临床检验血液学第三章造血细胞检验方法.pptx

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第二篇造血细胞及其检验第二章造血基础理论第三章造血细胞检验方法第四章造血细胞检验的临床应用检验医学院第三章造血细胞检验方法第一节造血细胞形态学第二节细胞化学染色第三节骨髓活体组织检验（自学）第四节血细胞超微结构检验（自学）第五节造血祖细胞培养检验（自学）第六节血细胞遗传学检验（自学）第七节分子血液学检验（自学）检验医学院检验医学院细胞化学染色的种类铁染色中性粒细胞碱性磷酸酶染色过氧化物酶染色苏丹黑染色酯酶染色过碘酸-雪夫反应酸性磷酸酶染色急性白血病分型目的要求总结病例急性白血病分型急性淋巴细胞白血病（ALL）急性髓细胞白血病（AML,NALL）M0急性髓细胞白血病微小分化型M1急性粒细胞白血病未分化型M2急性粒细胞白血病部分分化型M3急性早幼粒细胞白血病M4急性粒单核细胞白血病M5急性单核细胞白血病M6急性红白细胞白血病M7急性巨核细胞白血病检验医学院检验医学院细胞化学染色的种类铁染色中性粒细胞碱性磷酸酶染色过氧化物酶染色苏丹黑染色酯酶染色过碘酸-雪夫反应酸性磷酸酶染色急性白血病分型急白初诊的常规染色：

过氧化物酶染色特异性酯酶非特异性酯酶+NaF过碘酸-雪夫反应检验医学院三、过氧化物酶染色peroxidase（POX）、myeloperoxidase（MPO）血细胞所含的POX主要为髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）1985年血液学国际标准化委员会（ICSH）推荐三种方法：

二氨基联苯胺法（DAB）、过氧化物酶氨基甲基卡巴唑染色法及二盐酸联苯胺法。

以前常用复方联苯胺法（Washburn法）下一页检验医学院二氨基联苯胺法（DAB）的原理血细胞内的POX，能催化二氨基联苯胺（DAB）脱氢，形成金黄色不溶性沉淀而，DAB所脱的氢使HO还原成HO222检验医学院二氨基联苯胺法（DAB）检验医学院复方联苯胺法的原理（Washburn法）四甲基联苯胺联苯胺蓝棕黑色H2O2H2O脱氢POX检验医学院复方联苯胺法检验医学院POX染色的结果判断在细胞浆中出现阳性的颗粒，根据阳性物质有无、多少分为（-）至（+）结果应报阳性率（观察100个白血病细胞，阳性细胞所占的比例）及阳性分布情况下一页POX染色的结果分级（-）无阳性颗粒。

（）颗粒细小、分布稀疏（+）颗粒较粗、常呈局灶性分布、约占胞浆1/4（+）颗粒粗大、分布较密、约占胞浆1/41/2（+）颗粒粗大、团块状分布、约占胞浆1/23/4（+）布满整个细胞、可覆盖核上检验医学院POX染色结果分级：

检验医学院各种细胞POX染色的结果粒细胞系统：

早期原粒为阴性，随着细胞的成熟阳性率和阳性程度逐渐增强单核细胞：

早期单核细胞呈阴性，其余各期均呈阳性，为（）-（）白血病时Auer小体可呈阳性吞噬细胞有时阳性，其余细胞系均呈阴性检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院POX染色的临床意义是辅助判断急性白血病细胞类型的首选、最重要的细胞化学染色ALL：

阴性（阳性率3%）M3、M2b：

强阳性M2a、M1、M6、M4、M5:

多数阳性POX染色阳性为急性髓细胞白血病！

检验医学院急性淋巴细胞白血病检验医学院急性单核细胞白血病检验医学院急性粒细胞白血病检验医学院检验医学院急性粒细胞白血病检验医学院急性早幼粒细胞白血病检验医学院急性早幼粒细胞白血病检验医学院二、苏丹黑染色法SudanblackB（SB）原理：

细胞浆内的中性脂肪、类固醇、磷脂+苏丹黑脂类物质被染成黑色结果分级：

基本同POX染色临床意义：

基本同POX染色。

但苏丹黑比POX更为敏感，但特异性差一些SB染色M3检验医学院急性早幼粒细胞白血病SB染色M5检验医学院急性单核细胞白血病六、酯酶染色-种类不同血细胞中所含酯酶的成分不同根据酯酶特异性高低分为：

特异性酯酶（specificesterase,SE）非特异性酯酶（nonspecificesterase,NSE）特异性酯酶就是指氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色非特异性酯酶的种类有多种，根据pH值不同分为酸性：

酸性-醋酸萘酚酯酶中性：

-醋酸萘酚酯酶、醋酸AS-D萘酚酯酶等碱性：

-丁酸萘酚酯酶检验医学院NAS-DCE几乎仅出现在粒细胞、特异性高。

因此又称为“粒细胞酯酶”、“特异性酯酶”氯乙酸ASD萘酚NAS-DCEASD萘酚重氮盐有色沉淀1氯乙酸ASD萘酚酯酶染色（naphytholAS-Dchloroacetateesterasestain，NAS-DCE）检验医学院NAS-DCE的正常血细胞的染色反应粒系：

原粒细胞为阴性反应或阳性反应,自早幼粒细胞至成熟中性粒细胞均为阳性反应，EOS阴性或弱阳性,BAS阳性单系：

个别可呈弱阳性反应其他：

淋巴、浆、幼红细胞和血小板均呈阴性反应检验医学院NAS-DCE的临床意义主要用于辅助鉴别急性白血病细胞类型急性粒细胞白血病：

呈阳性或少数阴性急性早幼粒细胞白血病：

呈强阳性急性单核细胞白血病：

呈阴性，少数弱阳性急粒-单核细胞白血病：

粒系阳性，单系阴性急性淋巴细胞白血病：

呈阴性检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院NAS-DCE染色：

M3-检验医学院检验医学院单核细胞系统的阳性可被氟化钠抑制，通常同时做氟化钠抑制试验醋酸ASD萘酚NAS-DAEASD萘酚重氮盐有色沉淀2醋酸AS-D萘酚酯酶染色naphythyolAS-Dacetateesterasestains，NAS-DAE检验医学院氟化钠抑制率的计算：

氟化钠试验抑制率=抑制前阳性率或阳性积分-抑制后阳性率或阳性积分抑制前阳性率或阳性积分氟化钠抑制试验的抑制率大于0.50为抑制检验医学院NAS-DAE染色的正常血细胞染色反应粒系：

常阳性，此反应不被氟化钠抑制单系：

阳性（常较强），此反应能被氟化钠抑制淋系：

阴性或弱阳性，此反应不被氟化钠抑制红系：

早期可呈阳性，随着成熟而减弱，巨系：

巨核细胞和血小板为阳性反应检验医学院NAS-DAE染色的临床意义用以辅助鉴别急性白血病的细胞类型急性粒细胞白血病：

阳性，不被NaF抑制急性早幼粒细胞白血病:

强阳性，不被NaF抑制急性单核细胞白血病：

阳性（常较强），被NaF抑制急性粒单核细胞白血病：

阳性，被NaF部分抑制急性淋巴细胞白血病：

弱阳性或阳性，不被NaF抑制检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院检验医学院3-丁酸萘酚酯酶染色原理-naphtholbutyrateesterase，-NBE）血细胞内的-丁酸萘酚酯酶在碱性条件下,将基质液中的-丁酸萘酚水解,释出-萘酚,-萘酚与基质液中的坚牢紫酱GBC偶联,形成不溶性红色沉淀,定位于胞质内检验医学院-NBE染色的正常血细胞的染色反应粒系：

各期粒细胞均为阴性反应单系：

原单为阴性或阳性，幼单和单核为阳性，此反应可被NaF抑制，组织细胞也可阳性,但不被NaF抑制淋系：

外周血的T淋巴细胞可呈致密的局限性点状阳性反应，B淋巴细胞为阴性反应，非T非B细胞也可出现散在颗粒状阳性反应其它:

如巨核细胞和浆细胞为阴性或弱阳性反应检验医学院-NBE染色的临床意义急粒：

阴性急单：

可呈阳性反应急粒单：

部分白血病细胞呈阳性反应，部分白血病细胞呈阴性反应急淋：

阴性检验医学院急性单核细胞白血病-NBE染色检验医学院五、过碘酸-雪夫反应（糖原染色）原理（periodicacid-Schiffreaction，PAS）过碘酸（periodicacid）乙二醇基双醛基（-CHOH-CHOH）（-CHO-CHO）有色品红无色品红（shiff）检验医学院PAS正常血细胞的染色反应-红色粒系：

分化好的原粒至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应，并随着细胞的成熟而逐渐增强，阳性呈弥散性、细颗粒状；嗜酸性颗粒呈阴性（间质阳性），嗜碱性颗粒呈阳性单系分化差的原始单核细胞呈阴性，其他阳性，绝大多数阳性呈细颗粒状淋系：

大多数呈阴性，阳性率常20，呈粗颗粒或块状巨系均呈阳性，呈颗粒状或块状红系：

均呈阴性检验医学院检验医学院检验医学院巨核细胞呈阳性检验医学院PAS的临床意义鉴别红系良恶性疾病：

红系恶性疾病中红系可阳性（包括红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征），红系良性基本阴性辅助鉴别急性白血病类型：

ALL呈粗颗粒状或块状；急粒呈弥散红色或细颗粒状；急单：

呈细颗粒状其他细胞：

转移性腺癌、戈谢细胞呈强阳性，尼曼-匹克细胞、Reed-Sternberg细胞阴性或弱阳性检验医学院检验医学院ALL：

检验医学院粗颗粒状淋巴瘤：

粗颗粒或块状检验医学院PAS染色：

急单，细颗粒状检验医学院急单：

细颗粒状PAS染色：

M3PAS染色：

M3检验医学院M3：

弥散阳性PAS染色：

急粒PAS染色：

呈弥散阳性检验医学院急粒：

弥散阳性PAS染色：

PAS染色：

M3尼曼-皮克细胞呈弱阳性检验医学院弱阳性尼曼-匹克细胞细胞化学染色总结

（1）对于不明原因贫血的初诊患者：

常规做铁染色，必要时还应做中性粒细胞碱性磷酸酶染色和过碘酸雪夫反应急性白血病：

常规做过氧化物酶染色、特异性酯酶染色、非特异性酯酶染色及过碘酸-雪夫反应等慢性粒细胞白血病：

常规做NAP染色检验医学院四种常见类型白血病的细胞化学染色结果检验医学院M3M1、M2aM5ALLPOX染色+*或-或+*-SB染色+*或-或+*-，个别+NAS-DCE染色+*或-，个别+*-NAS-DAE染色+-或+*+-或+NAS-DAE+NaF不抑制不抑制抑制不抑制-NBE染色-+-NBE染色+NaF/抑制/PAS染色+，呈弥散状+，呈弥散状+，呈细颗粒状+，呈粗颗粒状检验医学院POX、酯酶等染色:

目的要求掌握：

POX、酯酶染色的原理、结果判断和临床意义熟悉：

POX、酯酶染色的各细胞的特点及临床意义。

临床贫血及白血病的患者细胞化学染色组合检验医了学解院：

SB染色