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其中“师傅”更早则意指春秋时国君的老师。

《说文解字》中有注曰：

“师教人以道者之称也”。

“师”之含义，现在泛指从事教育工作或是传授知识技术也或是某方面有特长值得学习者。

“老师”的原意并非由“老”而形容“师”。

“老”在旧语义中也是一种尊称，隐喻年长且学识渊博者。

“老”“师”连用最初见于《史记》，有“荀卿最为老师”之说法。

慢慢“老师”之说也不再有年龄的限制，老少皆可适用。

只是司马迁笔下的“老师”当然不是今日意义上的“教师”，其只是“老”和“师”的复合构词，所表达的含义多指对知识渊博者的一种尊称，虽能从其身上学以“道”，但其不一定是知识的传播者。

今天看来，“教师”的必要条件不光是拥有知识，更重于传播知识。

不同种类细菌的生长均需要相同碳源

B．常用液体培养基分离获得细菌单菌落

C．细菌大量培养过程中，芽孢形成于细菌生长的调整期

D．培养基中含有高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选

[解析]　不同类型的细菌，生长条件不同，所需的碳源也不同，如甲烷氧化菌以甲烷和甲醇作为碳源，洋葱假单孢能利用90多种含碳化合物；

要想观察细菌的单个菌落，必须在固体培养基上培养；

芽孢是有些细菌（多为杆菌）在一定条件下细胞质高度浓缩脱水所形成的一种抗逆性很强的球形或椭圆形的休眠体，是在衰退期形成的；

金黄色葡萄球菌是嗜盐细菌，高浓度NaCl对其生活有利，对其他微生物生存不利，因此有利于金黄色葡萄球菌的筛选。

2．培养基为微生物的生长繁殖提供（　D　）

A．水　　B．碳源

C．氮源D．水、碳源、氮源和无机盐等

3．将配制好的培养基进行灭菌应用（　B　）

A．灼烧灭菌B．高压蒸气灭菌

C．干热灭菌D．煮沸灭菌

4．下列几项需要用到灭菌的是（　C　）

A．实验操作的空间B．操作者的衣着和手

C．培养基D．牛奶

5．判断以下部位不含有微生物的是（　D　）

A．洗干净的脸上B．洗完澡后的皮肤

C．刷完牙后的口腔D．灼烧之后的灭菌环

[解析]　灼烧是灭菌的一种手段。

经过灼烧后，所有的微生物均被消灭。

6．为了保证结果准确，一般选择菌落数在何种范围的平板进行计数（　C　）

A．30～100B．30～200

C．30～300D．30～600

[解析]　平划计数时选择的菌落数为30～300。

7．（2019·

西宁四中高二月考）下列关于大肠杆菌的培养中，叙述不正确的是（　B　）

A．在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件

B．在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒

C．若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的稀释度

D．使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃

[解析]　微生物培养条件有营养条件，PH、温度、渗透压等，A正确；

为防止杂菌污染，对培养基和培养皿要进行灭菌，B错误；

为计数活菌数，要多次实验求平均值、操作要严格，还要保证样品稀释度，便于检测，C正确；

为防止对环境的污染，用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，D正确。

8．牛肉膏可以为微生物提供（　C　）

A．氮源和维生素B．氢元素和氧元素

C．碳源、氮源、磷酸盐和维生素D．无机盐

9．有关培养基配制原则表述正确的是（　C　）

A．任何培养基都必须含有碳源、氮源、矿质元素、水及生长因子

B．碳源和氮源必须具有一定比例，碳元素的含量最多，其次为氮元素

C．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到pH、氧、渗透压的影响

D．营养物质的浓度越高越好

10．斜面培养基形成的斜面的长度不超过管总长的（　D　）

A．1/5B．2/3

C．1/4D．1/2

11．（2019·

康杰中学高二期中）磷是植物生长的重要营养元素之一，为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，科研人员进行了实验，实验结果如下，图中表示在固体培养基中筛选出来的菌株，下表表示所筛选的三种菌株相关数值，下列相关分析错误的是（　B　）

菌株

透明圈直径（D）单位：

mm

菌落直径（d）单位：

甲

22．8

15．3

乙

20．7

7．7

丙

8．2

7．5

A．此培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐

B．根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是甲

C．培养基上出现的单一菌落可以看做一个种群

D．土壤中的磷被植物细胞吸收可用于合成ATP、核酸、NADPH等化合物

[解析]　筛选能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株，培养基中唯一的磷源应该是难溶性磷酸盐，A项正确；

D/d的比值可以代表溶解磷能力，表中菌株乙该比值最大，B项错误；

培养基上出现的单一菌落一般有同种菌株组成，可以看做一个种群，C项正确；

ATP、核酸、NADPH等化合物均含有磷元素，土壤中的磷被植物细胞吸收可用于合成ATP、核酸、NADPH等化合物，D项正确。

12．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（　D　）

A．接种时再拿起来方便B．在皿底上标记日期等方便

C．正着放置容易破碎D．可以使培养基表面的水分更好地挥发

[解析]　平板冷凝后倒置的主要原因是使培养基表面的水分更好的挥发。

13．在涂布平板操作时错误的是（　A　）

A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红

B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃酒精

D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀

[解析]　涂布器不是接种环，操作时是有区别的。

14．关于测定土壤中细菌的数量，正确叙述是（　B　）

A．一般选用103～107倍的稀释液分别涂布

B．测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释

C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释

D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布在平板上培养

[解析]　测定放线菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释。

15．要从多种细菌中分离某种细胞，培养基要用（　B　）

A．加入青霉素的培养基B．固体培养基

C．加入高浓度食盐的培养基D．液体培养基

[解析]　固体培养基可从多种细菌中分离出某种细胞。

16．用1mL无菌移液管吸取100倍的土壤稀释液0．5mL，移入无菌水的试管中，可得到1000倍的稀释液（　A　）

A．4．5mLB．5mL

C．10mLD．49．5mL

[解析]　本题可用一道比例式求解：

＝

，解得x＝4．5。

17．检验培养基是否有杂菌污染的最有效方法是（　C　）

A．将未接种的培养基放在实验桌培养

B．将未接种的培养基放在窗台培养

C．将未接种的培养基放在恒温箱中培养

D．将已接种的培养基放在恒温箱中培养

[解析]　检验培养基有没有被杂菌污染，可选取未接种的培养皿与接种样品的培养皿同时在恒温箱中培养。

如果在培养过程中未接种的培养皿没有菌落生长，说明培养基没有被杂菌污染；

若未接种的培养皿有菌落生长，说明培养基被杂菌污染。

18．（2019·

康杰中学高二期中）下列有关培养基和菌种鉴定的叙述，错误的是（　D　）

A．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

B．为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要发酵产纤维素酶的实验

C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌

D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌

[解析]　不同的细菌在固体培养上形成的菌落特征不同，可根据菌落特征判断和鉴别细菌的类型，A项正确；

筛选纤维素分解菌时，出现透明圈的菌落不一定是纤维素分解菌，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要发酵产纤维素酶的实验，B项正确；

在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红就会与纤维素结合形成红色复合物，当培养基中的纤维素被分解后，刚果红—纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素降解菌为中心的透明圈，从而可以筛选纤维素分解菌，C项正确；

鉴定尿素分解菌培养基中应以尿素为唯一碳源，D项错误。

19．用培养液培养三种细胞，让它们在三支不同的试管中生长，下图显示了细菌的生长层，如果此时往三支试管中通入氧气，则细菌的繁殖速度将是（　B　）

A．甲不变，乙减慢，丙加快B．甲加快，乙加快，丙减慢

C．甲减慢，乙减慢，丙加快D．甲减慢，乙加快，丙减慢

[解析]　甲试管内的细菌在试管上部，为好氧菌，乙试管内的细胞均匀分布，为兼性厌氧菌，丙试管内的细菌在试管底部，为厌氧菌。

向试管内通入空气，能够促进兼性厌氧菌和好氧菌的代谢，抑制厌氧菌的繁殖。

20．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是（　D　）

A．根据培养基的状态可将其分为液体培养基和固体培养基

B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型

[解析]　在尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。

21．利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇，从而减少了对石油资源的依赖，下图为生产燃料乙醇的简要流程，据图分析错误的一项是（　C　）

A．要得到微生物A，最好选择富含纤维素的土壤采集土样

B．图中②过程常用的微生物B是酵母菌

C．微生物A和微生物B可利用的碳源相同

D．可用纤维素酶制剂代替微生物A起作用

[解析]　微生物A所用碳源为纤维素，微生物B所用碳源为纤维素降解物。

22．（2019·

康杰中学高二期中）漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。

下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述不正确的是（　A　）

A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C．在涂布平板上长出的菌落，再通过划线进一步纯化

D．斜面培养基中含有大量营养物，可临时保存菌株

[解析]　生活污水中含有木质较少，不适于分离产漆酶菌株，A项错误；

筛选产漆酶的菌落，培养基中应以漆酶的底物为唯一碳源，使其他微生物难以生长，B项正确；

在涂布平板上长出的菌落，可能由连在一起的多个菌体形成，需要通过划线培养进一步纯化，C项正确；

斜面培养基能增大接种面积，可用作菌种保存，D项正确。

23．下表表示在不同培养基中某细菌的生长繁殖情况（A、B、C、H、I、J、K、M为培养基的成分，“＋”表示生长，“－”表示不生长），请分析下列哪种物质细菌不能合成（　C　）

培养基

成分

A、B、

C

C、I、M

C、H、K

C、M、J

C、I、K

C、H、J

C、K、M

生长

状态

－

＋

A．HB．I

C．KD．M

[解析]　比较不同培养基的添加物，凡添加了物质K的培养基，细菌都能生长，反之则不能生长，说明物质K是细菌不能合成的。

24．抗生素可由微生物产生，具有抑菌作用，能在琼脂培养基中扩散。

在筛选产生抗生素的菌种时，先在琼脂培养基平板上划线接种一种从土壤中获得的甲菌，在27℃下培养3天，形成菌落。

然后接种乙、丙、丁三种致病菌（图A），继续在同样条件下培养3天，结果如图B。

分析结果，得出的结论是（　A　）

①甲菌产生了抗生素

②丁菌的生长被丙菌产生的抗生素抑制

③乙菌的生长被甲菌产生的抗生素抑制

④丙菌产生的抗生素抑制了乙菌的生长

A．①③B．①④

C．②③D．②④

[解析]　从题图来看，乙菌靠近甲菌落的部分生长被抑制，而其他菌生长正常，因此最可能的原因是甲菌产生了抗生素，此种抗生素只能抑制乙菌的生长，而对丙、丁两种菌没有影响。

①③正确，答案为A。

25．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。

将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自主固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（　C　）

①加抗生素　②不加抗生素　③加氮素　④不加氮素

⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦37℃恒温箱中培养　⑧28～30℃下培养

A．①③⑤⑦B．②④⑥⑧

C．②④⑤⑧D．①④⑥⑦

[解析]　自生固氮菌生长繁殖的适宜温度是28～30℃，能够将无机氮源合成有机氮，不需要加氮源。

细菌对抗生素敏感，固氮菌是异养生物，需要加葡萄糖。

第Ⅱ卷（非选择题　共50分）

二、非选择题（共50分）

26．（10分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__原油__为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__选择__培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即__平板划线法__和__稀释涂布平板法__。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力__强__。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、__干热灭菌__和__高压蒸汽灭菌__。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯__火焰__附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

27．（10分）（2019·

苏州一模）某研究小组将一组相同圆纸片放入不同浓度的麦迪霉素（一种抗生素）溶液中浸泡后，放在接种有大肠杆菌的培养基上培养，实验结果如下图1。

请分析并回答下列问题：

（1）将装有培养基的灭菌包装入高压蒸汽灭菌锅时，注意不要装得太挤，以免因__影响蒸汽流通__而影响灭菌的效果。

加热初期，必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则将因__达不到规定温度__而影响灭菌的效果。

倒平板时，待平板冷却凝固后，应将平板倒过来放置，并用记号笔在__皿底__上标明培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息。

（2）实验结果表明，对大肠杆菌抑制作用最明显的是浓度为__⑤__（填图1中序号）的麦迪霉素。

（3）该实验中，宜使用__稀释涂布平板__法接种大肠杆菌，在培养和接种大肠杆菌时要特别注意进行无菌操作。

为了避免无关变量对实验结果的影响，对圆纸片的要求是__大小、质地相同__。

（4）该研究小组运用上述实验方法，还研究了相同浓度的三种不同抗生素A、B、C对大肠杆菌生长的影响。

请在上图2中以图示的方法表示这一处理方案（可模仿图1中图示并加以必要注解的方法）。

答案：

（4）见下图

[解析]　

（1）高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，装有培养基的灭菌包装入时不能装得太挤，否则会影响蒸汽流通而影响灭菌的效果。

加热初期必须将灭菌锅内的冷空气排尽，否则会因达不到规定温度而影响灭菌效果。

培养基的种类、培养日期、平板上样品的稀释度、培养微生物名称及制作者姓名等信息要用记号笔在皿底上标明。

（2）由图1可以看出，浓度为⑤的麦迪霉素浸泡后的圆纸片周围透明圈最大，对大肠杆菌抑制作用最明显。

（3）该实验用稀释涂布平板法进行接种。

为了避免无关变量对实验结果的影响，圆纸片的大小、质地要相同。

（4）研究相同浓度的三种不同抗生素A、B、C对大肠杆菌生长的影响，可以将一组相同圆纸片分别放入等量的无菌水、抗生素A、B、C溶液中浸泡后，放在接种有大肠杆菌的培养基上。

28．（10分）（2019·

华中师大附中期中）空气中的微生物在重力等作用下，可以有一定程度地沉降。

某研究小组欲研究城市高楼不同楼层在雾霾空气中微生物的分布情况。

实验步骤如下：

①配置培养基（成分：

牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，将各组平板分别放置在顶层、中层、底层等不同高度的阳台上，实验组开盖暴露一段时间；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于__牛肉膏、蛋白胨__。

若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是__琼脂__。

培养基灭菌方法为__高压蒸汽灭菌法__。

（2）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为56个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了__杂菌污染__现象。

若将50（即56－6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法__不正确__（填“正确”或“不正确”）。

（3）若要进一步确定其中大肠杆菌的菌落数，还需要配制__伊红美蓝__培养基加以鉴别。

考虑到颗粒性物质会为微生物附着提供场所，用菌落数反映微生物实际数目可能会使测量值偏__小__（填“大”或“小”）。

[解析]　

（1）培养基中的牛肉膏、蛋白胨可以为微生物提供所需的氮。

无菌平板属于固体培养基，培养基中应加入琼脂。

培养基灭菌方法为高压蒸汽灭菌法。

（2）在某次调查中，空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明在此次调查中出现了灭菌不彻底或杂菌污染现象。

空白对照组菌落数的平均值不一定是6，将50（即56－6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确。

（3）进一步确定其中大肠杆菌的菌落数，还需要配制伊红美蓝培养基加以鉴别。

考虑到颗粒性物质会为微生物附着提供场所，同一菌落可能是两个或多个微生物形成，用菌落数反映微生物实际数目可能会使测量值偏小。

29．（10分）（2019·

惠州模拟）日前微博传言手机细菌比马桶多。

如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。

回答下列相关问题：

（1）该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、__氮源和无机盐__等。

（2）据图，两电视台均采用__稀释涂布平板__法接种，该方法需要__BCDE__（多选）。

A．接种环　　B．酒精灯

C．移液管D．涂布器

E．无菌水

（3）通过观察菌落的__形态、大小__，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。

两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：

__手机的取样和马桶的取样都不相同___。

（4）按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0．1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为__2×

104__个/平方厘米。

该实验对照组该如何设置？

__取培养基涂布0．1mL无菌水进行培养__。

[解析]　

（1）微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。

（2）据图分析可知，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，该方法用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。

（3）不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。

两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，可能是因为手机的取样和马桶的取样都不相同。

（4）根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝（48＋50＋52）÷

3×

102÷

0．1×

10÷

（5×

5）＝2×

104（个/平方厘米）。

30．（10分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。

该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

（1）实验原理：

圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；

青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。

（2）材料用具：

（略）

（3）实验步骤：

①制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b；

②__分别在A、B培养基上接种等量的混合的微生物__，并在25℃条件下培养__3～4__天。

③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。

（4）请回答：

①本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：

A、a是__无氮__培养基，B、b是__含青霉素的__培养基，根据上述原理配制的培养基属于__选择__培养基。

②实验步骤中第③步的目的是__分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌__。

③圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为__圆褐固氮菌无成形的细胞核__。

④青霉素抑制圆褐固氮菌等细菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。

请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是__细菌细胞壁和真菌细胞壁的化学组成不同__。