适应性免疫在丙型肝炎病毒持续感染中的作用文档格式.docx

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有研究说明,用真核载体表达的重组膜蛋白免疫黑猩猩,能够爱惜动物免受同株病毒的解决,但是对异株病毒解决却没有明显的爱惜作用。

而且,HCV急性感染后的特异性抗体反映显现较晚,乃至在感染后的2m～4m都无法检测到。

即便显现循环抗体,检测到中和性抗体滴度低且寿命很短,在HCV自限清除后,抗体的滴度减弱乃至消失,并非能爱惜机体免受相同病毒株的再次感染［2］。

另外,Post等［3］报导,部份自

限性感染者的急性恢复与病毒清除可在未生成抗HCV抗体也未发生血清学转化的情形下由细胞免疫完成。

至此,中和抗体在HCV感染进程中的爱惜作用似乎超级有限。

随后的研究发觉,在HCV编码的诸多抗原蛋白质中,与机体爱惜性免疫关系最紧密的中和抗原,恰恰位于变异最大的高变区1（HRV1）。

由于HRV1变异频率较高,当机体针对新表位产生应答时,使机体对原HVR1克隆产生的抗体失去对新表位的识别和有效中和,不能有效地清除病毒准种或其他型别病毒株的感染［4］。

HVR1还能够模拟免疫球蛋白IgG可变区结构,假装成宿主自身抗原,从而达到逃逸体液免疫应答的目的。

　　与上述研究结果相反,在一项关于猿猴实验性HCV持续性感染的实验中,却没有发觉HVR1位点的突变,缺失HVR1的重组HCV病毒也一样具有感染性,尽管其毒力明显减弱而且是自限性的［5］。

进一步研究还发觉,慢性HCV患者体内HVR1的变异速度明显低于急性HCV感染者,在免疫功能较低的患者中HVR1的变异率也较低。

这些研究结果使研究者们开始从头评判HVR1在介导体液免疫中的作用。

令人振奋的是,即便患者HVR1高变,其部份位置的氨基酸残基仍具有必然的保守性,具有相似保守性特点的HVR1之间还存在明显的交叉抗原性［6］。

除HVR1之外,HCV包膜蛋白上还存在其他多个中和表位,这些表位大多位于受体结合区等比较保守的部位。

对这些保守性中和表位进行研究意义重大,可能为诱导交叉反映性的、能抗击不同毒株的中和抗体带来希冀。

　　从目前有限的数据来看,中和抗体在HCV清除中可能并非起要紧作用,但很难给出合理的说明,可能与B细胞表位突变和免疫选择压力有关,也可能是HCV利用自身分子损坏了固有免疫,延缓了中和抗体的产生［7］。

对这些机制进行更深切的研究,无疑有助于咱们公正地熟悉

中和抗体在免疫清除中的作用,不该一贯地以为特异性抗体中和无能,毕竟对一个好的、完全有效的HCV疫苗来讲,广谱交叉爱惜性中和抗体不可或缺。

而且,在了解抗体中和作用的同时,咱们还应该对抗体中和作用之外的功能进行探讨。

Netski等［8］研究发觉,特异性抗体除中和

病毒颗粒外,还有锚定补体（fixcomplement）、调理吞噬（opsonizeparticlesforphagocytosis）、增强抗原提呈与清除（enhanceclearanceandantigenpresentation）等功能。

探明中和抗体在操纵HCV感染中的具体作用,将为合理设计疫苗,诱导初期、持久、普遍的机体免疫提供理论基础,同时也为预防和操纵其他逆转录病毒（如HIV）感染提供有利启发。

　　2细胞免疫应答在HCV持续感染中的作用

由于体液免疫不能清除进入细胞的病毒,细胞免疫在抗HCV感染中可能起要紧作用。

但是事实上,HCV常能逃逸机体的免疫识别,致使超过80%的急性感染者不能清除HCV。

迄今,细胞免疫失效的免疫学和病毒学基础尚未说明,可能与病毒逃逸突变和破坏宿主细胞的免疫能力有关。

　　病毒逃逸性突变

　　HCVRNA编码的RNA聚合酶缺乏核酸外切酶校正功能,致使病毒复制的忠实性低,易发生“错误偏向”的复制,使HCV基因组具有高度异质性,HCV序列变异伴随的T细胞识别表位的改变可能会起到易化持续性感染的作用。

业已证明,病毒氨基酸置换能够抑制CD4+和CD8+T细胞的识别。

Erickson等［9］动态研究黑猩猩急性感染模型T细胞与病毒在感染初期的彼此作用,结果3只黑猩猩进展为慢性感染,并在感染开始的16周之内发觉了病毒的多表位变异,变异的表位能够拮抗迅速显现的特异性CTL反映。

研究还发觉,慢性丙肝患者的Th表位也存在或多或少的变异,变异的表位失去刺激T细胞增殖分化的能力,与CTL表位不同,Th表位的变异可直接致使该表位丧失对特异性细胞和体液免疫的辅助和调剂作用,其机制可能是通过拮抗T细胞受体（TCR）,抑制信号转导,从而使HCV得以逃逸宿主的免疫监视［10］。

但是,是病毒逃逸突变造就了持续感染,仍是逃逸突变是持续感染压力下的自然选择,目前还不清楚。

逃逸突变似乎不能完全说明病毒的持续感染,可能还有其他机制在HCV持续感染中发挥重要作用,咱们还需要进行更深切的研究。

　　T细胞耗竭

　　最近几年来,运用特异性的酶联免疫斑点实验（Elispot）方式观看CD4+和CD8+T细胞介导的免疫反映,动态观看发觉,随着感染的持续,初期壮大的HCV特异性CD4+和CD8+T细胞应答均消弱,取而代之的那么是血清HCVRNA的再现。

可是,T细胞的这种耗竭并非完全意义上的完全消失,而是伴随IL2和IFNγ的分泌减少、增殖分化障碍、细胞毒作用降低的“部份”耗竭（partialexhausted）,在加入病毒特异性抗原和IL2后,处于耗竭状态的CD8+T细胞能够恢复至“健康状态”［11］。

T细胞耗竭的机制目前有3种说明［7］:

①HCV感染破坏了树突状细胞（DC）和巨噬细胞的抗原提呈功能,抗原难以活化T细胞。

与此相反,有些详细评判慢性HCV感染者DC的表型和功能的研究,并未发觉DC的功能障碍;

②T细胞被病毒过量的逃逸突变性表位俘获,阻止T细胞的激活;

③缺乏共刺激分子及CD4+Th的辅助而增殖分化障碍。

总之,T细胞耗竭可能与病毒持续感染有关,多种不同的机制有待进一步证明。

　　CD4+Th细胞失能

　　CD4+辅助性T细胞（CD4+Th）,依照其分泌的细胞因子,可分为Th1和Th2两大类。

Th1具有直接杀伤病毒感染的靶细胞和通过度泌TNFγ增进Tc前体细胞分化Tc1发挥细胞毒作用；

Th2要紧通过度泌细胞因子（如IL4、IL10等）辅助B细胞分泌抗体,激发体液免疫应答。

因此CD4+Th细胞在抗病毒免疫反映中起重要作用。

在初期激发强烈Th免疫反映的患者,病毒检查阴转后,假设Th免疫反映下降,病毒血症又可复发。

如缺乏持续性的CD4+T细胞的辅助,CD8+T细胞的增殖分化能力明显降低,所识别的MHCI限制性表位抗原也将不断发生变异,可抑制CTL的活性［12］。

HCV特异性免疫反映的测定说明,HCV感染者的CD4+Th失去辅助效能,难以对抗体的产生、CTLs的激活和增生进行调控［11］。

诱导广度的CD4+Th反映可能是解决HCV持续感染的重要途径。

　　CD4+CD25+Treg细胞调剂障碍

　　天然产生的CD4+CD25+Treg通过度泌IL4,IL10和转化生长因子β（TGFβ）抑制效应性T淋巴细胞的

功能来维持机体的自身耐受。

Bolttler等［13］通过缺失研究和共培育实验发觉,CD4+CD25+Treg细胞以剂量依托性的方式抑制HCV特异性CD8+T淋巴细胞的增殖和IFNγ及穿孔素的产生。

而且,这种抑制作用只需细胞与细胞间直接接触,不依托于IL10和TGFβ。

大伙儿明白,一个低表达、表型不成熟的特异性CD8+T细胞难以对不同毒株的抗原产生应答！

Fields等［14］的研究结果显示,在Th1/Th2的辅助下,体内B细胞在过继转移后的第8天开始分泌抗体,当有CD4+CD25+Treg存在时,Th细胞的活化及定位不受阻碍,而抗体的生成受到明显抑制。

耗竭CD4+CD25+Treg能增进HCV特异性T细胞的增生活化,而且CD4+CD25+Treg的数量与HCVRNA的滴度呈正相关,与肝脏炎症程度呈反相关。

相反,在丙型肝炎康复者与健康献血者中,CD4+CD25+Treg的抑制活性明显降低。

这一现象提示,CD4+CD25+Treg细胞可能增进了HCV感染的持续化。

　　3肝脏自身微环境与HCV感染的持续化

HCV侵入人体后,要紧引发肝组织的免疫损害,表现出很强的嗜肝性。

尽管肝内富含T细胞、NK细胞、B细胞,具有激发固有免疫和适应性免疫的先决条件,但对肝内感染细胞的清除仍是依托于外周T细胞,而肝内T细胞往往表现为功能性沉默［7］（functionalsilence）。

功能性T细胞研究和肝活检分子生物学分析证明,肝内HCV特异性T细胞应答与肝脏病变的严峻程度呈负相关,肝脏快速清除自身T细胞也可能是病毒持续感染的缘故。

HCV有效逃逸肝内T细胞清除的机制目前还不清楚,可能与肝脏微环境介导的T细胞免疫耐受有关。

肝脏的血液供给要紧来自消化道的门脉系统,肝内T细胞可能会长时刻暴露于来自食物和消化道病原微生物的病源相关分子,慢慢丧失了识别“非己”的能力,产生了免疫耐受。

另外,由于肝窦狭小、血流缓慢,肝窦内皮细胞（LSNC）缺乏基膜爱惜,肝内T细胞大多数情形下与LSNC紧密接触,通常会优先同意LSNC提呈的抗原信息,但是,由LSNC提呈的抗原信息大多诱导免疫耐受［15］。

即便不受LSNC提呈信息的阻碍,CD8+T细胞在不通过淋巴结而第一在肝脏活化,它们对靶细胞的效应功能也将受到损害［16］。

上述结果提示,由HCV感染的肝细胞提呈的抗原信息将损害T细胞的功能,肝内特异性T细胞应答功能低下可能是感染持续化的又一缘故。

　　4展望

HCV发觉至今已近20年,致力于其致病机制方面的研究仍未取得实质性冲破,各类可能的机制有待于进一步证明。

HCV感染的免疫学和病毒学机制尚有许多亟待解决的问题,在体液免疫方面,寻觅交叉反映性的HVR1或通过优势组合设计广谱交叉中和表位,有望解决免疫原的选择困

难。

在细胞免疫方面,挑选和组合高保守、高覆盖、高活性的T细胞表位,可克服细胞免疫研究的障碍。

有机地结合体液免疫和细胞免疫,仍是进展HCV疫苗的理想方向。

另外,成立有效性的HCV动物模型,进展新型高效的免疫佐剂,也是研究丙型肝炎预防策略需要高度关注的问题。

【参考文献】

　　［1］SheparedCW,FinelliL,AlterMJ.GlobalepidemiologyofhepatitisCvirusinfection［J］.LancentInfectDis,2005,190（5）:

558-567.

　　［2］HeoTH,ChangJH,LeeJW,etal.IncompletehumoralimmunityagainsthepatitisCvirusislinkedwithdistinctrecognitionofputativemultiplereceptorbyE2envelopeglycoprotein［J］.JImmunol,2004,173（5）:

446-455.

　　［3］PostJJ,PanY,FreemanAJ,etal.ClearanceofhepatitisCviremiaassociatedwithcellularimmunityintheabsenceofseroconversioninthehepatitisCincidenceandtransmissioninprisonsstudycohort［J］.JInfectDis,2004,189（10）:

1846-1855.

　　［4］TarrAW,OwsiankaAM,TimmsJM,etal.CharacterizationofthehepatitisCvirusE2epitopedefinedbythebroadlyneutralizingmonoclonalantibodyAP33［J］.Hepatology,2006,43（3）:

592-601.

　　［5］RaySC,MaoQ,LanfordRE,etal.Hypervariableregion1sequencestabilityduringhepatitisCvirusreplicationinchimpanzees［J］.JVirol,2000,74（6）:

3058-3066.

　　［6］PeninF,CombetC,GenmanidisG,etal.ConservationoftheconformationandpsositivechargesofhepatitisCvirusE2envelopeglycoprteinhypervariableregionIpointstoaroleincellattachment［J］.JVirol,2001,75（5）:

5703-5710.

　　［7］BustinLB,RiceCM.Flyingundertheradar:

TheimmunobiologyofhepatitisC［J］.AnnuRevImmunol,2007,25

（1）:

71-99.

　　［8］NetskiDM,MosbrugerT,DeplaE,etal.HumoralimmuneresponseinacutehepatitisCvirusinfection［J］.ClinInfectDis,2005,41

（1）:

667-675.

　　［9］BowenDG,WalkerCM.AdaptiveimmuneresponsesinacuteandchronicehepatitisCvirusinfection［J］.Nature,2005,436（10）:

946-952.

　　［10］HahnYS.SubversionofimmuneresponsesbyhepatitisCvirus:

immunomodulatorystrategiesbeyondevasion［J］.CurrOpinImmunol,2003,15

（2）:

443-449.

　　［11］KlenermanP,SemmoN.CellularimmuneresponsesagainstpersistenthepatitisCvirus:

gonebutnotforgotten［J］.Gut,2006,55（4）:

914-916.

　　［12］DeFraneescoR,MigliaceioG.ChallengesandsuccessesindevelopingtherapiesforepatitisC［J］.Nature,2005,436（9）:

953-960.

　　［13］BoettlerT,SpangenbergHC,NeumannHaefelinC,etal.TcellwithaCD4+CD8+regulatoryphenotypesupressinvitro

proliferationofvirusspecificCD8+TcellsduringchronichepatitisCvirusinfection［J］.JVirol,2005,79（10）:

7860-7867.

　　［14］FieldsML,HondowicsBD,MetzgarMH,etal.CD4+CD25+RegulatoryTcellinhibittheMaturationbutnottheinitiationofanAntoantibodyresponse［J］.Immunol,2005,175（7）:

4255-4264.

　　［15］RacanelliV,RehermannB.Theliverasanimmunologicalorgan［J］.Hepatology,2006,43（5）:

54-62.

　　［16］LongmanRS,TalalAH,JacobsonIM,etal.Normalfunctionalcapacityincirculatingmyeloidandplasmacytoiddendritic　cellsinpatientswithchronichepatitisC［J］.JInfectDis,2005,192（3）: