Agilent1260型高效液相色谱仪再验证方案NewWord格式文档下载.docx
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设备型号
Agilent1260型
进样瓶数
100个
进样量
0.1～50ul
输液系统
连个活塞串联泵
可设置的流速范围
0.001～5ml/min
流量准确度
±
1%
操作压力范围
0～600bar
梯度形成
高压二元混合
电压
220V
2.验证目的
为确认高效液相色谱仪检验数据准确可靠，性能稳定，特制订本验证方案，对高效液相色谱仪进行验证。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证委员会批准。
2.1通过对设备技术指标适用性的审查，确认Agilent1260型高效液相色谱仪的设计选型符合检验要求及GMP管理要求。
2.2检查并确认Agilent1260型高效液相色谱仪安装符合设计要求，技术文件符合GMP管理规范。
2.3检查并确认Agilent1260型高效液相色谱仪的运行符合设计技术参数要求。
2.4检查并确认Agilent1260型高效液相色谱仪在正常运行下，性能条件能够持续符合设计和检验要求。
3．风险评估
经验证小组人员共同对质量管理部Agilent1260型高效液相色谱仪验证进行了风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表：
序号
风险
因素
可能影响效应
现有控制措施
S
P
D
RPN
风险级别
建议采取措施
1
泵
流速准确度和精密度不符合要求
1.保留时间漂移
2.峰面积不准确
导致检测结果不准确
定期校验流（1.0ml/min）
4
3
48
高
对0.5ml/min,1.0ml/min，3.0ml/min的流速分别进行验证
梯度不准确
检测结果不准确，保留时间漂移
定期校验梯度准确度和线性
27
中
对梯度准确度和线性进行验证
2
柱温箱
温度不准确
检测结果不准确
定期校验柱温箱温度
对柱温箱的准确度和稳定性进行验证
进样器
进样体积不准确
1.定期检定进样器准确度
2.每月清洁一次仪器管路
36
对进样器进样体积的准确度进行验证
基线噪音和基线漂移
基线噪音大，基线漂移
1.平衡时间延长
2.检测限降低导致小的杂质不能被检出，检测结果不准确
3.错把基线波动当杂质，或杂质当基线波动
1.每月清洗一次仪器
2.安装流动相在线过滤器
3．流动相离线脱气
16
低
对基线噪音和基线漂移进行验证
5
进样精密度
进样精密度不够
定期进行进样精密度测试
对进样精密度进行验证
4.验证时间计划
时间
验证计划
备注
2015年10月09日
检查验证的相关准备工作
2015年10月12日至2015年10月15日
按验证方案实施并对其进行检验
2015年10月16日
对验证结果做出分析与评价，并出具验证报告
2015年10月17日
对验证报告进行审核、批准
5.验证人员及职责
姓名
职务
职责
周事农
质量管理负责人兼质量受权人
负责验证方案和报告的最终批准
李敏
质量管理部部长
负责验证方案和报告的审核及评价
朱长富
QC主管
陈亚玲
QA主管
负责全面协调各项验证试验
吴华
QC
负责验证方案的具体操作、检验和记录
宁遵红
6.验证所需文件
文件名称
生效日期
存放处
高效液相色谱法标准操作规程
SOP-QCTY-005
2015年9月1日
档案室
Agilent1260型高效液相色谱仪使用、维护、保养标准操作规程
SOP-SB/SY-363
质量风险管理规程
SMP-Z7-002
偏差处理管理规程
SMP-QA-011
确认与验证管理规程
SMP-YZ-001
7.验证内容
7.1设计确认
7.1.1设计确认的目的
确认质量管理部新购AGILENT1260型高效液相色谱仪是否按照我公司URS进行设计，并符合GMP、安全、环保等方面标准。
7.1.2设计确认的范围
本设计确认的范围包含质量管理部AGILENT1260型高效液相色谱仪及其附属设备，并包括相配套的公用工程。
7.1.3设计确认的内容
7.1.3.1URS符合性评估
将该设备的文件及图纸与公司提出的URS进行比较，确认该设备已符合用户需求规范，检查及确认结果记入（附表1URS符合性评估表）。
7.1.3.2GMP符合性评估
将该设备的文件及图纸对照GMP有关设备功能和设计的规定，作出符合性判定，检查及确认结果记入（附表2GMP符合性评估表）。
7.1.3.3职业健康、安全与环保符合性评估
将设备的文件及图纸与公司提出的URS进行比较，确认该设备已符合用户需求规范中有关职业健康、安全与环保内容，检查及确认结果记入（附表3职业健康、安全与环保符合性评估表）。
7.1.4设计确认的结论
评价人：
日期：
年月日
7.2安装确认
7.2.1安装确认的目的
检查并确认Agilent1260型高效液相色谱仪的随机文件以及附件应符合使用和管理要求；
同时，检查并确认Agilent1260型高效液相色谱仪的安装符合设计要求。
7.2.2开箱检查和资料附件的确认
7.2.2.1依据Agilent1260型高效液相色谱仪的装箱单，确认高效液相色谱仪的规格型号、随机附件及文件资料。
7.2.2.2根据产品使用说明书、确认高效液相色谱仪的使用范围是否符合设计要求。
7.2.2.3对文件资料进行清点、收集和保管。
7.2.3确认检查结果计入下表，并作出评价。
Agilent1260型高效液相色谱仪编号
确认项目
确认内容及要求
是否符合标准
高效液相色谱仪型号
□是□否
高效液相色谱仪名称
出厂编号
有
适用范围
数量
1台
6
装箱单
7
设备说明书
8
设备合格证
9
设备安装图
10
仪器仪表合格证
11
主配套件的说明书、质保书
12
备品清单及数量
检查人
结果分析与评价：
7.2.4安装确认的内容
7.2.4.1依据Agilent1260型高效液相色谱仪安装图的设计要求，检查高效液相色谱仪的安装位置和空间能否满足检验和方便维修的需求；
7.2.4.2依据Agilent1260型高效液相色谱仪安装图要求，检查外接管道是否符合要求；
7.2.4.3依据Agilent1260型高效液相色谱仪的技术要求，检查外接电源；
7.2.4.4依据Agilent1260型高效液相色谱仪的技术要求，检查主要精密组件的安装；
7.2.4.5依据Agilent1260型高效液相色谱仪机器外观，检查机器的完整性和其它问题；
7.2.4.6所有仪器仪表经过检定或校准，且全部在有效期内，检查及确认结果记入（附表4仪器仪表检定或校准检查记录）。
7.2.4.7安装确认检查结果记入下表，并作出评价。
项目名称
可接受标准
确认方法
检验维修空间
有适当的检验维修空间
对照设计图纸检查
仪器仪表
有计量合格证，并在有效期内
检查计量合格证
安装地点
质量管理部
与图纸相符
电压、频率
检查
外观
无划伤及凹凸现象、表面整洁
目测
电脑
完好
检测器
进样阀
在线混合器
打印装置
13
环境
通风
14
环境温度
10℃～30℃
测量
15
环境相对湿度
小于65%
安装位置
仪器应平稳而牢固地安置在工作台上
17
接地
接地良好
18
电源线
与插孔吻合
19
其它条件
工作台不受阳光直射。
室内应无腐蚀性气体或其它影响测定的气体干扰。
周围应无影响测定的强电场、磁场和强烈震动。
只有安装确认符合要求后，才能进行下一步的运行确认。
7.3运行确认
7.3.1运行确认的目的
检查和测试设备运行技术参数，确定Agilent1260型高效液相色谱仪符合药典检验参数要求和品种项目要求。
7.3.2运行前检查
运行前根据下表检查，并把检查结果记入下表，并作出评价。
运行前的检查项目
检查电源电压是否正常，通电前检查电源开关位置
检查安全接地线的外连接线是否正常，接触是否良好
检查色谱柱是否连接好
日期：
7.3.3验证用测试仪器仪表的确认
所有用于验证测试仪器仪表均应有确认，并把确认结果记入下表，并作出评价。
检测设备名称
规格型号
测量范围
校正单位
有效期至
7.3.4运行项目确认
7.3.4.1设备安全性能确认
依据Agilent1260型高效液相色谱仪使用说明书，对设备安全性能检查结果记入下表，并作出评价。
控制程序确认项目
有安全保护接地，电器安全可靠，无裸露电线
7.3.4.2泵的验证
⏹检测泵的流速
通过测量一定时间进入泵的体积检测泵的实际流速。
a试剂与设备
项目
容量瓶（10mL）
收集出液管流出的水
天平
称量容量瓶和收集的水的重量
秒表
出口管接在泵出口
b检查过程
1、设置流速为0.500mL/min,1.000mL/min，1.500mL/min
2、将出液管放在25mL预先称定的容量瓶内
3、开启泵，同时开启秒表。
4、收集了25min,15min,10min超纯水的时候，同时关闭泵，停止秒表。
5、利用公式SR=（Fmax-Fmin）/Fm×
100%，计算得稳定性误差。
⏹泵流量设定值误差SS和流量稳定性误差SR的确认
测试标准及结果：
仪器名称：
型号：
流量设定值（ml/min）
0.5ml/min
1.0ml/min
1.5ml/min
测量次数
收集流动相时间t（min）
25
25ml容量瓶的重量W1（g）
容量瓶+流动相的重量W2（g）
流量实测值F（ml/min）
流量实测值平均值Fm（ml/min）
允许误差
SS
5%
3%
SR
2%
实测误差
测试条件：
流动相：
经0.45μm微孔滤膜过滤的纯化水；
色谱柱：
4.6mm×
250mm；
室温：
（水的相对密度为：
）。
测试方法：
启动仪器，以水作为流动相，待压力稳定后，在流动相出口处用称重过的25ml容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，按各流量规定的时间收集流出的流动相，精密称定，每个流量测定三次，记录测试温度，按下列计算流量设定值误差S1和稳定性误差S2
SS=（F-Fs）/Fs×
100%
SR=（Fmax-Fmin）/Fm×
式中：
SS为泵流量设定值误差（%）；
SR为流量稳定性误差（%）；
F=（W2-W1）/（ρ•t）,为流量实测值（ml/min）；
W2—容量瓶+流动相的重量（g）；
W1—容量瓶的重量（g）；
ρ—实验温度时水的密度（g/cm3）；
t—收集流动相的时间（min）；
Fs—流量设定值
Fm—同一组测量值的算术平均值（ml/min）；
Fmax—同一组测量中流量最大值（ml/min）；
Fmin—同一组测量中流量最小值（ml/min）。
7.3.4.3柱温箱的验证
检查柱温箱的准确度及精密度。
检查过程
1、设定柱温箱温度为25℃，等待温度平稳。
2、将校正过的温度计放入柱温箱，等待10分钟。
开始计时
3、每隔30min读取温度计显示温度及柱温箱显示温度一次。
共读取6次。
4、依次设置柱温为30℃，40℃重复2-3的过程
5、最大偏差不超过3.0℃，最大波动不超过1.0℃
验证结果见（附件5柱温箱验证表）
7.3.4.4紫外检测器
基线漂移和基线噪声的测定：
检查漂移和噪声不超过规定忽略的水平。
a检查之前的准备
使用检测器与计算机工作站相连。
以1.0mL/min的流速输送甲醇。
b检测过程
打开各模块的电源开关,仪器应能通过初始化。
当状态指示灯为关（而电源指示灯亮时），模块处于预运行状态，做好开始分析的准备
开启工作站，设定波长为254nm。
流速1.0mL/min
使其走基线2小时。
在走基线的第二个小时期间测量基线的最大波动，以此值作为基线漂移值。
使其走基线10分钟。
使用此结果数据测量最大噪声值，并且以此值作为噪声值。
在测量噪声时，不考虑所有基线漂移数据。
7.3.4.5自动进样器进样精密度控制检查
准备好萘+甲醇溶液
b参数设定
设备
参数
泵单元
流速：
1.0mL/min、最大压强:
20.0MPa
柱箱温度：
40℃
时间程序
5.00min停止
UV检测器
波长：
273nm、灵敏度：
2（1V/AU）
流动相
甲醇
计算机工作站
设定停止时间为5.00min、进样为6次
验证结果见（附件6高效液相色谱仪运行确认记录）只有运行确认符合要求后，才能进行下一步的性能确认。
7.4性能确认
7.4.1性能确认的目的
确认Agilent1260型高效液相色谱仪是否符合检验和GMP管理的要求。
7.4.2所需设备
乙腈+水4:
1（体积比），两种溶剂均为HPLC级
色谱柱
ODS或其它4.6mm×
长150mm的色谱柱
样品
准备：
称量10mg吡啶，置于100mL容量瓶中，加入乙腈溶液至刻度。
取上述溶液1mL至10mL容量瓶中，用乙腈溶液定容。
水
HPLC级
异丙醇
7.4.3验证过程
7.4.3.1系统准备
检查LC系统的所有连接。
检查LC系统的管路。
清洗系统管路。
方法如下：
在管路清洗之前，务必从系统中卸下色谱柱，并且在原色谱柱的位置安装一个1.6C螺丝-螺丝单元。
首先使用异丙醇清洗管路，然后使用水清洗。
每种溶剂以2mL/min的流速清洗10min。
清洗完成后，向储液瓶中加入流动相（乙腈：
水=4:
1（v/v））,重新将色谱柱安装在系统中。
7.4.3.2验证过程中设备的参数
1mL/min、最大压力:
7.00min停止
254nm、灵敏度：
停止时间：
7min、进样次数：
5次
7.4.3.3验证方法
打开泵开关及检测器开关，通过自检。
打开计算机工作站，设定参数值。
在泵单元模块上设定流速为1.00mL/min。
在柱箱单元模块上设定柱箱温度为40℃。
按泵单元模块上的开始键，柱温箱单元模块上的开始键，泵单元模块上的开始键运行，柱箱温度开始上升。
此时观察检测器池出口管是否有液体流出，并且检查所有管路连接处是否有漏液。
设定检测器参数。
监测基线。
当基线平稳后，在进样器单元模块上设置20ul的进样体积，然后启动进样程序，进入流动相，观察是否有色谱峰出现。
进试验样品，进行分析。
至少重复该操作5次。
根据5次成功分析结果，计算保留时间，峰面积和峰高的变异系数（C.V.’s）
7.4.3.4可接受标准
保留时间
峰面积
峰高
标准
≤0.5%
≤1.0%
7.4.3.5计算公式
RSD（C.V.）=（SD/X）×
100
X=（X1+X2+……Xn-1+Xn）/n
n：
分析次数；
X1…Xn：
各个峰的保留时间（面积/峰高）；
：
平均值；
SD：
标准偏差；
C.V.：
变异系数。
验证结果见（附件7高效液相色谱仪性能确认记录）：
高效液相色谱仪性能确认记录。
8.偏差处理
将验证过程发现的所有偏差记录在（附表8偏差调查处理报告）：
偏差调查处理报告中，并由验证小组提出解决方案，由公司验证工作组审核和批准偏差解决方案及其实施。
9.方案修改记录
在执行过程中，本方案若有必要修改，应由验证小组提出，经公司验证工作组批准后方可执行，并记录在（附件9方案修改记录）：
方案修改记录中。
10.验证结果及评价
11.验证周期
11.1设备重大维修后，必须验证；
11.2设备性能达不到检验要求时，必须验证；
11.3正常情况每两年验证一次。
12.验证人员培训（附件10培训人员签到表）
培训内容
Agilent1260型高效液相色谱仪验证
培训对象
参与验证的检验人员
培训时间
培训讲师
李敏吴华
评估方式
讨论并回答问题
培训效果评价：
日期：
13.附件
13.1附件1：
URS符合性评估表
13.2附件2：
GMP符合性评估表
13.3附件3：
职业健康、安全与环保符合性评估表
13.4附件4：
仪器仪表检定或校准检查记录
13.5附件5：
柱温箱验证表
13.6附件6：
高效液相色谱仪运行确认记录
13.7附件7：
高效液相色谱仪性能确认记录
13.8附件8：
偏差调查处理报告
13.9附件9：
方案修改记录
13.10附件10：
人员培训签到表
附表1
URS编号
URS名称
结果（参考文件或图纸）
URS01
设备工艺或性能要求
URS03
安装区域及位置要求
URS04
安装环境要求
URS06
设施、公用系统要求
URS07
外观及材质要求
URS08
技术要求
URS09
控制系统要求
URS10
仪表要求
URS11
清洁要求
URS12
润滑剂要求
URS13
文件要求
URS14
设备转运要求
URS15
验证、确认要求
URS16
服务与维修要求
升级会员 