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4.试管苗增殖率的估算

5.组培苗栽培管理(主要是苗期管理)

6.组培成本与效益分析

7.组培苗包装与运输

8.机构设置与岗位职责确定

综合能力

发现问题的能力、分析问题的能力、实验设计能力、解决问题的能力、协作能力、解释问题的能力(包括文字表达能力和语言表达能力)

13课程内容和要求

《植物组织培养》总教学时数为_64_学时,主要内容及安排如下:

任务模块

学习内容

教学要求

课时

模块一:

组培实验室的规划设计

单元一:

植物组培的基本理论和基础知识

单元二:

实验室规划设计

单元三:

设备仪器的使用

知识目标:

1.了解植物组织培养的概念、类型、特点及应用;

2.掌握细胞全能性理论、植物的再生性和根芽激素理论;

3.理解组培实验室和育苗工厂的设计原则和总体要求;

4.初步理解常用仪器设备的操作原理。

技能目标:

1.能够正确识别组培实验室和育苗工厂的基本组成并能叙述其主要功能;

2.能够根据生产需要和实际情况初步科学设计实验室和育苗工厂;

3.能正确说出常见组织培养的仪器和设备的用途。

态度目标:

1.激发学生学习组培的热情

2.爱护实验室设备仪器

6

模块二:

培养基及其配制

培养基母液的配制

培养基的配制

1.能口述母液与培养基的概念、作用及其配制目的

2.了解培养基的组成成分及其主要作用;

3.了解培养基的种类及其特点;

1.能根据培养基的种类配制相应的母液;

2.能够科学合理地筛选和优化培养基;

3.能配制不同种类的母液和培养基。

1.科学探索精神

2.严谨的工作作风

+1d

模块三:

灭菌与无菌操作技术

灭菌与消毒

外植体的选择与处理

无菌操作——接种

1.能叙述消毒与灭菌的概念及其区别;

2.理解有菌和无菌的范畴;

3.能说出灭菌的种类及其适用性;

4.能口述外植体及其选择原则

5.理解各种外植体处理的方法及其操作流程;

6.能用文字表达出无菌操作的流程

1.能正确选择合适的灭菌方法及其灭菌过程中的注意点

2.能按照外植体选择原则选取合适的外植体

3.能够独立完成各种外植体消毒处理的过程

4.能独立完成整个无菌操作过程

1.牢牢树立无菌意识,严格按照规程进行无菌操作

2.树立安全意识,尤其是在灭菌与接种过程中

8

模块四:

器官与花器培养

器官培养

花器培养

1.能叙述离体快速繁殖的培养流程;

2.熟练掌握植物不同器官的取材、处理和灭菌方法;

3.掌握不同植物继代的切割方式;

4.理解茎尖、茎段、叶片的培养方法与注意事项;

5.能口述花药与花粉培养的方法、特点和用途;

6.能叙述子房与胚珠的方法、特点和用途

1.能够根据不同植物特点选择合适的外植体进行启动培养;

2.能够对外植体准确修整和有效消毒;

3.熟练进行营养器官等的离体培养;

4.能够正确进行花药和花粉预处理,能区别出不同发育时期的花粉;

5.能完成花粉与花药培养的整个过程;

6.能独立完成子房与胚珠的组培过程

1.科学严谨、精益求精的工作作风

2.养成科学的探索精神

20+4d

模块五:

常见植物组培方法

培养物的不良表现及改进措施

百合及兰科花卉的组织培养

水果作物的组织培养

1.能解释污染、褐化和玻璃化的概念、原因及对策、以及组培过程中出现的其它问题的原因及其对策;

2.掌握百合及兰科花卉的组培方法的特点

3.掌握当地常见水果作物的组培方法的特点

3.能够分析污染、褐化、玻璃化等具体组培现象产生的原因,并能运用理论知识进行有效解决。

4.能够针对不同的植物科学设计培养方案并进行有效的组培工作。

1.团队协作精神

2.学会尊重别人和尊重自己

模块六:

植物脱毒技术

植物无病毒苗的培育

脱毒苗的保存与繁育

1.能口述无病毒苗含义;

2.能解释组织培养脱毒的原理;

3.能以马铃薯微型薯生产工艺流程为例,描述组织培养脱毒的方法和培养流程;

4.能理解病毒苗的科学检测方法;

5.能理解无病毒苗木及种质资源的保存和利用方法;

1.能正确选用一种或几种脱毒方法组合进行脱毒处理

2.能正确使用解剖镜进行微茎尖剥离;

3.能选择一种或几种方法对无毒苗进行正确的鉴定;

4.能对马铃薯实施脱毒培养。

1.耐心细致的工作作风

2.坚毅不拔的精神

10

模块七:

组培苗驯化移栽

组培苗的驯化

组培苗的移栽与管理

1.能解释组培苗的生态环境与温室环境的差异以及组培苗的特点;

2.能叙述组培苗的驯化移栽操作流程;

3.能理解移栽后的组培苗的科学管理方法。

1.能对生根试管苗实施正确的驯化和移栽;

2.能对移栽后的组培苗进行严格科学管理。

1.培养认真、细致、耐心的工作作风;

2.学会在寂寞中思考和工作

4

模块八:

组织培养工厂化生产

生产计划的制定与实施

生产工艺流程的设计

效益分析与经营管理

1.能解释生产计划制定的依据和过程

2.能叙述工厂化生产的工艺流程。

3.会解组培生产的成本核算和效益分析过程;

4.学会科学的经营管理方法;

1.能按照市场需要或订单制定切实可行的生产计划;

2.能依据生产计划正确设计出生产工艺流程;

3.能根据工艺流程和销售等环节进行成本核算与效益分析;

4.组培新技术推广方案的制定。

1.能谦虚好学、礼貌待人;

2.严格按程序办事。

小计课时

64实训5d

14实施建议

14.1教材选用及编写

教材选用:

郑春明主编.植物组织培养技术[M].浙江,浙江大学出版社,2011.

参考书目:

王振龙,杜广平,李菊艳.植物组织培养教程[M].北京,中国农业大学出版社,2011.

王振龙主编.植物组织培养教程[M].北京,中国农业大学出版社,2007.

巩振辉,申书兴.植物组织培养[M].北京,化学工业出版社,2011.

刘庆昌,吴国良.植物细胞组织培养(第2版)[M].北京,中国农业大学出版社,2010.

王玉英,高新一.植物组织培养技术手册[M].北京,金盾出版社,2009.

M.K.拉兹丹编著,肖尊安,祝扬译.植物组织培养导论(原著第2版)[M].北京,化学工业出版社,2006

李浚明,朱登云.植物组织培养教程(第3版)[M].北京,中国农业大学出版社,2005.

14.2教学建议

(1)任务驱动,教、学、做一体:

教学安排在植物组培室,依据组织培养的生产过程,教师边讲、边演示,学生在学中练,在练中学,在真实的环境中掌握基本技能;

(2)产、学、研一条线:

利用学院植物组织培养室和校内实训基地,与企业或农户签订组培用苗协议,学生全程参与生产与管理,师生校内参与研发、生产和推广,锻炼学生职业综合素质;

(3)实行工学结合,努力创新人才培养模式:

将工学结合作为培养创新人才的最重要切入点,探索工学交替、任务驱动、项目导向、顶岗实习等有利于增强学生能力的教学模式,教学过程注重实践性、开放性和职业性,努力实现学生校内学习与实际工作的一致性。

鼓励学生到企业中去,利用企业工作现场和最新的生产技术、设备,在职业岗位上进行顶岗实训或毕业实习,实现学生全面素质培养与企业一线人才要求零距离对接。

14.3教学评价

其实,对于模块教学在实际教学运用过程中发现,理论和实践是很难分开的,即理论教学过程中穿插着实践教学,实践教学过程中又穿插着理论教学,老师边讲边示范,学生边学边做,从而做到教、学、做一体。

只有这样,才能极大压缩教学时间,又能提高教学效率。

因此,要求组培实验室或组培中心配备多媒体教学设备,以保证教学的顺利进行。

14.4课程资源的开发与利用

(1)在多媒体教室,借助多媒体教学软件、音像系统等设备,在常规课堂教学方式的基础上,引入图形、声音、动画和视频等,对学生进行知识点讲授、仪器使用操作演示等。

(2)充分利用植物组培实验室和实训基地的设施,让学生获得丰富的感性认识,加强学生的动手机会,提高学生的操作技能。

31《植物组织培养》课程项目载体设计

模块一.:

组培实验室设计与管理

教学目标:

理解细胞全能性理论,了解组培简要流程。

能设计组培实验室、家庭组培室和育苗工厂,能初步使用常用组培仪器、设备,能指出组培室设计的缺陷,达到“我要学”组培的目的。

工作任务1:

组织培养的概念、类型、及组培的基本理论。

项目活动1:

课前翻阅纸质资料、查看电子文档、查阅互联网资料。

课中讲解与练习。

工作任务2:

认识组培常用的仪器设备并掌握其使用方法。

项目活动2:

课前查阅植物组培常用的仪器设备,课中尝试各种仪器设备的使用

工作任务3:

熟悉植物组培实验室各区的功能、布局及设计要求。

项目活动3:

课前查阅植物组培实验室各区的功能、布局及设计要求,课中量测实验室各区的尺寸并思考其功能,最后手绘或电脑绘制现有实验室。

相关知识:

植物组培概念、类型、植物组培的基本理论及植物组培实验室各区的主要功能及其要求。

练习:

①何谓植物组织培养?

植物组培的类型有哪些?

②植物组培的基本理论是什么?

③植物组培实验室的主要功能区有哪些?

其主要功能是什么?

④植物组培常用的仪器设备有哪些?

其主要用途是什么?

⑤正确称取50mgNAA。

⑥正确移取3ml母液到空的容量瓶中。

⑦绘制学院植物组培实验室的平面图。

模块二.:

培养基及其配制

能口述母液与培养基的概念、作用及其配制目的;

了解培养基的组成成分及其主要作用;

了解培养基的种类及其特点;

理解设计筛选培养基的方法。

能根据培养基的种类配制相应的母液;

能够科学合理地筛选和优化培养基;

能配制不同种类的母液和培养基。

能口述母液与培养基的概念、作用及其配制目的;

了解培养基的种类及其特点。

课前查阅培养基的相关知识,课中分小组抢答问题来巩固知识

根据培养基的种类配制母液

课前查阅相关资料,分小组配制母液

配制培养基

课前查阅相关资料,分小组配制培养基

母液与培养基的概念、它们的作用、配制它们的目的。

构成培养基各成份的主要作用、母液成份的配伍原则及注意事项。

①何谓培养基母液?

它有何作用?

②为什么在配制培养基前首先要配制母液?

③琼脂在培养基中有何作用?

如何判断琼脂的好坏?

④常用的细胞分裂素有哪些?

如何配制细胞分裂素母液?

⑤常用的生长素有哪些?

如何配制生长素母液?

⑥如何判断熬制培养基过程中琼脂已经完全熔化了?

⑦为何分装培养基时瓶口不能沾上培养基?

如果沾上该怎样处理?

模块三.:

灭菌与无菌操作技术

理解灭菌与消毒的含义;

掌握外植体的选择与处理方法、以及常用的消毒方法;

无菌操作;

植株再生途径。

正确选择和处理外植体;

能够正确进行植物材料的离体培养;

熟练配制培养基、灭菌与接种。

理解灭菌与消毒的含义;

能进行简单的消毒与灭菌处理

课前阅读灭菌与消毒相关知识,课中通过配制消毒酒精进行酒精擦手、通过对空白培养基进行高压蒸汽湿热灭菌掌握消毒与灭菌的含义与区别。

掌握接种工具与培养基灭菌的技术

课前配制好培养基,课中进行灭菌。

在灭菌过程中进行相关问题的提问。

工作任务3:

理解外植体选择的原则与处理过程。

项目活动3:

做“外植体的选择与处理技术”实验,实验后练习。

工作任务4:

建立无菌的概念,掌握无菌操作技术

项目活动4:

做无菌操作实验,实验后分析结果

消毒与灭菌的含义与区别;

培养基与接种工具的灭菌;

外植体的选择原则与处理方法;

无菌与无菌操作。

1高压灭菌的机理是什么?

2选择外植体的根据是什么?

3外植体消毒的原则是什么?

4通过实训,谈一谈你对灵活运用消毒剂、消毒时间、消毒浓度在控制外植体消毒效果方面的经验。

5为何培养基的灭菌温度不能太高或灭菌时间不能太长?

6为何无菌水、接种的碟子等材料,在温度安全范围内灭菌的温度越高越好?

7物理灭菌的常见方法有哪些?

8化学灭菌的常用消毒剂有哪些?

9说出超净工作台的灭菌程序。

10为何烘烤灭菌的材料不能用纸质或棉布材料包裹?

11用火焰灭菌时剪刀或镊子等金属材料时,为何这些接种工具与水平夹角不能太大?

12为何接种过程中,瓶口在以火焰为中心的10厘米范围内进行?

13何谓交叉感染?

如何避免?

模块四.:

营养器官与花器培养

能叙述离体快速繁殖的培养流程;

熟练掌握植物不同器官的取材、处理和灭菌方法;

掌握不同植物继代的切割方式;

理解茎尖、茎段、叶片的培养方法与注意事项;

能口述花药与花粉培养的方法、特点和用途;

能叙述子房与胚珠的方法、特点和用途能够根据不同植物特点选择合适的外植体进行启动培养;

能够对外植体准确修整和有效消毒;

熟练进行营养器官等的离体培养;

能够正确进行花药和花粉预处理,能区别出不同发育时期的花粉;

能完成花粉与花药培养的整个过程;

能独立完成子房与胚珠的组培过程

离体根的培养

课前阅读如烟草等植物的生物学特性及其离体根的植物组培资料、进行烟草等种子发芽与相应培养基的配制与灭菌,课中进行离体根培养。

在上课前一天插入实训1天,进行培养基的配制与灭菌、无菌水的制作与灭菌、接种工具的包扎与灭菌等前期工作。

利用课余时间进行离体根培养的观察、记录,老师集中2节课再进行讲解与分析,学生完成实训报告。

离体叶的培养

课前阅读如菊花等植物的生物学特性及其离体叶的植物组培资料、进行菊花等植物离体叶组培的相应培养基的配制与灭菌,课中进行离体叶培养。

利用课余时间进行离体叶培养的观察、记录,老师集中2节课再进行讲解与分析,学生完成实训报告。

茎段的培养

课前阅读如菊花等植物的生物学特性及其茎段的植物组培资料、进行菊花等植物茎段组培的相应培养基的配制与灭菌,课中进行茎段培养。

利用课余时间进行茎段培养的观察、记录,老师集中2节课再进行讲解与分析,学生完成实训报告。

工作任务4:

花药与花粉的培养

项目活动4:

课前阅读如茄子等植物的生物学特性及其花药与花粉的植物组培资料、进行茄子等植物花药与花粉组培的相应培养基的配制与灭菌,课中进行花药与花粉培养。

利用课余时间进行花药与花粉培养的观察、记录,老师集中2节课再进行讲解与分析,学生完成实训报告。

工作任务5:

离体根培养物的继代培养

项目活动5:

利用课余时间进行培养前的准备,包括资料的查阅、培养基的选择、配制及其灭菌,在课中将上述离体根培养的产物进行继代转接。

利用课余时间进行培养观察、记录并完成实验与实训报告。

工作任务6:

子房与胚珠的培养

项目活动6:

课前阅读如茄子等植物的生物学特性及其子房与胚珠的植物组培资料、进行茄子等植物子房与胚珠组培的相应培养基的配制与灭菌,课中进行子房与胚珠培养。

利用课余时间进行培养基的配制与灭菌、无菌水的制作与灭菌、接种工具的包扎与灭菌等前期工作。

利用课余时间进行子房与胚珠培养的观察、记录。

老师集中2节课再进行讲解与分析,学生完成实训报告。

工作任务7:

离体叶培养物的继代培养

项目活动7:

利用课余时间进行培养前的准备,包括资料的查阅、培养基的选择、配制及其灭菌,在课中将上述离体叶培养的产物进行继代转接。

再利用课余时间进行培养观察、记录并完成实验与实训报告。

工作任务8:

离体茎段培养物的继代培养

项目活动8:

利用课余时间进行培养前的准备,包括资料的查阅、培养基的选择、配制及将上述离体茎段培养的产物进行继代转接。

工作任务9:

花药与花粉培养物的继代培养

项目活动9:

离体快速繁殖的培养流程;

不同培养对象的取材、处理和灭菌方法;

不同植物继代的切割方式;

了解茎尖、茎段、叶片的培养方法与注意事项;

花药与花粉培养的方法、特点和用途;

培养子房与胚珠的方法、特点和用途;

正确进行花药和花粉预处理,能区别出不同发育时期的花粉;

1为什么说叶培养时选择的外植体以幼嫩的叶片较老叶好?

2为何选择饱满的叶芽作为外植体较瘦弱的好?

3为何消毒外植体时选择的消毒剂种类与浓度及消毒时间对初代培养污染和成活率的控制是十分重要的?

4如何确定所采集的花蕾处于单核期?

5何谓“群体效应”?

“群体效应”在花粉组培技术有何作用?

6从花药中分离花粉中如何控制挤压的力度?

7谈一谈你从花蕾中剥取子房的心得。

8想一想无核葡萄胚珠培养形成后的苗是几倍体?

9为什么说叶培养时选择的外植体以幼嫩的叶片较老叶好?

10为何选择饱满的叶芽作为外植体较瘦弱的好?

11为何消毒外植体时选择的消毒剂种类与浓度及消毒时间对初代培养污染和成活率的控制是十分重要的?

模块五.:

常见组培的关键技术

掌握外植体培养要素;

能利用植物组培的基础知识分析植物组织培养过程中常见的异常现象;

掌握百合及兰科花卉的组培方法的特点;

掌握当地常见水果作物的组培方法的特点;

能够分析和解决组培过程中出现的污染、褐化、玻璃化等异常现象;

能够针对不同各类的植物科学设计培养方案并进行有效的组培工作。

掌握污染、褐化、玻璃化等组培过程中的异常现象

课前查阅污染、褐化、玻璃化等组培异常现象。

结合上单元的各种离体材料培养的组培过程中所出现的现象,理解和分析组培过程中的污染、褐化和玻璃化的概念和引起的原因,思考如何克服污染、褐化和玻璃化现象。

学会观察黄化;

材料死亡;

变异和畸形;

增殖率低下或过盛;

组培苗瘦弱或徒长;

移栽死亡率高、不生根或生根率低等异常现象,并分析其原因。

课前查阅黄化,材料死亡,变异和畸形,增殖率低下或过盛,组培苗瘦弱或徒长,移栽死亡率高、不生根或生根率低等异常现象。

结合上单元的各种离体材料培养的组培过程中所出现的现象,理解和分析组培过程中的黄化,材料死亡,变异和畸形,增殖率低下或过盛,组培苗瘦弱或徒长,移栽死亡率高、不生根或生根率低等异常现象的概念和原因,思考如何克服这些现象。

柑桔的组培

根据专业课前查阅百合等花卉或柑桔等果树的组培资料,小组讨论百合或柑桔组培方案,利用课余时间配制培养基并进行灭菌等前期准备工作。

课中在老是的引导下进行柑桔组培的外植体选择、采集及处理,并行无菌接种。

再利用课余时间进行柑桔组培的观察、记录并完成实验报告。

引起植物组培污染、褐化、玻璃化的组培异常现象、原因及防治措施。

引起黄化、组培苗瘦弱或徒长等异常现象的原因及防治措施。

当地常见的花卉或果树的组培技术。

①解释“玻璃化现象、褐变、黄化现象、消毒”等术语

②论述植物组培过程中常见的技术问题有哪些?

如何克服?

模块六.:

植物脱毒技术

理解无病毒苗培育的意义;

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