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7. 

水母发光蛋白是由236个氨基酸构成,现已将编码这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,应用在转基因技术中。

这种蛋白质的作用是

促使目的基因顺利导入受体细胞 

促使目的基因在宿主细胞中进行复制

检测目的基因是否导入成功 

检测目的基因是否成功表达

8. 

下列有关生物工程技术的说法,肯定正确的是

工程常以抗菌素抗性基因作为目的基因

重组质粒的形成是在细胞内完成的

原生质体融合而形成的杂种细胞的染色体数并不一定是2N×

2

基因工程成功的标志是目的基因可以随受体细胞的繁殖而复制

*9. 

我国中科院上海生化研究所合成了一种具有镇痛作用而又不会像吗啡那样使病人上瘾的药物——脑啡肽多糖(类似于人体中的糖蛋白)。

在人体细胞中糖蛋白必须经过内质网和高尔基体的进一步加工才能形成。

如果要采用基因工程和发酵工程技术让微生物来生产脑啡肽多糖,应该用下列哪种微生物作为受体细胞

大肠杆菌 

酵母菌 

C.T4噬菌体 

大肠杆菌质粒

10. 

采用基因工程技术将人的凝血因子基因导入山羊的受精卵中,培育出了转基因羊。

但是,人的凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中。

以下有关的叙述,正确的是

人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目,等于凝血因子氨基酸数目的3倍

可用显微注射技术将含有人凝血因子基因的重组DNA分子导入羊的受精卵

在该转基因羊中,人凝血因子基因存在于乳腺细胞,而不存在于其他体细胞中

人凝血因子基因开始转录后,DNA 

连接酶以DNA 

分子的一条链为模板合成mRNA

11. 

下列技术依据DNA分子杂交原理的是

①用DNA分子作探针诊断疾病 

②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交 

③快速灵敏地检测饮用水中病毒的含量 

④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子

②③ 

①③ 

③④ 

①④

12. 

下列关于细胞工程的叙述中,错误的是

植物细胞融合必须先制备原生质体

试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面

经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状

用于培养的植物器官或组织属于外植体

13. 

下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是

培养中的人的效应T细胞能产生单克隆抗体 

培养中的人的效应B细胞能够无限增殖

人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 

用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞

14. 

下列不属于动物细胞工程应用的是

大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染

为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞

大规模生产食品添加剂、香料等

利用胚胎移植技术,加快优良种畜的繁殖

15. 

利用细胞工程的方法,以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。

下列相关叙述正确的是

用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体

体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

16. 

下图为植物细胞融合及组织培养过程示意图。

下列说法不正确的是

植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍

杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植物说明杂种细胞具有全能性

尽管愈伤组织可以进行光合作用,但其培养基中仍需要糖类、氨基酸等有机营养

若A的基因型为Rr,B的基因型为Yy,则最终形成的杂种植物的基因型为RrYy

*17. 

试管婴儿、人工种子和克隆动物均属于生物工程的成果,下列叙述正确的是

三者都用到细胞工程技术 

三者都是在体外环境中完成的

试管婴儿属于无性生殖范畴 

人工种子的胚状体是由受精卵发育而成的

18. 

科学家把天竺葵和香茅草进行体细胞杂交,培育出的驱蚊草含有香茅醛,能散发出一种特殊的气味,达到驱蚊且对人体无害的效果。

下列关于驱蚊草培育的叙述中,错误的是

驱蚊草的培育属于细胞工程育种,其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍

驱蚊草培育过程要用纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂

培育过程中形成的愈伤组织,其代谢方式是自养需氧型

在由杂种细胞形成杂种植株的过程中,包含了有丝分裂和细胞分化

*19. 

下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制性内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是

①②③④ 

①②④③ 

①④②③ 

①④③②

20. 

人们发现,蛛丝蛋白比蚕丝蛋白更细,但强度却更大,于是就有人试图通过破解蛛丝蛋白的结构,从而推出其基因结构,以指导对蚕丝蛋白基因的修改,从而让蚕也吐出像蛛丝一样坚韧的丝,此过程的名称和依据的原理分别是

基因突变;

DNA→RNA→蛋白质 

基因工程;

RNA→RNA→蛋白质

蛋白质工程;

蛋白质→RNA→ 

DNA→RNA→蛋白质

(二)多项选择题

*21. 

菊花的紫花和白花性状是由一对等位基因控制的,紫色(R)对白色(r)为显性。

现已克隆到控制紫色的基因R,如果你打算利用上述材料开展研究,那么下表选项中,合理的是

选项

实验方案

实验目的

A

用白花植株和紫花植株杂交

判断基因型

B

将控制开紫花的基因转入其他植物中

改变受体植物花的颜色

C

将R基因转入大肠杆菌并大量表达紫色蛋白

生产紫色蛋白用作染料

D

用紫花杂合子的嫩芽组织培养获得纯合子植株

用于育种

22. 

有关基因工程技术的叙述错误的是

重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体

所有的限制酶都能识别同一种特定的核苷酸序列

选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快

只要目的基因进入了受体细胞就能成功地实现表达

*23. 

下列各项中,a、b、c、d代表的结构不正确的是

A.a——质粒RNA 

B.b——DNA连接酶 

C.c——限制性内切酶 

D.d——外源基因

24. 

某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外其他均相同。

下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是

污染主要不是培养基灭菌时间短造成的

污染主要来源于组织培养所用的离体组织

调节培养基pH不能解决污染问题

调节培养温度不能解决污染问题

25. 

动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。

下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。

从该图提供的信息可以获得的正确结论有

正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 

有无血清对正常细胞培养的影响不同

培养基中补充血清有助于正常细胞的培养 

培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大

(三)非选择题

26. 

回答下列有关动物细胞培养的问题:

(1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 

时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 

此时,瓶壁上形成的细胞层数是 

要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是 

(2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现 

的现象;

但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成 

细胞,该种细胞的黏着性 

,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量 

(3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不被染色,原因是 

(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到 

期的细胞用显微镜进行观察。

(5)在细胞培养过程中,通常在 

条件下保存细胞,因为在这种条件下,细胞中 

的活性降低,细胞 

的速率降低。

(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作 

进行攻击。

*27. 

单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。

镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。

已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。

有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。

下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。

(1)从图中可见,该基因突变是由于 

引起的。

巧合的是,这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。

正常基因该区域上有3个酶切位点,突变基因上只有2个酶切位点,经限制酶切割后,凝胶电泳分离酶切片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱,正常基因显示 

条,突变基因显示 

条。

(2)DNA或RNA分子探针要用 

等标记。

利用核酸分子杂交原理,根据图中突变基因的核苷酸序列(…ACGTGTT…),写出作为探针的核糖核苷酸序列 

(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。

这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅰ-1~Ⅱ-4中基因型为BB的个体是 

,为Bb的个体是 

,为bb的个体是 

28. 

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。

请据图回答:

(1)该方案能达到预期效果吗?

原因是 

(2)图中②为 

过程,常用 

作为诱导剂。

该细胞继承了 

,因此不仅能 

,还有 

的本领。

(3)图中③进行细胞培养,目的是 

(4)在制备破伤风杆菌抗体的过程中,进行了两次筛选,其目的不同,②是通过筛选获得 

,④是通过筛选获得 

(5)图中⑤的培养能获得 

细胞,便于大规模培养。

(6)破伤风杆菌的抗体最终可从 

和 

中提取。

(7)该方案的目的是 

(1)不能 

没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生单一抗体的效应B细胞

(2)细胞融合和筛选 

灭活的病毒 

双亲细胞的遗传物质 

大量增殖 

产生特异性抗体 

(3)在体外条件下大量增殖 

(4)杂交瘤细胞 

产生特定抗体的杂交瘤细胞

(5)足够量杂交瘤 

(6)细胞培养液 

小鼠腹水 

(7)制备单克隆抗体

**29. 

将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗,饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。

以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。

请根据以上图表回答下列问题。

(1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是 

(2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。

表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。

请判断哪一对引物可采用较高的退火温度?

__________。

(3)图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?

(4)为将外源基因转入马铃薯,图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为 

(5)对符合设计要求的重组质粒T进行酶切,假设所用的酶切,可将识别位点完全切开,请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列,对以下酶切结果作出判断。

①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切,得到_________种DNA片段。

②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切,得到_________种DNA片段。

【试题答案】

1.C 

若该线性DNA分子在3个酶切位点切断,得到4种长度不同的DNA 

片段;

若在2个酶切位点切断,得到3种长度不同的DNA 

若在1个酶切位点切断,得到2种长度不同的DNA片段。

因此最多能产生4+3+2=9种长度不同的DNA片段。

2.D 

基因工程是分子水平上的生物工程,具体操作过程:

获取目的基因;

目的基因与运载体的结合;

将目的基因导入受体细胞;

目的基因的检测与鉴定。

该过程不属于人工诱变,有较强的目的性。

3.D 

基因的非编码区上有调控遗传信息表达的核苷酸序列(主要是RNA聚合酶结合位点),对于抗虫棉基因在棉花细胞中的表达不可缺少。

一种氨基酸可以有几个不同的密码子,所以DNA分子中增加一个碱基对,不一定影响蛋白质的功能。

抗虫棉与其他近缘植物杂交,能造成基因污染。

检测棉花对抗生素的抗性,不能确定棉花是否具有抗虫的特性。

4.D 

基因的表达即控制蛋白质的合成,只有合成了相应的蛋白质才能证明目的基因完成了在受体细胞中的表达。

5.B 

基因工程在医药上的应用就是利用DNA探针快速诊断疾病,其原理就是DNA杂交技术,“非典”诊断盒,实际就是冠状病毒的一种DNA探针。

只要已知探针的DNA序列与冠状病毒接触,DNA杂交吻合,就发生颜色反应,从而鉴定“非典”疾病。

6.B 

蛋白质工程通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求,是延伸出来的第二代基因工程。

7.C 

运载体中标记基因的作用是检测目的基因是否导入成功。

8.C 

基因工程中抗菌素基因不是目的基因,而是标记基因;

重组质粒的形成是在细胞外完成的;

基因工程成功的标志是目的基因可以在受体细胞中表达;

2,如两个三倍体的细胞融合后的杂种细胞的染色体数为6N。

9.B 

脑啡肽多糖的化学本质类似于人体中的糖蛋白。

从题中可以看出,糖蛋白的合成必须经过内质网和高尔基体的进一步加工,内质网和高尔基体只存在于真核生物的细胞中。

大肠杆菌是原核生物,只有核糖体,没有内质网和高尔基体;

T4噬菌体属于病毒,没有细胞结构,自己不能合成蛋白质;

酵母菌是真核生物,其细胞中有内质网和高尔基体,可以合成糖蛋白。

10.B 

转基因动物的培育通常使用显微注射技术将外源DNA分子导入动物的受精卵;

真核基因的编码区是间隔的,不连续的,所以人体细胞中凝血因子基因编码区的碱基对数目,远远大于凝血因子氨基酸数目的3倍;

在该转基因羊中,人凝血因子基因既存在于乳腺细胞也存在于其他体细胞中,只是在乳腺细胞中得到了表达;

人凝血因子基因开始转录后,RNA聚合酶以DNA的一条链为模板合成mRNA

11.B 

基因诊断疾病是利用DNA分子杂交原理制作DNA分子探针,鉴定被检测标本上的遗传信息,可以达到检测疾病的目的;

此外,DNA分子探针还可以与被检测的病毒杂交,从而把饮用水中的病毒检测出来,这种方法的特点是快速、灵敏。

12.C 

生物的遗传包括细胞核遗传和细胞质遗传,因此经细胞核移植培育出的新个体应具有供核亲本的性状和供卵亲本的性状。

13.D 

人的效应T 

细胞不能产生抗体,也没有分裂能力;

人的效应B细胞没有分裂能力,不能无限增殖;

成熟的红细胞没有细胞核,不能通过培养获得细胞株;

肝组织经胰蛋白酶处理可获得单个肝细胞。

14.C 

动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等,其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。

在题目中给出的选项中,大规模生产干扰素、为烧伤病人提供移植的皮肤细胞和胚胎移植技术都离不开动物细胞培养。

大规模生产食品添加剂、香料等利用的技术手段是发酵工程。

15.D 

单克隆抗体的制备是首先要给实验小鼠注射抗原,提取得到效应B细胞,再与骨髓瘤细胞融合,得到杂交瘤细胞,筛选并培养(体内或体外)得到单克隆抗体。

单独的效应B细胞有产生抗体的能力,但没有无限增殖的能力,因此在体外培养的情况下是不可能得到大量的单克隆抗体的;

而效应B细胞和骨髓瘤细胞经PEG诱导融合后,还要在特定选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。

16.C 

本题以植物体细胞杂交技术为背景,主要考查植物体细胞杂交的过程。

植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍,突破生殖隔离。

植物体细胞杂交技术的理论基础是细胞的全能性。

离体的植物、细胞组织和器官经过脱分化形成的愈伤组织是不能进行光合作用的。

由于杂种细胞是两种植物的融合,所以杂种细胞应该含有两个亲本的遗传物质。

17.A 

本题重点考查细胞工程和胚胎工程的应用。

试管婴儿在孕育过程中需要经过动物细胞培养,属于有性生殖。

人工种子属于植物细胞工程的应用,人工种子的胚状体是由愈伤组织经过再分化而形成的。

克隆动物要先经过核移植技术,当然也需要动物细胞培养。

核移植技术和动物细胞培养都属于细胞工程的范畴。

18.C 

愈伤组织是体细胞(或杂种细胞)脱分化的产物,细胞中没有叶绿体,不能进行光合作用,必须利用培养基中的有机物才能生存,因此其代谢方式为异养需氧型。

19.C 

本题考查在DNA复制和基因工程中所用各种酶的作用。

限制性内切酶的作用是识别DNA分子中的核苷酸序列,并使每一条链的特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

DNA连接酶是连接被限制性内切酶断开的磷酸二酯键。

而DNA聚合酶和解旋酶则在DNA复制时,分别用于合成子链和解开双链螺旋。

20.D 

该题考查蛋白质工程的操作步骤。

和基因工程不同的是,蛋白质工程是中心法则的逆推,即由蛋白质的功能去预测蛋白质的结构,即氨基酸序列,再预测mRNA的序列。

然后推出其基因结构。

21.AB 

测交的方法可以用来判断显性性状的个体的基因型,若许多个后代全为显性,则为纯合子,否则为杂合子;

基因可以控制生物的性状,但是紫色的色素不一定是蛋白质类物质,因此C不一定获得成功;

幼嫩的组织用于组织培养可以获得脱毒植株,但是其基因型不变,还是和其母本相同,不能得到纯合子。

22.ABD 

运载体不属于工具酶;

不同的限制酶识别的核苷酸序列不同,限制酶具有特异性;

目的基因进入了受体细胞并不一定表达;

细菌由于繁殖快、代谢旺盛,常常用作基因工程的受体细胞。

23.ABC 

本题考查基因工程的步骤。

基因表达载体的构建,运载体质粒经限制性内切酶切割后露出的粘性末端。

外源基因按照碱基互补配对原则,在DNA连接酶的作用下,形成一个重组质粒。

ABCD 

由图可知:

培养基的灭菌时间、pH以及培养温度对污染率的影响不大;

离体组织灭菌时间越长污染率越低,说明离体组织是污染的主要来源。

25.BCD 

从图中可以看出,随着培养时间的延长,癌细胞的数量比正常细胞显著增多,因此正常细胞与癌细胞的增殖速率不相同。

从图中还可以看出,有无血清对正常细胞培养影响很大,而对癌细胞影响不大,因此在培养基中补充血清对正常细胞的培养有利,而对癌细胞的培养,有无血清其结果一样,都是快速繁殖。

解析:

在动物细胞培养过程中,细胞会表现出接触抑制现象,此时是单层细胞。

用胰蛋白酶可以使贴壁的细胞从瓶壁上分离开来。

随着细胞传代培养代数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现衰老甚至死亡的现象,但极少数细胞可以连续增殖,有些细胞会因遗传物质的改变而变成不死性细胞。

由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,而死细胞的细胞膜丧失选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色。

由于中期的染色体形态固定、数目清晰,因此最好选用分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目。

由于冷冻超低温液氮下,细胞中酶的活性降低,细胞新陈代谢的速率降低,通常在此条件下保存细胞。

机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击,会发生排斥反应。

答案:

(1)相互接触 

接触抑制 

单层(或一层) 

胰蛋白酶

(2)衰老甚至死亡 

不死性 

降低 

减少

(3)由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色)

(4)中 

(5)冷冻(或超低温、液氮) 

酶 

新陈代谢 

(6)抗原

27. 

⑴从图中可以看出,与正常的血红蛋白基因B相比,突变的血红蛋白基因b只有一个碱基的改变,即由原来的A变成了T,这种改变属于基因突变;

由于正常基因有3个切点,能将基因切成2个DNA片段,而突变基因由于失去一个切点,不能将基因切成2段而成为1个DNA片段,因此与探针杂交后显示的带谱中,正常基因有2条,而突变基

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