生物1Word格式.docx
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外植体不需要灭菌，但需要进行消毒（体积分数为70%的酒精、质量分数为0.1%的氯化汞溶液）．
故选B．
植物组织培养就是在无菌和人工控制调节下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株．
本题考查植物组织培养的条件，意在考查考生的识记能力和能理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络的能力；
能运用所学知识，解决生物学问题的能力．
制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板的具体描述正确的是（ ）
①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰
④用左手的拇指和食指打开皿盖
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖
⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上．
①③④⑤
④⑤⑥
③⑤
①②④⑥
C
①待培养基冷却至50℃时，在酒精灯火焰附近倒平板，①错误；
②将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，②错误；
③右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰，③正确；
④用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，④错误；
⑤右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，⑤正确；
⑥待平板冷却凝固约5～10min后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误．
C．
倒平板操作的步骤：
将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；
右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰；
用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；
等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，这样可以防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染．
本题考查倒平板知识，要求学生识记倒平板的过程并能进行分析和判断．
将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是（
）。
A:
对比观察培养基有没有被微生物利用
B:
对比分析培养基上是否生有杂菌
C:
没必要放入未接种的培养基
D:
为了下次接种时再使用
此操作目的是通过对比可知培养基灭菌是否彻底，如果彻底，则未接种培养基不会有菌落出现，如果不彻底，则未接种培养基有菌落出现，从而最终确定是否有杂菌污染。
同时，放入未接种的培养基进行对比观察十分必要，因为借此才能确定对于接种的培养基上所生长的是否是目的菌落，故本题正确答案为B。
关于微生物的营养，说法正确的是（
）。
同一种物质不可能既作碳源又作氮源
凡是碳源都能提供能量
除水以外的无机物仅提供无机盐
无机氮源也可能提供能量
D
D项，对于化能自养型微生物，如硝化细菌，能利用氧化过程中释放的化学能，其中既可作为氮源，又作为能源，故D项正确。
A项，蛋白质既可以作为碳源又可以作为氮源，故A项错误。
B项，作为自养微生物的碳源，但是却不能为自养微生物提供能源，自养微生物的能源是光能或者化学能，故B项错误。
C项，除水以外的无机物除了提供无机盐之外，有的还可以作为微生物的碳源或者氮源，比如可作为某些自养微生物的碳源，铵盐及硝酸盐也可以作为微生物的氮源，故C项错误。
综上所述，本题正确答案为D。
自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是
A．碳源
B．氮源
C．无机盐
D．生长因子
【答案】A
【解析】
试题分析：
自养型微生物的培养基中不需要加碳源，可以利用空气中的二氧化碳，而异养型微生物必须添加有机碳源，故A正确。
考点：
本题考查微生物的实验室培养的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法不正确的是（
不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
在微生物生长温度范围内保持固体状态
琼脂凝固点低，利于微生物的生长
琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
C项，琼脂作为配制培养基最常用的凝固剂，其凝固点为40℃，一般不是微生物的营养成分，只起固化作用，对微生物的生长不会产生作用，故C项错误。
A项，琼脂的主要成分是硫酸半乳聚糖，绝大多数微生物都不能分解利用它，也不会对所培养的微生物产生毒害作用，故A项正确。
B项，琼脂熔点为96℃，因此在微生物生长的温度范围内保持固体状态，故B项正确。
D项，琼脂不会因高温灭菌受到破坏，且具有透明度好、凝固力强、价格低廉、配制方便等优点，故D项正确。
综上所述，本题正确答案为C。
下列操作与消毒、灭菌无关的是（
接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双手
接种前用火焰灼烧接种环
培养基在50℃左右时搁置斜面
接种时在酒精灯的火焰旁完成
无菌操作常用的方法有化学消毒和物理灭菌两大类，肥皂洗手、酒精擦拭属消毒，火焰灼烧属灭菌；
培养基在50℃左右时搁置斜面，是因为培养基在50℃时呈液态，温度降低时，培养基凝固，可形成固体斜面培养基，与消毒和灭菌无关，故本题正确答案为C。
下列关于四种生物的能源、C源、N源和代谢类型的描述，其中正确的一组是（
）
硝化细菌
乳酸菌
酵母菌
衣藻
能源
氧化NH3
分解乳酸
固定N2
利用光能
C源
CO2
糖类
N源
NH3
N2
NO-3
代谢类型
自养需氧型
异养需氧型
A．硝化细菌、乳酸菌
B．乳酸菌、酵母菌
C．酵母菌、衣藻
D．硝化细菌、衣藻
【答案】
D
【解析】
本题考查的知识有：
①各种微生物的代谢类型，②微生物所需的能源、碳源和氮源的不同。
解答此题时应明确：
硝化细菌、乳酸菌属于细菌，酵母菌属于真菌，衣藻属于真核生物。
微生物所需的能源、碳源、氮源因其同化作用类型的不同而不同。
检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施．请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题：
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为
．如图所示的四种菌落分布图中，图
不是由该方法得到的是，而是利用
方法得到的．
（2）有三种材料或用具需要清毒或灭菌：
①培养细菌用的培养基与培养皿；
②玻棒、试管、烧瓶和吸管；
（3）实验操作者的双手．其中需要消毒的是
，需要灭菌的是
．
（3）分离细菌应使用
培养基，固定化细菌细胞常采用
法．
（4）不论何种培养基，在各成分溶化后灭菌前，要进行的是
稀释涂布平板法
平板划线法
③
①②
选择
包埋
调节pH
（1）纯化大肠杆菌的方法有稀释涂布平板法和平板划线法．题干中所说的方法是稀释涂布平板法，如图中的CAB就是逐步稀释获得的，而培养皿D是通过平板划线法获得的．
（2）一般玻璃器皿、金属用具和培养基需要高温灭菌，而实验操作者的双手只需消毒即可．
（3）不同培养基的功能不同，在分离细菌时应使用选择培养基．由于细菌的细胞个大，不容易吸附和化学结合，因此使用包埋法进行固定．
（4）不同细菌都具有适宜生存的PH，为了防止在调节PH值时混入杂菌，故应在灭菌前调节好PH．
故答案为：
（8分）
（1）稀释涂布平板法
D
平板划线法
（2）③①②
（3）选择 包埋
（4）调节pH
解答本题主要是区分四个培养皿中纯化细菌的方法，很明显ABC为稀释涂布平板法，D为平板划线法；
另外就是消毒和灭菌的方法，一般金属用具可以采用灼烧灭菌的方法，玻璃器皿和培养基一般采用高压蒸汽灭菌法，而实验者的双手可以用酒精消毒的方法．
本题旨在考查微生物的分离和培养、某种微生物数量的测定和培养基对微生物的选择利用，意在考查具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理，具有对一些生物学问题进行初步探究的能力．
为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制的培养基的配方如下表：
蛋白胨
乳
糖
蔗
K2HP04
伊红Y
美
蓝
蒸馏水
10g
5g
2g
O．4g
O．065g
1000mL
将培养基pH调至7.2
（1）该培养基所含的碳源有________________，其功能是________________。
（2）该培养基所含的氮源是________________，其功能是________________。
（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是________________。
（4）该细菌在同化作用上的代谢类型是________________。
（5）该培养基可用来鉴别哪种细菌（
A．霉菌
B．大肠杆菌
C．酵母菌
D．乳酸菌
【答案】
（1）乳糖、蔗糖、蛋白胨主要构成微生物的细胞物质和代谢产物
（2）蛋白胨
主要用于合成蛋白、质、核酸以及含氮的代谢产物
（3）水、无机盐
（4）异养型
（5）B
【解析】对于异养型微生物来说，含C、H、O、N的物质，既是碳源，也是氮源。
各类微生物的最适pH不同，酵母菌、霉菌适宜在偏酸（pH为4．5～6．O）环境中生长。
伊红一美蓝是鉴别大肠杆菌的物质。
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是（
计算、称量、倒平板、溶化、灭菌
计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
计算、称量、溶化、灭菌、倒平板
计算、称量、灭菌、溶化、倒平板
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的具体步骤依次是计算、称量、溶化、灭菌及倒平板，故本题正确答案为C。
分析有关微生物的资料，回答问题．1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌．
（1）幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为
（2）上图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基（琼脂含量3.5g/L）中的生长状态，其中②号试管代表幽门螺杆菌的生长状态，由图判断，该菌在
条件下不能生长．产甲烷细菌（厌氧菌）的生长状态最能由试管
代表．
（3）下表是某培养基的配方．
成分
葡萄糖
KH2PO4
MgSO4
NaCl
CaSO4
CaCO3
琼脂
含量
10g
0.2g
5g
3.5g
1L
将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中，置于37℃下培养一段时间后，在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时
，主要原因是：
拟核
氧气浓度过高或过低
少
缺少氮源（缺少氮源和生长因子）
（1）幽门螺杆菌为原核生物，没有核膜包围的细胞核，遗传物质集中在拟核内．
（2）幽门螺杆菌生活在半固体培养基的中部，说明它不能生活在氧气浓度过高或过低的地方；
产甲烷细菌属于专性厌氧菌，生活在试管的底部．
（3）培养基中缺乏氮源，幽门螺杆菌不能正常生活，数量会减少．
（1）拟核（核区）
（2）氧气浓度过高或过低
（3）少
缺少氮源（缺少氮和生长因子）
1．培养基的概念、种类及营养构成
（1）概念：
人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质．
（3）营养构成：
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．
2、本题需掌握的知识点
（1）了解幽门螺杆菌的生活习性，主要是从材料中获取、推断．
（2）了解培养基的营养成分组成，微生物的培养基的碳源、氮源，水、无机盐，有的还有生长因子．
（3）区别原核生物和真核生物，原核生物没有核膜包被的细胞核，只有拟核．
本题是以“幽门螺杆菌”为背景考查微生物的培养等知识点，主要考查学生运用所学的知识解决实际问题的能力．
制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，关于倒平板的具体描述正确的是（ ）
①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖
A．①②③
B．④⑤⑥
C．①③⑤
D．①②④⑥
①等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，①正确；
②不能将灭过菌的培养皿放在桌面上，因为桌面上可能有杂菌，②错误；
③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰，高温防止杂菌污染，③正确；
④倒平板时皿盖只需要倾斜出一定角度，在酒精灯火焰旁进行，④错误；
⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上皿盖，并通过酒精灯火焰，⑤正确；
⑥等待平板冷却5～10分钟，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，⑥错误．
10．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数。
原因是（ ）
A．平板上的一个菌落就是一个细菌
B．菌落中的细菌数是固定的
C．此时的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌
D．此方法统计的菌落数一定与活菌的实际数相同
答案：
分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
下列有关这两种方法的叙述错误的是
A．均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面
B．获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群
C．都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染
D．稀释分散菌种的原理不同，均能达到分离纯化大肠杆菌的目的
分析：
用稀释涂布平板法时，如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能是由一个细菌细胞繁殖形成的；
故选B。
平板划线法和稀释涂布平板法。
点评：
本题较简单，考查了学生对基础知识的理解。
为了保持菌种的纯净需要进行菌种的保藏，下列有关叙述不正确的是
A.对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法
B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C.临时保藏菌种容易被污染或产生变异
D.对于需要长期保存的菌种，可以采用低温-4℃保藏的方法
答案D
点拨：
对于需要长期保存的菌种，可采用甘油管藏法，即在3mL甘油瓶中加入1mL甘油后灭菌，将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。
平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是
A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释
B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作
C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养
D．都会在培养基表面形成单个的菌落
答案:
平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。
平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。
D正确。
本题考查纯化微生物方法相关知识，意在考查考生识记和判断能力。
下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的牛肉膏、蛋白胨培养基的配方。
试
剂
用
量
牛肉膏
20g
水
1000mL
——
（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、
和无机盐。
上述培养基配方中能充当碳源的成分是
。
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是
和
两种。
在接种过程中，接种针或涂布器的灭菌方法是
（3）假设某同学发现培养基上细菌数目过多连成一片，说出一种可能的原因并提出合理的处理措施：
原因：
；
措施：
（4）对分离得到的土壤细菌如果转移放入大试管进一步培养，则大肠杆菌的增长呈现____型曲线增长。
（5）该培养基能否用于筛选土壤中的纤维素分解菌？
__________。
在筛选纤维素分解菌时，常加入的一种染料是_____________，该染料可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，所以可以通过是否产生_______来筛选纤维素分解酶。
（1）氮源
牛肉膏
（2）平板划线法
稀释平板涂布法
灼烧灭菌
（3）菌液浓度过高
可以通过增大稀释倍数解决（或培养过程中被杂菌污染；
严格无菌操作程序。
或利用接种针划线时，划下一个区域前没有对接种针灭菌处理；
每划一个新的区域都要对接种针进行灭菌处理）
（4）S
（5）不能
刚果红
透明圈
为了获得纯度高的大肠杆菌，需要对大肠杆菌进行培养和分离。
培养大肠杆菌一般用牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基。
（1）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用________挑取，放在________上称量。
由于牛肉膏和蛋白胨________，称量时动作要迅速，称后要及时盖上瓶盖。
（2）在牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有________________________等大肠杆菌生长所需的营养要素。
（3）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如________和__________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。
（1）玻璃棒 称量纸 容易吸潮
（2）碳源、氮源、无机盐、水
（3）平板划线法 稀释涂布平板法 菌落
（1）培养大肠杆菌，配制固体培养基的基本步骤是：
计算→称量→________→________→倒平板。
（2）称量时，由于牛肉膏比较黏稠，可以用________挑取，放在________上称量。
（3）在牛肉膏—蛋白胨—琼脂培养基上的大肠杆菌能生长，说明培养基含有__________________________________________________等大肠杆菌生长所需的营养要素。
（4）微生物纯化培养可以通过多种接种方法如________和________等，使大肠杆菌在固体培养基上形成单个________，从而获得纯菌株。
考查微生物纯化培养的基础知识。
配制牛肉膏蛋白胨培养基的基本步骤是：
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
称量时，可用玻璃棒挑取，放在称量纸上称量，称量时动作要迅速。
牛肉膏蛋白胨培养基中含有大肠杆菌所需要的碳源、氮源、无机盐、水等营养要素，所以常用来培养大肠杆菌。
微生物纯化培养的接种方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可使大肠杆菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。
（1）溶化 灭菌
（2）玻璃棒 称量纸 容易吸潮
（3）碳源、氮源、无机盐、水
（4）平板划线法 稀释涂布平板法 菌落
富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一。
主要是指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定环境条件使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。
富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物以及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。
下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。
（1）本实验所需培养基为____________，碳源为_____________。
（2）实验原理是_________________________。
（3）①→③重复培养的目的是______________________。
（4）⑤的菌落中大部分是降解__________的微生物。
（5）⑥为_______组，⑦为________组，设置⑥的目的是_____________。
（6）⑤→⑥采用_______法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是__________。
（1）选择培养基
对羟基苯甲酸
（2）利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，分离出能降解对羟基苯甲酸的微生物
（3）增大对羟基苯甲酸微生物的比例
（4）对羟基苯甲酸
（5）对照
实验
说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物
（6）单细胞挑取
接种环在火焰上灼烧灭菌，烧缸的接种环在空气中冷却，同时打开皿盖挑取菌种接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物
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