学试验：

分型；

假结核耶氏菌（Y.pseudotuberculosis）

1.结核样肉芽肿；

引起的疾病与小肠结肠炎耶氏菌相似【胃肠炎；

肠系膜淋巴结肉芽肿；

回肠末端炎；

克雷伯菌属Klebsiella

1.本菌存在于人体肠道、呼吸道。

多为条件致病菌，可引起肺炎、支气管炎、泌尿系和创伤感染，甚至败血症