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版选修3第2讲细胞工程

第2讲 细胞工程

考纲要求

全国卷五年考情

1.植物的组织培养(Ⅱ)

2019·卷ⅡT40

2.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)

2019·卷ⅢT38,2019·卷ⅡT40

3.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)

2019·卷ⅠT40

考点一|植物细胞工程

(对应学生用书第252页)

[识记—基础梳理]

1.细胞工程的概念

2.植物细胞的全能性

(1)概念:

具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。

(2)原理:

细胞内含有本物种的全套遗传信息。

(3)全能性表达条件:

具有完整的细胞结构,处于离体状态,提供一定的营养、激素和其他适宜外界条件。

3.植物组织培养技术

(1)理论基础:

植物细胞的全能性。

(2)填写操作过程图:

―→

图中①表示脱分化,②表示再分化,A表示愈伤组织,B表示丛芽或胚状体。

(3)培养条件:

①无菌:

培养基灭菌、培养材料和培养器械消毒。

②固体培养基:

大多由无机营养成分、有机营养成分、激素、琼脂四部分组成。

③光照:

脱分化阶段不需要光照。

④激素调控:

培养基中生长素和细胞分裂素的比例调控组织培养进程。

4.植物体细胞杂交技术

(1)概念:

将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。

(2)操作流程

(3)流程分析

①过程a为去除细胞壁获得具有活力的原生质体,用到的酶是纤维素酶和果胶酶。

②过程b是原生质体的融合,其原理是细胞膜的流动性。

③诱导b融合的两种方法:

物理法包括离心、振动、电激等;

化学法一般用聚乙二醇作为诱导剂。

④过程c是原生质体融合后再生出细胞壁。

⑤过程d是组织培养技术,其原理是细胞的全能性。

(4)意义:

克服了远缘杂交不亲和的障碍、获得杂种植株。

5.植物细胞工程的实际应用

(1)

(2)作物新品种的培育:

①单倍体育种

②突变体的利用

[教材边角知识] 选修3 P36“小知识”,固体培养基中的无机营养成分和有机营养成分各有哪些物质?

试简要说明。

无机营养成分包括    ;有机营养成分包括           等物质。

【提示】 水分、无机盐 小分子糖类、氨基酸、核苷酸

[理解—深化探究]

1.植物体未离体的组织、细胞并未表现出全能性,可能的原因是什么?

【提示】 在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性表达出各种蛋白质,分化形成不同的细胞,从而构成生物体的不同组织。

2.植物组织培养与植物体细胞杂交在依据的原理、技术操作等方面有何不同?

【提示】 

(1)前者依据的原理为细胞的全能性;后者依据的原理,除细胞的全能性外,还有细胞膜的结构特性,即细胞膜具有一定的流动性。

(2)前者操作技术主要为脱分化、再分化等;后者的操作技术:

除脱分化、再分化外,还要用酶解法去除细胞壁,用一定的方法诱导原生质体融合。

3.生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养中非常重要,人们常把它们称为“激素杠杆”。

简述它们在组织培养中各发挥何种作用?

【提示】 当生长素含量高于细胞分裂素时,主要诱导植物组织脱分化和根原基的形成;而当细胞分裂素含量高于生长素时,则主要诱导植物组织再分化和芽原基的形成。

4.脱分化和再分化的比较

比较内容

脱分化

再分化

过程

外植体→愈伤组织

愈伤组织→幼苗

形成体特点

排列疏松、高度液泡化的薄壁细胞

有根、芽

需要

条件

(1)离体

(2)适宜的营养

(3)生长素/细胞分裂素的比例适中

(4)不需光

(1)离体

(2)适宜的营养

(3)生长素/细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽

(4)光照

[运用—考向对练]

考向1 植物组织培养过程分析

1.(2019·武汉市高三调研)应用植物组织培养技术,不仅可实现种苗的快速繁殖、培育无病毒植株,也可加快作物及苗木育种。

下面是培育柑桔耐盐植株的实验流程:

茎段―→愈伤组织―→耐盐植株

回答下列问题:

(1)愈伤组织是由离体的茎段经________过程形成的,此时愈伤组织细胞________(填“具有”或“不具有”)细胞的全能性。

(2)对愈伤组织进行了两次处理,处理1中γ射线照射的目的是___________,用γ射线不直接处理茎段而是处理愈伤组织,原因是___________________;处理2中添加的物质X为________。

(3)植物组织培养技术也被广泛应用于其他作物的育种中。

在培育白菜甘蓝、三倍体无子西瓜、农杆菌转化法获得抗虫棉中,必需用到植物组织培养技术的是________。

[解析] 由图可知,培育柑桔耐盐植株是利用了γ射线照射,使得发生基因突变,再利用一定浓度盐的培养基去选择耐盐植株。

(1)离体的茎段经过脱分化过程形成愈伤组织,此时愈伤组织具有未分化的特点,细胞依然具有细胞的全能性。

(2)对愈伤组织进行了两次处理,处理1中γ射线照射的目的是诱导基因突变。

愈伤组织细胞处于不断地分裂状态,易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变,因此通常用γ射线处理植物的愈伤组织能获得较好效果。

该技术最终培育柑桔耐盐植株,因此处理2中添加的物质X为氯化钠,起选择作用,具有能适应一定浓度盐的愈伤组织才可以生长,不适应的愈伤组织死亡。

(3)三倍体无子西瓜的培养过程是:

利用秋水仙素处理二倍体西瓜的幼苗,使之变成四倍体植株,再用二倍体西瓜给四倍体西瓜授粉,结出三倍体的种子。

第二年将此三倍体的西瓜种子种下去,授以二倍体的花粉,结出三倍体的无子西瓜。

整个过程中没有用到植物组织培养。

作物育种研究中常用农杆菌转化法将含抗虫基因的Ti质粒导入到植物体细胞中,再利用植物组织培养技术获得抗虫的农作物。

运用细胞工程培育白菜甘蓝杂种植株,需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培养成杂种植株。

[答案] 

(1)脱分化 具有 

(2)诱发基因突变 愈伤组织细胞分裂能力强,易诱发基因突变 NaCl(或盐)

(3)白菜甘蓝、抗虫棉

1.具有全能性:

理论上,活细胞都具有全能性。

2.体现全能性:

只有发育成完整个体,才能说明体现了细胞的全能性。

 植物组织培养技术被广泛应用于无病毒植株培育、育种及获得细胞产物的工厂化生产等。

结合下图中番茄植株的培育过程,回答相关问题:

(1)①过程中通常使用____________酶来获取植物细胞原生质体,此处使用的外界溶液浓度不宜过小,以防止细胞原生质体________。

(2)铺平板类似于微生物接种,平板培养基中添加蔗糖的目的除了调节渗透压外,还有________的作用。

(3)图中属于再分化的过程是________(填序号)。

(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高,若想培育多倍体番茄,可选择在图中的过程③中添加________(填物质)进行处理,也可以选择在过程⑥中添加一定浓度的________(填物质)进行处理。

(5)植物组织培养技术不仅可以保持优良品种的________特性,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

(6)“人工种子”由胚状体、包埋胚状体的胶质以及人造种皮等3部分组成,包埋胚状体的胶质中富含有机营养,这是因为胚状体在萌发初期不能进行________,为了满足胚状体代谢的需求,“人造种皮”则必须具有良好的透水、________的性能。

[解析] 

(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,通常使用纤维素酶和果胶酶来获取植物细胞原生质体,此处使用的外界溶液不宜过小,以防止细胞原生质体渗透吸水涨破。

(2)培养基中添加蔗糖的目的除了调节渗透压外,还有提供营养的作用。

(3)由愈伤组织形成试管苗的过程需经过再分化,即图示的⑨⑩。

(4)若想培育多倍体番茄,可在培养基中添加聚乙二醇,促使植物体细胞融合;也可以在植物体细胞脱分化后进行有丝分裂时,用秋水仙素处理,使得染色体加倍。

(5)植物组织培养技术属于无性繁殖,不仅可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。

(6)胚状体在萌发初期不能进行光合作用,因此包埋胚状体的胶质中富含有机营养,以供胚状体在萌发初期细胞生命活动的需要。

胚状体细胞要进行细胞呼吸等代谢活动,因此“人造种皮”则必须具有良好的透水、透气的性能。

[答案] 

(1)纤维素酶和果胶(答纤维素酶也可以) 吸水涨破(或破裂) 

(2)提供营养 (3)⑨⑩(答⑨或⑩均可) (4)聚乙二醇 秋水仙素 (5)遗传 (6)光合作用 透气

考向2 植物体细胞杂交过程分析

2.植物细胞杂交可以培养杂种植物,下列是某科研小组的操作。

请回答相关问题。

【导学号:

67110096】

(1)将甲、乙两个不同品种的植株进行杂交,首先要去掉植物细胞的细胞壁,采用的酶是________________,得到原生质体甲和原生质体乙,然后进行人工诱导形成细胞团,通常采用的促融剂是________。

(2)甲细胞的基因型为Gg,乙细胞的基因型为Hh(两对基因位于不同对的同源染色体上)两两融合后所形成细胞的基因型为________________________。

(3)经研究发现,在光照强度大于800Lux时,只有同时存在G和H基因的细胞才能分化形成丛芽,可据此筛选出杂种细胞。

丛芽进一步培养长大为植株,该植株自交后代中,继续在大于800Lux的光照下培养,能长成植株个体的基因型为_______________________________________________________。

(4)在进行分化培养时需要换瓶操作,换瓶的主要目的是

________________________________________________________________。

(5)植物体细胞杂交的优点是_______________________________________。

[解析] 

(1)植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,因此用酶解法去除植物细胞的细胞壁所需的酶为纤维素酶和果胶酶。

人工诱导原生质体融合的过程,常用的化学试剂是聚乙二醇。

(2)甲、乙两细胞融合时,可以发生甲、乙细胞的自身融合,也可以发生甲和乙之间的融合,由此可知两两融合后所形成细胞的基因型为GGgg,HHhh,GgHh。

(3)由信息“只有同时存在G和H基因的细胞才能分化形成丛芽”,则其自交后代中能长成植株个体的基因型中必须同时含有G和H基因,由此可知符合题意的基因型为GGHH,GgHh,GGHh,GgHH。

(4)在进行分化培养时需要换瓶操作,换瓶的主要目的是更换营养物质,改变激素的浓度比例。

(5)与传统的有性杂交相比,植物体细胞杂交的最大优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍,能够打破物种生殖隔离的限制。

[答案] 

(1)纤维素酶和果胶酶 聚乙二醇 

(2)GGgg,HHhh,GgHh (3)GGHH,GgHh,GGHh,GgHH (4)改变培养基中的激素浓度配比 (5)可以打破不同物种之间的生殖隔离(或答“克服了远缘杂交不亲和的障碍”)

1.植物体细胞杂交:

若两个不同品种的植物细胞A、B进行融合,A含有2X条染色体,2个染色体组,基因型为Aabb,B含有2Y条染色体,2个染色体组,其基因型为ccDd,则新植株应为四倍体,其体细胞中染色体数为2X+2Y,基因型为AabbccDd,从中不难看出,体细胞杂交即两个细胞融合成一个细胞,不管是染色体数、基因型还是染色体组都采用直接相加的方法。

2.植物有性杂交:

有性杂交的子代细胞中染色体数为X+Y、基因型为AbcD或abcD或Abcd或abcd,即先减半再相加。

 (2019·潍坊市调研)科学家以番茄(2N)和马铃薯(4N)为材料利用下图技术得到“番茄—马铃薯”植株。

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