PCR仪使用手册.docx
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PCR仪使用手册
BiometraTgradient
用户手册
型号
050-810Tgradient48
050-811Tgradient96
Biometra
biomedizinischeAnalytikGmbH
Rudolf-Wissell-Str.30,D-37079Goettingen
Tel.:
0551/50686-0;Fax:
0551/50686-66
email:
1目录
1目录
2介绍
3使用前
3.1安全警告
3.2警告标志
4Tgradient的初始操作步骤
4.1Tgradient前视图
4.2Tgradient后视图
4.3Tgradient控制板
4.4初始自检
4.5Tgradient的显示
4.6操作可调节的热盖
4.7盖子卡住时如何放开转轮
5创建一个程序
5.1选择一个目录
5.2选择一个程序储存库
5.3输入子目录的名称
5.4输入程序名
5.5输入热盖的温度
5.6选择/取消热盖预热
5.7输入温度和时间设置
5.8设置温度梯度
5.9查看模块的温度梯度值
5.10设置循环次数
5.11冷却到环境温度以下
5.12储存程序
6浏览/编辑程序数据
6.1删除/插入程序档
6.2拷贝程序
6.3删除程序
7其他选项的设置
7.1设置时间增量
7.2设置“触地”(touchdown)PCR
7.3调节加热和冷却坡度
8运行程序
8.1选择和开始程序
8.2操作过程中的显示
8.3浏览剩余的运行时间
8.4察看当前的温度梯度
8.5暂停/停止程序
9特别功能
9.1打印协议
9.2警报声的开关
9.3选择语言
9.4标准模式/测试模式
9.5RS232-控制器
10微板的密封
10.1在PCR中密封微板
10.2取下热封膜
11维护
12问题解答
12.1减慢加热和冷却的速度
12.2由于断电重新启动
12.3来自其他PCR仪的协议的更改
13.Tgradient96技术参数
2介绍
Tgradient是Biometra产品系列中新型的高端热循环仪。
开发一款快速优化反应参数以及常规分析的高性能仪器一直是Biometra的目标。
而通过新型的模块构建和最先进的Peltier技术,实现了这两个目标。
为了增加PCR反应的特异性,退火温度是最关键的参数之一。
利用新型的Tgradient,通过一次试验可以测试出最佳的退火温度,在程序的任何步骤设定的温度梯度最大可以达到40°C。
Biometra通过不懈努力使温度梯度尽可能的呈线性。
同时确保每一排均一的温度分布也非常重要,每一排的温度可以通过帮助菜单进行查看。
新型的Tgradient是一款出众的仪器,不仅提供先进的温度梯度,还保证了常规运用时的高速度和可靠的准确性。
镀金银模块设计保证了高效的热传导性,确保了快速的升降温速度和模块的温度平衡。
新型的Tgradient会大大加快实验室的工作效率,因为它在优化反应条件和常规运用中节省了大量的时间。
3使用前
3.1安全警告
设备连接电源之前,请确认仪器后部的电压选择器设置在正确的电压上了。
电击危险!
打开Tgradient之前请拔下电源线。
没必要在试管和槽之间加油,以促进热量传输。
如果您仍然决定用油,不要使用硅油,只能用矿物油。
3.2警告标志
在操作过程中热槽和热盖会达到很高的温度。
如果用裸露的皮肤接触会烫伤。
样品的快速加热可以导致液体滚动翻腾。
在操作过程中一定要带好护目镜。
启动一个程序之前应关好盖子。
保证设备后部和底部的通风口没有堵塞。
通风不充分可能会导致设备的温度过高。
4Tgradient的初始步骤
4.1Tgradient前视(图形见英文说明书)
热盖的高度调节轮
图形显示
键盘
电源开关
4.2Tgradient后视(图形见英文说明书)
平行打印端口(centronics)
串行接口RS232
电源线插头
保险丝盒,可放2个保险丝,具体规格见设备后面的型号标识板
4.3Tgradient控制板(图形见英文说明书)
(由左向右)
图形显示
电源开关:
背光=电源打开
功能键:
相应的具体功能在屏幕上指示
光标键:
用来在设置程序的时候自由移动。
用来在列表中滚动。
容易清洁的键盘
4.4初始自检
启动Tgradient之后,会显示设备的序号和软件版本。
Tgradient
SerialNo1234567
op
Tgradient检查所有目录下的程序(也叫RAM检查)。
4.5Tgradient的显示
Tgradient的显示提供关于设备的信息和运行程序的状态。
Prog
Step
Temp25.2?
C
Time
Lid25.4?
C
AinfoBstart/stopCprogramsD+
A,B,C,D键的各自的具体功能是由显示屏指出的,与所处状态相关。
4.6可调节的热盖的操作
为了向试管施加理想的压力,Tgradient装有一个可调节高度的热盖,可以进行自动的压力控制(智能盖技术)。
关上盖子:
把样品放置到槽中之后,把盖子关上。
顺时针旋转盖子,直到听到咔哒一声。
在这种状态下,即使你继续旋转转轮,压力不会再增加了。
注意:
盖子的压力在满槽的时候达到最佳。
如果槽中的试管很少,你应该在四个角的位置上放置一些空薄壁管,以避免压力过大使试管损坏。
打开热盖:
逆时针旋转转轮释放压力。
不再有阻力的时候就说明压力已经释放了。
现在您可以打开盖子。
重要:
请注意顺序!
有压力的时候千万不能打开盖子,因为这样可能会损坏门锁系统。
4.7在盖子卡住的情况下释放转轮
注意:
如果盖子处于最高或最低的位置上,转轮可能脱钩了。
在这种情况下,离合器机械装置在两个方向上都可以启动(在任一方向都可以发出咔哒的声音)。
要把转轮打开,用一支圆珠笔按住金属针,小心的旋转转轮。
这个针会克服自动离合器装置。
因此,要注意不要施加过大的压力。
盖子卡在顶部:
按住金属针,顺时针小心的旋转转轮,直到您可以感觉到正常的阻力(不再有咔哒声,离合器已经放开了)。
把金属针松开,把盖子放下,直到离合器装置启动(咔哒声,施加理想压力)
盖子卡在底部:
按住金属针,逆时针小心的旋转转轮,直到您可以感觉到正常的阻力(不再有咔哒声,离合器已经放开了)。
把金属针松开,逆时针旋转转轮,直到压力全部放出。
打开盖子。
重要:
在离合器装置启动的状态下(施加理想压力时),千万不要使用金属针继续增加压力。
这会导致试管和设备的损坏!
5创建一个程序
5.1选择一个目录
在Tgradient中,程序既可以储存在主目录中,也可以储存在9个单独的子目录中。
在每个子目录中,最多可以储存100个程序。
为了方便的识别选择的储存位置,子目录可以被命名。
(见5.3)
由主菜单开始。
Prog
Step
Temp25.2?
C
Time
Lid25.4?
C
AinfoBstart/stopCprogramsD+
按[Cprograms]进入编辑模式。
Edit|-3.subdirect.:
|-4.subdirect.:
maindirect.---|-5.subdirect.:
|-6.subdirect.:
|-7.subdirect.:
A?
BCquitDenter
现在您位于主目录中。
屏幕显示出子目录的结构。
5.2选择一个程序储存库
程序可以储存在主目录或者子目录中。
要在主目录中创建一个程序请按[Denter]。
要进入一个子目录,用光标键?
将光标向右移动,然后用光标键?
?
选择一个子目录。
选择的目录会以强光突出出来。
Edit|-3.subject.:
|-4.subject.:
maindirect.---|-5.subject.:
|-6.subject.:
|-7.subject.:
A?
BnameCquitDenter
5.3输入子目录的名称
为子目录和程序命名的方法是一样的。
有关程序的命名见5.4。
按[Denter]进入选择的子目录。
Directory:
5
Programno:
name:
Edit
AlistBCquitDenter
按[Alist]浏览该目录下所有已建立文档和空文档的列表。
0empty
1empty
2empty
3empty
4empty
AbackBforwardCquitDenter
用光标键?
?
在列表中滚动,然后用[Denter]确认其中一个记忆库。
注意:
如果既没显示程序名,又没显示“empty”,那这个位置可能存了一个没有命名的程序。
对于新的协议,应选择一个空的记忆库。
没有用的程序应该删除,以提供新的记忆库。
5.4输入程序名
每一个程序都指定了一个程序号和一个子目录号。
要想更方便的检索一个程序,您可以输入一个由字母,数字和符号组成的名称。
Directory:
5
Programno:
0name:
?
ABCDEFGHIJKLMNOPQRST
UVWXYZ-()#?
C/,<>&+.%!
AABCBfilesCquitDenter
要输入程序名请按[AABC]
Directory:
5
Programno:
0name:
?
ABCDEFGHIJKLMNOPQRST
UVWXYZ-()#?
C/,<>&+.%!
AnameBblankCnameOKDenter
用光标键?
?
?
?
从字母中选择一个,用[Denter]确认。
Directory:
5
Programno:
0name:
T
?
ABCDEFGHIJKLMNOPQRST
UVWXYZ-()#?
C/,<>&+.%!
AnameBblankCnameOKDenter
选择的字母会在显示屏上出现,光标会向右移动一格。
选择下一个字母,用[Denter]确认。
注意:
如果系统接受了一个错误的字母该怎么办?
按[Aname]在名称内移动光标。
现在您可以用光标键?
?
在名称上移动光标了。
按了[AABC]之后,您可以输入新的字母。
您也可以使用这个功能去更改一个已存程序的名称。
一旦名称输入完成了,用[Cnameok]确认。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
?
Cpreheating:
on
Edit
A?
BfilesCpgmOKDenter
5.5输入热盖的温度
您现在可以输入热盖的温度了。
一般来说,盖子的温度应该比协议中的最高温高10?
C。
例如:
如果变性(denaturation)步骤的温度是95?
C,那盖子温度就输入105?
C。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Edit
A?
BfilesCpgmOKDenter
注意:
进行微板的热封应该把盖子温度设置为110?
C(见10)。
5.6选择/取消盖子的预热
您可以在程序启动之前选择盖子是否需要预热。
目的是避免在初始加热阶段出现凝结现象。
注意:
在大多数操作中建议使用的默认设置是:
preheating:
on。
在盖子预热过程中,槽的温度保持在25?
C。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Edit
Aon/offBfilesCpgmOKDenter
完成了所有的预先设置之后,按[Denter]打开设置页。
5.7输入温度和时间设置
在这个设置页中,您可以输入您的循环协议中需要的所有参数。
此外,您可以设置特殊参数,如触地(touchdown),坡度率,或时间增量。
有关特殊参数的详细信息见6。
设置页:
Temp[?
C]time?
#gradient[?
C]options?
1:
2:
3:
4:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
每一个设置都用[Denter]来确认。
光标自动移动到下一个区域。
或者,您可以通过向前移动光标键来确认一个数值。
注意:
您可以使用四个光标键在设置页中自由移动。
用光标键?
您可以回到预先设置中。
您可以随时用[A?
]启动帮助功能。
现在输入协议中第一档的温度:
Temp[?
C]time?
#gradient[?
C]options?
1:
95.0
2:
3:
4:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
用[Denter]确认温度,或则会只是将光标键向前移动。
如果您移动到了下一行,设置将会储存在临时记忆库中。
Temp[?
C]time?
#gradient[?
C]options?
1:
95.0
2:
3:
4:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
为第一档输入一个时间。
注意:
BIOMETRA所有PCR仪的时间的设置都是相同的:
小时?
分钟?
秒钟
如果您输入了一个没有“?
”的数字,这个数值将会被认为是秒钟(“300”=>5分钟)。
要设置分钟,应在输入了分钟数之后输入一个“?
”。
要设置小时,在小时数后面输入?
?
。
当然,您也可以输入小时,分钟和秒钟的组合。
例如1小时,30分钟,20秒钟应该这样输入:
“1?
30?
20”。
这个时间数值将用以下形式表示出来:
0h00m00s。
用[Denter]确认时间设置,或者用光标键移动到下一个区域。
5.8设置温度梯度
每一个温度梯度由两个设定值确定,
(1)模块中部的温度和
(2)温度梯度的范围。
例如,如果想设定温度梯度的范围为50到60°C,那么在“gradient”下面输入的温度值为55°C。
Temp[?
C]time?
#gradient[?
C]options?
1:
95.00h5m0s
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s10
4:
72.00h0m30s229
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
最大温度梯度可达40?
C,当程序运行到第三步时模块的第1列(左起)至第12列温度为55?
C至65?
C。
通过在gradient下面的梯度值前加一“—”号,可以形成反向的温度梯度,即从右到左温度不断升高。
5.9查看模块的温度梯度值
查看12排各排的温度时,选择[A?
],显示如下:
Temp[°C]time?
#gradient[°C]options?
T1–6:
50.050.250.952.053.254.4°C
T7–12:
55.656.858.059.159.860.0°C
3:
55.00h0m30s10°C
4:
Temperaturedifferenceleftside/rightside
第1和2排分别显示的是模块中1–6和7–12排的温度。
5.10设置循环次数(?
)
一般来说,循环是通过选择返回循环的目标和返回循环的次数来定义的。
在用?
标记的列中,您可以选择返回循环的目标档。
Temp[?
C]time?
#gradientoptions?
1:
95.00h5m0s
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s2
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
现在输入返回循环次数(#)。
注意:
总循环数=(n返回循环)+1,即,总循环数为30时应输入“29”。
Temp[?
C]time?
#gradientoptions?
1:
95.00h5m0s
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
5.11冷却到环境温度以下
Temp[?
C]time?
#gradientoptions?
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
5:
4.0pause
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
要想无限长的保持这个温度,输入“0”。
按了[Denter]后显示“pause”。
注意:
您可以设置的最低温是-3?
C。
5.12储存程序
用[Cpgmok]来储存一个完整的程序。
程序数据永久的储存在记忆中:
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Numberofsteps:
5
Runtime:
0h43m19s
ABCD
运行时间计算并显示出来。
注意:
要想随时浏览当前剩余的运行时间,按主菜单中的[Ainfo]。
6浏览/编辑程序数据
您可以通过在编辑模式下移动光标键来检查任何已存的程序。
按照5.2所述选择需要的程序。
注意:
在PCR仪工作的过程中,只能浏览正在运行的程序,不能更改。
如果您想要改变运行程序的设置,以进行下面的实验,您必须将这个程序拷贝到另一个记忆库中,有关拷贝程序的内容见6.2。
6.1删除/插入程序档
设置页:
Temp[?
C]time?
#gradientoptions?
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
5:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
要删除或者插入一个程序档,请按[Binsert/delete]。
Insert/deletestep:
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
5:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
输入您想要插入/删除的档号。
增加的档会插入到选择的档之前。
下面的档会移动一个位置。
Insert/deletestep:
3
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
5:
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
注意:
如果您输入了一个错误的数字,可以用[Bdeleteinput]来清除。
用[Denter]确认档号。
Insert/deletestep:
3?
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
5:
AinsertBdeleteCquitD
按[Ainsert]在选择的位置插入一个档。
按[Bdelete]删除选择的档。
删除一个档后,下面的档会向前移动一个位置。
注意:
插入和删除档的操作可能会对已经存在的循环有影响。
要确保循环中的所有的最新设置都是正确的。
6.2拷贝程序
按照5.1和5.2所述的方法选择您想要拷贝的程序。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Edit
A?
BfilesCpgmOKDenter
按[Bfiles]。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Edit
AcopyBdeletepgmCquitDenter
按[Acopy]将程序拷贝到另一个记忆库中。
Copyto|-3.subdirect.:
|-4.subdirect.:
maindirect.---|-5.subdirect.:
|-6.subdirect.:
|-7.subdirect.:
A?
BCquitDenter
用光标键?
?
?
选择需要的子目录。
选择的子目录会用强光突出出来。
Copyto|-3.subdirect.:
|-4.subdirect.:
maindirect.---|-5.subdirect.:
|-6.subdirect.:
|-7.subdirect.:
A?
BCquitDenter
用[Denter]确认您的选择。
Copyfromdirectory5program0
Toderectory6program
AlistBCquitDenter
用[Alist]选择一个空的记忆库。
Copyfromdirectory5program0
Toderectory6program4?
Enter=ok
Targetprogramcontains0steps
ABCquitDenter
在您用[Denter]确认之前,会检查目标记忆库。
如果目标记忆库中没有程序,会显示“targetprogramcontains0steps”(目标程序中包括0个档)。
如果记忆库中有一个程序,就会显示档的数目。
注意:
如果您把程序拷贝到一个已经含有程序的记忆库,原来的程序将被删除!
用[Denter]将程序的拷贝储存在新的目录下。
6.3删除程序
按照5.1和5.2的方法选择一个程序。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Edit
AcopyBdeletepgmCquitDenter
按[Bdeletepgm]可以删除这个程序。
Directory:
5
Programno:
0name:
TEST1
Lidtemp:
105.0?
Cpreheating:
on
Deleteprogram0?
enter=yes
ABCquitDenter
用[Denter]确认您的选择,一旦删除了一个程序,就不能重新储存了!
7其他选项的设置
要设置一些特殊的参数,您可以将显示向右滚动。
用光标键?
移动到显示屏的最右边。
Temp[?
C]time?
#gradientoptions?
1:
95.00h5m0s
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s
4:
72.00h0m30s229
A?
BheaderCpgmOKDenter
会出现下列显示:
Mainfunct.dT[?
C]dt[s]↗[?
/s]
1:
←5.00
2:
←5.00
3:
←5.00
4:
←5.00
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
注意:
要返回带有基本参数的显示请按光标键←。
或者,您可以将光标移动到最右边。
Temp[?
C]time?
#options?
1:
95.00h5m0s
2:
95.00h0m30s
3:
60.00h0m30s+
4:
72.00h0m30s229
A?
Binsert/deleteCpgmOKDenter
注意:
在主显示中会指示一个特殊参数已经更改了。
在options?
这行中用+指示。
7.1设置时间增量
为了对酶的活性降低作出补偿,在一个连续循环中的不同工作流程之间,档的长度可以逐渐增加。
在标有dt[s]的行中输入需要的时间增量[秒]。
这一数值将会被加在每个工作流程的时间数值上。
Mainfunct.dT[?
C]dt[s]↗[?
/s]
2:
←5.00
3:
←5.00
4:
←2
5:
←5.00
A?
BdeleteCquitDenter
注意:
时间增量会对总的运行时间造成影响,改变多少由流程数目和增量的大小决定。
一个包含很多流程,并且时间增量很大的程序会比标准协议的运行时间长很多。
7.2程序“触地”(touchdown)PCR
一些操作需要以一个较高的退火温度开始,然后随着流程的循环逐渐降低温度。
我们把退火温度逐渐降低叫做“触地”,为了使退火温度随流程的循环逐渐降低,需要在标有dT[?
C]的行中输入一个负的温度增量。
Mainfunct.dT[?
C]dt[s]↗[?
/s]
2:
←5.00