眼部微生物检查标本的采集技术操作规范Word下载.docx
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1.眼睑及睑缘等处皮肤病变区的刮片方法。
(1)若病变区处分泌物多时,可先用灭菌生理盐水湿棉签将分泌物沾去,或用生理盐水冲洗,把表面分泌物去除干净。
(2)刮刀刮取标本。
2.结膜组织刮片方法。
(1)刮去前,先滴表面麻醉药如0.5%丁卡因眼水,对结膜进行表面麻醉。
(2)若结膜病变处分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
(3)翻转眼睑暴露睑结膜。
(4)左手固定睑结膜,右手持灭菌刮匙。
(5)根据病变情况和检查需要,选择刮取部位并刮取标本。
(6)刮取标本后,滴用抗菌药物滴眼液。
3.角膜组织刮片方法。
(1)结膜囊滴用表面麻醉药,进行表面麻醉。
(2)若病变处分泌物多时,可先用灭菌生理盐水湿棉签将分泌物沽去。
(3)用手指将睑裂开大,轻压眼球使其固定,或用开睑器撑开眼睑,以镊子或棉签固定眼球。
(4)选角膜溃疡的进行缘或基底部刮取标本。
(5)刮取标本后,滴抗菌药物滴眼液。
4.将刮取标本涂片、固定、染色后,在显微镜下观察结果并记录。
【注意事项】
1.用刮匙刮取标本应使刮刀与组织表面垂直,刮取时动作要轻柔准确。
2.在病变组织的同一部位不要反复刮取。
3.若需刮取角膜溃疡基底组织时,勿过度向下用力,以防造成角膜孔。
4.尽量在发病初期,使用抗菌药物之前刮取标本,以提高阳性检出率。
5.根据细菌种类不同选择固定和染色的方法。
6.采集标本时,注意无菌操作。
7.标本量少时易于干燥,应及时固定后立刻送检,送检中应避免污染。
二、拭子涂抹法采集细菌学检查标本
3.怀疑眼睑及睑缘等处皮肤有细菌感染。
4.怀疑泪道的细菌感染。
5.内眼手术前结膜囊细菌培养。
1.因精神因素或全身情况不适合检查者。
2.角膜溃疡已经有穿孔倾向者。
1.眼睑及睑缘等处皮肤病变区的涂抹法采集标本。
(1)若损害处浮游性分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将浮游性分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
(2)然后用无菌试子往返擦拭病变组织表面采集标本。
2.结膜组织涂抹法采集标本。
(1)先滴用表面麻醉药,对结膜进行表面麻醉。
(2)若结膜病变处浮游性分泌物多时,可先用灭菌湿棉签将浮游性分泌物沾去,或用生理盐水冲洗。
(4)左手固定睑结膜,右手持灭菌拭子,用拭子自一端向另端水平方向涂拭穹隆部结膜;
旋转拭子的另一面与结膜接触,往返再涂擦1次。
(5)采集标本后,滴用抗菌药物滴眼液。
3.角膜组织涂抹法采集标本。
(1)采集前,滴用表面麻醉药,进行表面麻醉。
(2)用手指将睑裂开大,轻压眼球使其固定,或用开睑器撑开眼睑,以镊子固定眼球。
(3)用灭菌拭子轻轻捻转涂拭溃疡基底部和溃疡进行的边缘。
(4)标本采集后,滴抗菌药物滴眼液。
4.泪道标本的涂抹法采集。
(1)采集泪囊标本时,用手分开近内毗上下眼睑,压挤泪囊区,使囊内容物流进人结膜囊,再用灭菌拭子采集结膜囊标本。
(2)采集泪小管标本时,先局部行表面麻醉,而后将一拭子放置在泪小管区后方,压迫泪小管皮肤面,用另一拭子擦取泪小点处泪小管反流物。
5.将采集的标本涂片、固定、染色后,在显微镜下观察结果并记录。
1.选用涂抹法采集标本进行细菌培养时,应同时做药敏实验。
2.根据细菌种类不同选择固定和染色方法。
3.采集标本的器械注意消毒处理,应注意无菌操作。
4.涂片不可过厚,以免影响显微镜检查。
一、穿刺法采集眼部细菌学检查标本
【适应证】
怀疑眼内细菌性感染者。
【禁忌证】
1.因精神因素或全身情况不适合检查者。
2.有明显出血倾向者。
【操作方法及程序】
1.前房水采集法。
(1)结膜囊滴用表面麻醉药。
(2)生理盐水冲洗结膜囊。
(3)用开睑器撑开眼睑。
(4)在手术显微镜下,用1ml一次性注射器针头,在角膜缘部穿刺进入前房,并抽吸房水0.1-0.2ml。
(5)针头拔出后,结膜囊内涂抗菌药物眼膏包扎术眼。
2.玻璃体标本采集法。
(1)常规消毒眼睑皮肤及结膜囊,结膜囊滴用表面麻醉药。
(2)生理盐水冲洗结膜囊。
(4)在手术显微镜下,用带有20或21号针头lml注射器,在角膜缘后约4mm相当于睫状体扁平部指向眼球中心方向,逐渐进针1cm左右。
(5)确定针头进人无误后,抽吸玻璃体0.2-0.3m1。
(6)针头拔出后,结膜囊内涂抗菌药物眼膏,包扎术眼。
3.将所采集的标本进行涂片、细菌培养和药敏实验。
1.若表面麻醉不充分时,可加局部浸润麻醉或球后麻醉。
2.进行前房水采集时,注意勿损伤虹膜和晶状体。
3.根据细菌种类不同选择固定和染色方法。
4.采集标本的器械注意消毒,操作注意无菌。
5.怀疑厌氧菌感染时,应将标本立即接种,并送检厌氧菌培养。
第二节真菌学检查标本采集
1.怀疑真菌性角膜炎。
2.怀疑真菌性结膜炎。
3.怀疑眼睑及睑缘等处皮肤有真菌性感染。
4.怀疑泪道的真菌感染。
5.怀疑眼内真菌性感染者。
因精神因素或全身状况不适合检查者。
1.眼部真菌学标本采集具体方法参见细菌学标本采集操作步骤。
2.采集标本的直接镜检法
(1)将采集标本放置于洁净的载玻片上,滴加5%---10%氢氧化钾少许,覆以盖玻片。
(2)在弱火焰上缓加温,使杂质溶化清晰。
(3)在显微镜下,直接观察菌体、菌丝和抱子等的形态。
(4)必要时可以加温固定,用过碘酸雪夫染色法、抗酸染色法或革兰染色法等,作进一步的鉴别观察。
3.采集标本培养法鉴定
(1)将采集标本根据组织来源部位不同接种于相应培养基上,如Sabouraud葡萄糖或麦芽糖琼脂培养基、血液琼脂培养基等。
(2)放置在培养箱内孵育1-4周,每周观察3次。
培养温度为22---28°
C,湿度为4O%-50%。
(3)依据真菌生长速度、菌落外观、菌丝、抱子或菌细胞形态等参考指标来判断结果。
1.在进行真菌鉴别时,必要情况下,可应用生化反应、血清学反应或动物接种等方法。
2.采集的标本进行培养时,可在培养基内加人抗菌药物,以防细菌污染。
3.采集标本的器械注意灭菌处理。