血吸虫病诊断标准Word格式文档下载.docx

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3.3.1.2酶联免疫吸附试验。

3.3.1.3胶体染料试纸条法试验。

3.3.1.4环卵沉淀试验。

3.3.1.5斑点金免疫渗滤试验。

3.3.2粪检找到血吸虫虫卵或毛蚴（见附录C）。

3.3.3直肠活检发现血吸虫虫卵（见附录C）。

3.4吡喹酮试验性治疗有效

4诊断原则

根据流行病学史、临床表现及实验室检测结果等予以诊断。

5诊断标准

5.1急性血吸虫病

5.1.1疑似病例：

应同时符合3.1.1和3.2.1。

5.1.2临床诊断病例：

应同时符合疑似病例和3.3.1或3.4。

5.1.3确诊病例：

应同时符合疑似病例和3.3.2。

5.2慢性血吸虫病

5.2.1临床诊断病例：

应同时符合3.1.2、3.2.2和3.3.1。

5.2.2确诊病例：

应同时符合3.1.2、3.2.2和3.3.2或3.3.3。

5.3晚期血吸虫病

5.3.1临床诊断病例：

应同时符合3.1.2、3.2.3和3.3.1（既往确诊血吸虫病者可血清学诊断阴性）。

5.3.2确诊病例：

应同时符合3.1.2、3.2.3和3.3.2或3.3.3。

6鉴别诊断（参见附录D）

6.1急性血吸虫病的鉴别诊断

疟疾、伤寒、副伤寒、肝脓肿、败血症、粟粒型肺结核、钩端螺旋体病等疾病的一些临床表现与急性血吸虫病相似，应注意鉴别。

6.2慢性血吸虫病的鉴别诊断

慢性痢疾、慢性结肠炎、肠结核以及慢性病毒性肝炎等疾病的症状有时与慢性血吸虫病相似，应注意鉴别。

6.3晚期血吸虫病的鉴别诊断

应注意结节性肝硬化、原发性肝癌、疟疾、结核性腹膜炎、慢性粒细胞性白血病等与晚期血吸虫病有相似临床症状疾病的鉴别。

流行病学及临床表现

A.1流行病学

血吸虫病在我国流行于长江流域及其以南地区，分布在湖北、湖南、江西、安徽、江苏、四川、云南、广东、广西、上海、福建、浙江等12个省、直辖市、自治区。

流行区最东为上海市南汇区，东经121°

51′；

最南为广西的玉林市,北纬22°

20′;

最西为云南省云龙县,东经99°

04′;

最北为江苏省宝应县,北纬33°

15′。

血吸虫病的传播具有地方性和季节性特点，血吸虫病是人兽共患病，人和40多种哺乳动物均可感染血吸虫病，钉螺是血吸虫的唯一中间宿主。

人或其他哺乳动物接触了疫水后感染血吸虫。

影响血吸虫病的流行因素包括自然因素和社会因素两方面。

自然因素如地理环境、气温、雨量、水质、土壤、植被等。

社会因素是指影响血吸虫病流行的政治、经济、文化、生产方式、生活习惯等。

A.2临床表现

A2.1急性血吸虫病

对发生于初次感染者，在接触疫水后1d～2d内，在接触部位的皮肤出现点状红色丘疹，部分病人感到痒。

突出症状是发热，特点是病人体温午后开始逐渐升高，傍晚时达到高峰，至午夜大汗热退，热退后病人症状明显减轻。

病人绝大多数有肝脏肿大，并伴有压痛。

感染较重者或反复感染者可出现脾脏肿大。

若不及时治疗，会迅速出现消瘦、贫血、营养性水肿和腹水，可导致死亡。

A2.2慢性血吸虫病

轻者可无明显症状，或偶有轻度肝脏或脾脏仗大，多数肝功能正常。

但可因重复感染而出现明显的症状与体征。

常见的症状有间歇性慢性腹泻、慢性痢疾。

腹泻、粘液血便常于劳累后加重。

有的可表现明显的肝脏肿大，以左叶显著，且部分人有脾脏肿大。

嗜酸粒细胞多数增高。

A2.3晚期血吸虫病

患者常有不规则的腹痛、腹泻或大便不规则、纳差、食后上腹部饱胀感等症状。

时有低热、消瘦、乏力，导致劳动力减退。

常伴有性功能减退。

肝脏肿大，质硬，无压痛。

脾脏肿大明显，可达脐下。

腹壁静脉曲张。

进一步发展可并发上消化道出血、腹水、黄疸，甚至出现肝昏迷。

患者可因免疫功能低下，易并发病毒性肝炎而明显加重病情。

晚期血吸虫病分为4种类型：

①巨脾型：

指脾脏肿大超过脐平线或横径超过腹中线者。

②腹水型：

患者常在上消化道出血、合并感染、过度劳累或使用损害肝脏的药物后诱发，腹水可时消时现，病程从数年到10年以上。

③结肠增厚型：

亦称结肠肉芽肿型或结肠增殖型。

常表现有腹痛、腹泻、便秘或腹泻与便秘交替。

左下腹可触及肿块或索条状物，有轻度压痛。

④侏儒型：

系儿童时反复多次感染血吸虫，又未及时治疗所致，患者发育迟缓，身体矮小。

实验室检查多见贫血、肝功能异常，严重病例（如腹水）可出现水电解质平衡紊乱。

血清学检查

B.1间接红细胞凝集试验（IHA）

B.1.1抗原：

为用葡聚糖凝胶G100初步纯化的SEA致敏的绵羊红细胞。

所用绵羊红细胞先经2.5%戊二醛化及1：

5000鞣酸溶液鞣化后再行致敏。

致敏后的红细胞以含10%蔗糖及1%正常兔血清的PH7.2PBS配5%悬液，分装安瓿低压冻干封存。

每批致敏红细胞作效价测定，滴度达1：

1280～1：

2560为合格。

抗原也可采用SEA和AUA的混合抗原；

血球也可采用人“O”型红细胞。

B.1.2操作方法

B.1.2.1启开安瓿，每支以1ml蒸馏水稀释混匀备用。

B.1.2.2用微量滴管加4滴（0.025ml/滴）生理盐水于微量血凝反应板第一排第二孔内，第三孔空白，第四孔加1滴。

B.1.2.3第一孔内储存待检血清，并从中吸取血清1滴加入第二孔内，充分混匀后，吸出两滴于第三孔和第四孔各加1滴。

在第四孔混匀后弃去1滴使第三孔、第四孔血清稀释度为1：

5，1：

10。

B.1.2.4用定量吸管吸取致敏红细胞悬液，于第三孔和第四孔内各加1滴，立即旋转震摇2min,室温下静置1h左右，观察结果。

B.1.2.5每次试验均应有阳性血清作阳性对照，生理盐水作阴性对照。

B.1.3结果判断

B.1.3.1阴性反应为红细胞全部沉入孔底，肉眼见一边缘光滑，致密的小圆点。

B.1.3.2阳性反应：

＋＋＋＋红细胞形成薄层凝集，边缘呈现不规则的皱褶。

＋＋＋红细胞形成薄层凝集，充满整个孔底。

＋＋红细胞形成薄层凝集，面积较“＋＋＋”者小。

＋红细胞大部分沉集于孔底，形成一圆点，周围有少量凝集的红细胞，肉眼见周边模糊（或中间出现较为明显的空白点）。

B.1.4反应标准：

以血清1：

10稀释出现凝集反应可判为阳性。

B.2酶联免疫吸附试验（ELISA）

B.2.1抗原或抗体：

常用SEA包被载体检测抗体，亦可用单克隆抗体包被载体以检测抗原。

B.2.2操作方法

B.2.2.1于微量聚苯乙烯或聚氯乙烯塑料板的凹孔中加入100μl以PH9.6碳酸盐缓冲液稀释的SEA或单克隆抗体，置4℃过夜。

B.2.2.2次日倾去抗原，用含有0.05%吐温－20的磷酸缓冲盐水（PBS-TPH7.4，0.01mol/L）洗涤3次，每次5min。

B.2.2.3于凹孔中加入以PBS-T作1：

100或 

1：

200稀释的受检者血清及参考血清（每批设1个阴性对照和1个阳性对照）100μl，37℃，1h。

B.2.2.4倾去血清，以PBS-T洗涤3次，每次5min。

B.2.2.5加入以PBS-T作1：

1000或 

4000稀释的辣根过氧化物酶（HRP）-标记结合物100μl，37℃，1h。

B.2.2.6倾去酶标记结合物，以PBS-T洗涤3次，每次5min。

B.2.2.7加入100μl已加H2O2的邻苯二胺（OPD）或四甲基联苯胺（TMB）底物溶液，37℃，30min。

B.2.2.8在各凹孔中加入2mol/L硫酸（H2SO4）50μl以终止反应。

B.2.2.9在酶标专用比色计上读取492nm（OPD为底物）或450nm（TMB为底物）光密度（OD）值，以P/N≥2.1倍判为阳性。

B.3胶体染料试纸条法试验（DDIA）

B.3.1抗原：

胶体染料标记的血吸虫SEA。

B.3.2操作方法

B.3.2.1轻轻混匀抗原贮存管中胶体染料标记的抗原液。

B.3.2.2加50μl标记液至PVC小杯中，再入10μl待检血清，缓缓混匀1min。

B.3.2.3取试纸条插入小杯中，约10min左右，待对照带区出现紫蓝色反应带，即可判断结果。

B.3.3结果判断

以检测带区和对照带区均出现紫蓝色反应带为阳性；

以对照带出现紫蓝色反应带，而检测带区无反应为阴性。

B.4环卵沉淀试验（COPT）

B.4.1虫卵：

热处理超声干燥虫卵粉。

以重感染兔血清（接种尾蚴1500～2000条，42d的兔血清）测试环沉率＞30%为合格。

B.4.2操作方法：

先用熔化的石蜡在洁净的载玻片两端分别划两条相距20mm的蜡线，在蜡线之间加受检者血清2滴（0.05ml～0.10ml），然后用针头挑取干卵约100个～150个，加入血清中，混匀，覆以24mm×

24mm盖玻片，四周用石蜡密封后，置于37℃温箱中，经48h～72h后用低倍（80×

～100×

）显微镜观察反应结果，疑似者应在高倍（400×

）显微镜下加以识别。

为简化操作亦可选用预制的有双圆孔的双面胶纸条，只需在圆孔中加入干卵和50μl血清，覆以盖玻片，置37℃孵箱中48h，观察结果。

或选用预制干卵PVC膜片，只需加入血清，置湿盒中37℃保温经24h取出，倾去血清，加少量盐水显微镜下观察反应。

B.4.3反应标准：

典型的阳性反应虫卵周围有泡状、指状或细长卷曲的带状沉淀物，边缘较整齐，有明显的折光。

其中泡状沉淀物须大于10μm（约相当于两个红细胞大小），才能定为阳性。

阳性反应的标本片，应观察100个成熟虫卵，计算其沉淀率；

阴性者必须看完全片。

阴性反应：

虫卵周围光滑，无沉淀物；

或有小于10μm的泡状沉淀物。

阳性反应的强度和环沉率：

“＋”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积小于虫卵面积的1/4；

细长卷曲的带状沉淀物小于虫卵的长径。

“＋＋”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积大于虫卵面积的1/4；

细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫卵的长径。

“＋＋＋”虫卵周围出现泡状、指状沉淀物的面积大于虫卵面积的1/2；

细长卷曲的带状沉淀物相当于或超过虫卵长径的2倍。

计算环沉率（%）=阳性虫卵数/全片观察成熟虫卵数×

100%

环沉率≥3%时，判为阳性。

B.5斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）

B.5.1抗原：

1%血吸虫SEA

B.5.2操作方法

B5.2.1在小盒中央膜上加B液（PH8.2的0.02MTRIS-Hcl缓冲液）2滴（100μl），待渗入。

B.5.2.2加待检血清25μl，待渗入。

B.5.2.3加B液2滴（100μl），待渗入。

B.5.2.4加入A液（金标记SPA或抗人IgG结合物）2滴，待渗入。

B.5.2.5加B液2滴（100μl），待渗入。

B.5.3结果判断：

在膜上显示红色斑点为阳性，仅留白色背景为阴性。

色泽接近标准阳性者为＋，色泽与阳性血清一致者为＋＋，色泽深于标准阳性者为＋＋＋。

病原学检查

C.1粪便检查

C.1.1尼龙绢袋集卵孵化法

操作步骤：

取受检者粪便约30g，先置于40目～60目/25.4mm的铜丝筛中，铜丝筛置于下口夹有铁夹的尼龙绢（260目/25.4mm）袋口上，淋水调浆，使粪液直接滤入尼龙绢袋中，然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并用竹筷在袋外轻轻刮动助滤，直到滤出液变清。

取下夹于袋底下口的铁夹，将袋内沉渣淋入三角烧瓶。

如需加做沉淀镜检，可在烧瓶中吸取沉渣3滴～4滴放在载玻片上，抹成涂片，涂面应占载玻片面积的2/3。

涂片的厚度以能透过涂片尚能看清印刷字体为标准，将涂片置于低倍显微镜下检查。

全片镜检时间不宜少于2min，每份粪便至少检查两张涂片，镜检时应仔细识别血吸虫卵和其他蠕虫卵。

然后将盛有粪便沉渣的三角烧瓶加水至离瓶口1cm处，放入孵化室（箱）或在室温下孵化。

一定时间后取出烧瓶，观察毛蚴。

一般需观察2次～3次，观察时间随温度高低而不同。

温度高时孵出较早；

温度低时毛蚴孵出迟。

气温超过30℃时，第1次观察可在0.5h～1h后进行，阴性者可在4h后观察第2次，8h观察第3次，3次均为阴性者，判作阴性结果；

气温在26℃～30℃时，可在孵化后4h开始观察，阴性者8h及12h再观察1次；

气温在20℃～25℃时，则可在8h后观察第1次，12h后观察第2次；

如利用自然气温孵化，一昼夜之间的气温悬殊，可在操作后的次晨再观察1次。

一般室温在25℃以上时，可利用自然气温孵化，无需加温。

观察毛蚴时，应将烧瓶向着光源，并衬以黑纸板。

要注意毛蚴与水中原生动物的区别。

如有怀疑，可用毛细吸管吸出，在显微镜下鉴别。

C.1.2改良加藤厚涂片法

置尼龙绢片（80目～100目/25.4mm）于受检粪样上，用软性塑料刮片在尼龙绢片上轻刮，粪便细渣即由绢片微孔中露至绢片表面。

将定量板（3cm×

4cm×

2.5mm，板中圆孔的孔径为3.5mm，刮平后，孔中可容粪量41.7mg）放在载玻片中部，以刮片从尼龙绢片上刮取细粪渣填入定量板的中央孔中，填满刮平。

小心提起定量板，粪样即留在载玻片上。

取一张经甘油-孔雀绿溶液浸渍24h的亲水性玻璃纸（30mm×

30mm），盖在粪便上，用橡皮塞或另一块载玻片覆于玻璃纸上轻压，使粪便均匀展开至玻璃纸边缘。

编号后置于25℃室温，相对湿度75%下过夜，镜检。

否则会因透明过度而漏检。

每份粪样至少需做2张涂片，以镜检每片平均检出的虫卵数乘以24即为1g粪便中的虫卵数（EPG）。

C.1.3集卵透明法

将粪便充分搅匀后，取5g置于搪瓷杯中，加水调成粪液。

把粪液通过60目/25.4mm的铜丝筛淋水滤入2只套叠在一起的尼龙袋中（袋深20cm，袋口直径8cm，外袋260目/25.4mm，内袋120目/25.4mm）。

然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并把袋轻轻振荡，使加速过滤，直至滤出液变清为止。

用药勺刮取外袋内全部沉渣，分作涂片。

在沉渣图片上，覆盖经甘油-孔雀绿溶液浸渍24h的亲水性玻璃纸（2cm×

5cm），以玻片压匀，置室温中过夜，次日镜检。

以全部沉渣获得的虫卵数相加，再除以5得出每克粪便中虫卵数（EPG）。

C.2直肠活组织检查

按医院常规进行。

本法可用于医院和血防站内对疑似病人的诊断，不宜用于普查。

鉴别诊断

D.1急性血吸虫病的鉴别诊断

D.1.1疟疾 

大多数病人有寒战；

间歇型发热可每日发作，但多为隔日发作；

肝脏肿大不明显；

白细胞计数往往正常或减少，嗜酸粒细胞百分比不增高；

血液检查可找到疟原虫。

D.1.2伤寒、副伤寒 

持续高热，表情淡漠，相对缓脉。

起病第二周胸腹壁出现少量斑丘疹（玫瑰疹）。

白细胞计数减少及嗜酸粒细胞百分比减低甚至降至零；

早期血细菌培养、后期尿及粪培养可获伤寒杆菌。

肥达反应在急性血吸虫病病人中亦可出现阳性，如病程中凝集价持续增高，则伤寒的可能性较大。

D.1.3肝脓肿 

病人常有肝区疼痛，压痛极为明显，且较局限。

X线透视下，常见到右侧横膈抬高，表面不整齐以及运动障碍等现象。

B型超声检查肝脓肿病人肝区探查可见蜂窝状结构，回声较低，液化处出现无回声区，如行肝穿刺获得典型的脓液。

D.1.4败血症 

弛张热、畏寒、出汗、全身关节酸痛、毒血症和白细胞总数及中性粒细胞增高等为其特征。

皮肤粘膜常有出血点。

多伴有皮下脓肿、肺炎、胸膜炎、胆道及泌尿道感染等感染性疾病。

血细菌培养常可出现阳性。

D.1.5粟粒型肺结核 

发热多为弛张热，白细胞总数近正常，中性粒细胞有时偏高。

肺部X线摄片可协助诊断。

D.1.6钩端螺旋体病 

潜伏期较短，一般为8d～12d，病程亦短，一般为1周～2周；

临床表现多为“流感伤寒型”，病人先有寒战，继而发热，并有头痛、眼结膜充血、怕光及全身肌肉疼痛等；

肌肉疼痛尤以腰、颈及腓肠肌痛为明显；

白细胞总数升高，以中性粒细胞为主，占0.80～0.90。

在发病第1周的血液和第2周的尿内，可找到钩端螺旋体，血培养可分离出病原体。

发病2周以后，病人血清中出现抗体，凝集试验或补体结合试验可呈阳性。

D.2慢性血吸虫病的鉴别诊断

慢性痢疾或肠炎粪便培养可获致病菌或阿米巴原虫。

肠结核多继发于肺或其他部位的结核病，常伴有发热等毒性症状，胃肠道钡餐或内镜检查均有助于明确诊断。

慢性病毒性肝炎病人大多有食欲减退、肝区胀痛、腹胀、乏力等表现，转氨酶常反复增高。

乙型肝炎抗原、抗体检测有助于鉴别。

D.3晚期血吸虫病的鉴别诊断

D.3.1结节性肝硬化多由病毒性肝炎引起。

肝细胞损害较明显，临床上乏力、食欲减退、腹胀、黄疸、蜘蛛痣、肝掌及男性乳房肿大等较为多见。

肝脏表面有时可扪及较粗大的结节，后期肝脏常萎缩而难以触及。

脾脏肿大不明显。

肝功能损害显著，血清丙氨酸转氨酶常增高。

乙型肝炎表面抗原（HBsAg）及核心抗体（抗HBc）测定可呈阳性，病程进展快，预后较差。

但应注意晚期血吸虫病可并存乙型肝炎病毒（HBV）感染，表现为以肝炎后肝硬化为主的混合性肝硬化。

D.3.2原发性肝癌 

病程进展迅速，常有发热、体重显著减轻，肝区持续疼痛，肝呈进行性肿大，质地坚硬，表面凸凹不平，可出现迅速加深的黄疸和急剧增加的腹水，腹水呈草黄色或学性。

血清碱性磷酸酶增高，甲胎蛋白（AFP）阳性。

肝脏B超检查、放射性核素扫描和电子计算机X线体层摄影（CT）显示占位性病变。

D.3.3疟疾 

一些疟疾病人脾脏可明显肿大，但疟疾病人有反复发作的疟疾病史，血涂片检查可找到疟原虫，抗疟疾治疗效果好。

D.3.4结核性腹膜炎 

无门脉高压症，常有发热及肺部原发结核病灶，腹水量少或中等，为渗出液，少数呈血性。

D.3.5慢性粒细胞性白血病 

脾脏明显肿大，可达巨脾程度，常伴有低热，血液检查周围血液中白细胞数显著增多，并有幼稚白细胞，骨髓检查有助诊断。