沉淀反应实验报告.doc

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实验蛋白质的沉淀反应与颜色反应

一、实验目的

掌握鉴定蛋白质的原理和方法。

熟悉蛋白质的沉淀反应，进一步熟悉蛋白质的有关反应。

二、实验原理

蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用，产生颜色。

不同的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦不完全相同。

颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质也可产生同样的颜色反应，因此不能根据颜色反应的结果来决定被测物是否为蛋白质。

另外，颜色反应也可作为一些常用蛋白质定量测定的依据。

蛋白质是亲水性胶体，在溶液中的稳定性与质点大小、电荷、水化作用有关，但其稳定性是有条件的，相对的。

如果条件发生了变化，破坏了蛋白质的稳定性，蛋白质就会从溶液中沉淀出来。

三、实验仪器

1、吸管2、滴管3、试管4、电炉5、ph试纸6、水浴锅7、移液管

四、实验试剂

1、卵清蛋白液：

鸡蛋清用蒸馏水稀释10-20倍，3-4层纱布过滤，滤液放在冰箱里冷藏备用。

2、0.5%苯酚：

1g苯酚加蒸馏水稀释至200ml。

3、millon’s试剂：

40g汞溶于60ml浓硝酸（水浴加温助溶）溶解后，冷却，加二倍体积的蒸馏水，混匀，取上清夜备用。

此试剂可长期保存。

4、尿素晶体

5、1%cuso：

1gcuso晶体溶于蒸馏水，稀释至100ml44

6、10%naoh：

10gnaoh溶于蒸馏水，稀释至100ml

7、浓硝酸

8、0.1%茚三酮溶液：

0.1g茚三酮溶于95%的乙醇并稀释至100ml.

9、冰醋酸

10、浓硫酸

11、饱和硫酸铵溶液：

100ml蒸馏水中加硫酸铵至饱和。

12、硫酸铵晶体：

用研钵研成碎末。

13、95%乙醇。

14、醋酸铅溶液：

1g醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至100ml

15、氯化钠晶体

16、10%三氯乙酸溶液：

10g三氯乙酸溶于蒸馏水中并稀释至100ml

17、饱和苦味酸溶液：

100ml蒸馏水中加苦味酸至饱和。

18、1%醋酸溶液。

五、实验步骤

蛋白质的颜色反应

（一）米伦（millon’s）反应

1、苯酚实验：

取0.5%苯酚溶液1ml于试管中，加millon’s试剂0.5ml，电炉小心加热观察颜色变化。

2、蛋白质实验：

取2ml蛋白液，加millon’s试剂0.5ml，出现白色的蛋白质沉淀，小心加热，观察现象。

（二）双缩脲反应

1、取少量尿素晶体放在干燥的试管中，微火加热熔化，至重新结晶时冷却。

然后加10%naoh溶液1ml，摇匀，再加2-4滴1%cuso4溶液，混匀，观察现象。

2、取蛋白液1ml，加10%naoh溶液1ml，摇匀，再加2-4滴1%cuso4溶液，混匀，观察现象。

（三）黄色反应

取一支试管，加入1ml蛋白液及浓硝酸5滴。

加热，冷却后注意颜色变化。

然后再加入10%naoh溶液1ml，观察颜色有什么变化。

（四）茚三酮反应

取蛋白液1ml于试管中，加4-8滴茚三酮溶液，加热至沸，即有蓝紫色出现。

蛋白质的沉淀

（一）蛋白质的盐析作用

1、试管中加蒸馏水3ml，加固体硫酸铵至饱和。

另一支试管加蛋白液2ml，再加入饱和硫酸铵溶液2ml，摇匀静置观察现象。

2、将上述混合液过滤。

向滤液中逐渐加入少量固体硫酸铵，直至饱和为止，此时析出为清蛋白。

再加入少量蒸馏水，观察沉淀是否溶解。

（二）有机溶剂沉淀蛋白质

试管中加蛋白液1ml，加晶体氯化钠少许，溶解后加95%乙醇3ml,摇匀，观察现象。

（三）重金属盐与某些有机酸沉淀蛋白质

1、取试管2支，各加蛋白液2ml，一支管中滴加1%醋酸铅溶液，另一支管中滴加1%硫酸铜溶液，至有沉淀产生。

2、取一支试管加蛋白液2ml，再加入10%三氯乙酸1ml，充分混匀，观察结果。

（四）生物碱试剂沉淀蛋白质

取一支试管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加饱和苦味酸数滴，观察现象。

六、实验结果

蛋白质的颜色反应

（一）米伦（millon’s）反应

1、苯酚实验：

溶液即出现玫瑰红色。

2、蛋白质实验：

出现白色的蛋白质沉淀，小心加热后凝固的蛋白质出现红色。

（二）双缩脲反应

1、有紫色出现。

2、溶液有蓝紫色出现

（三）黄色反应

先有黄色沉淀生成，加入10%naoh溶液1ml后颜色变为橘黄色。

（四）茚三酮反应

有蓝紫色出现。

蛋白质的沉淀

（一）蛋白质的盐析作用

1、有蛋白析出。

2、有蛋白质析出，加水后可复溶。

（六）有机溶剂沉淀蛋白质

取一试管加蛋白液1ml，，加入晶体氯化钠少许，待溶解后再加95%乙醇3ml,摇匀，观察现象

（七）重金属盐与某些有机酸沉淀蛋白质

取试管2支，各加蛋白液2ml，一支管中滴加1%醋酸铅溶液，另一支管中滴加1%硫酸铜溶液，至有沉淀产生。

（八）生物碱试剂沉淀蛋白质

取一支试管，加入蛋白液2ml及醋酸4-5滴，再加饱和苦味酸和鞣酸数滴，观察现象。

七、实验分析

蛋白质分子中某种或某些集团可与显色剂作用，产生颜色。

不同的蛋白质由于所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦不完全相同。

篇二：

自由沉淀实验报告

六、实验数据记录与整理

1、实验数据记录

沉降柱直径水样来源柱高

静置沉淀时间/min

表面皿表面皿编号质量/g

表面皿

和悬浮物总质量/g

水样中悬浮物质量/g

水样体积/ml

悬浮物沉降柱浓度/工作水（g/ml）深/mm

颗粒沉沉淀效

速/率/％（mm/s）

残余颗

粒百分比/％

0510203060120

0123456

79.043880.74121.697481.760383.20751.447264.189065.49721.308266.116267.32861.212473.789574.93851.149083.478284.62901.150875.033276.15731.1241

31.030.030.030.030.031.031.0

0.05480.04820.04360.04040.03830.03710.0363

846.0808.0780.0724.0664.0500.0361.0

1.8600.8830.3950.2300.0690.021

11.4020.4426.2830.1132.3033.76

10087.9679.5673.7269.8967.7066.24

2、实验数据整理

（2）绘制沉淀曲线：

e-t、e-u、ui~pi曲线如下：

2-1、绘制去除率与沉淀时间的曲线如下：

图2.2：

沉淀时间t与沉淀效率e的关系曲线

2-2、绘制去除率与沉淀速度的曲线如下：

图2.2：

颗粒沉速u与沉淀效率e的关系曲线

2-3、绘制去除率与沉淀速度的曲线如下：

（1）选择t=60min时刻：

（大家注意哦！

这部分手写的，不要直接打印！

）水样中悬浮物质量=表面皿和悬浮物总质量-表面皿质量,如表格所示。

原水悬浮物的浓度：

c0?

水样中悬浮物质量1.6974

?

?

0.0548g/ml

水样体积31.0

悬浮物的浓度：

c5?

水样中悬浮物质量1.1508

?

?

0.0371g/ml

水样体积31.0

沉淀速率：

u?

h?

10（500-250）?

?

0.069mm/s

ti?

6060?

60

c0-c50.0548-0.0371

?

100%?

?

100%?

32.30c00.0548

c50.0371

?

100%?

?

100%?

67.70c00.0548

沉淀效率:

e5?

残余颗粒百分比p5?

篇三：

混凝沉淀实验报告

实验名称：

混凝沉淀实验

一、实验目的

1、通过实验观察混凝现象、加深对混凝沉淀理论的理解；

2、掌握确定最佳投药量的方法，选择和确定最佳混凝工艺条件；

3、了解影响混凝条件的相关因数。

二、实验原理

1.混凝作用原理包括三部分：

1）压缩双电层作用；2）吸附架桥作用；3）网捕作用。

这三种混凝机理在水处理过程中不是各自孤立的现象，而往往是同时存在的，只不过随不同的药剂种类、投加量和水质条件而发挥作用程度不同，以某一种作用机理为主。

对高分子混凝剂来说，主要以吸附架桥机理为主。

而无机的金属盐混凝剂则三种作用同时存在。

胶体表面的电荷值常用电动电位ξ表示，又称为zeta电位。

一般天然水中的胶体颗粒的zeta电位约在-30mv以上，投加混凝剂之后，只要该电位降到-15mv左右即可得到较好的混凝效果。

相反，当电位降到零，往往不是最佳混凝状态。

因为水中的胶体颗粒主要是带负电的粘土颗粒。

胶体间存在着静电斥力，胶粒的布朗运动，胶粒表面的水化作用，使胶粒具有分散稳定性，三者中以静电斥力影响最大，若向水中投加混凝剂能提供大量的正离子，能加速胶体的凝结和沉降。

2.混凝剂向水中投加的能使水中胶体颗粒脱稳的高价电解质，称之为“混凝剂”。

混凝剂可分为无机盐混凝剂和高分子混凝剂。

水处理中常用的混凝剂有：

三氯化铁、硫酸铝、聚合氯化铝（简称pac）、聚丙烯酰胺等。

本实验使用pac，它是介于alcl3和al（oh）3之间的一种水溶性无机高分子聚合物，化学通式为[al2（oh）ncl（6-n）]m其中m代表聚合程度，n表示pac产品的中性程度。

3.投药量单位体积水中投加的混凝剂量称为“投药量”，单位为mg/l。

混凝剂的投加量除与混凝剂品种有关外，还与原水的水质有关。

当投加的混凝剂量过小时，高价电解质对胶体颗粒的电荷斥力改变不大，胶体难以脱稳，混凝效果不明显；当投加的混凝剂量过大时，则高价反离子过多，胶体颗粒会吸附过多的反离子而使胶体改变电性，从而使胶体粒子重新稳定。

因此混凝剂的投加量有一个最佳值，其大小需要通过试验确定。

4.影响混凝作用的因素投药量、水中胶体颗粒的浓度、水温、水的ph值等。

5.浊度仪浊度是表现水中悬浮物对光线透过时所发生的阻碍程度。

水中含有泥土、粉尘、微细有机物、浮游动物和其他微生物等悬浮物和胶体物都可使水中呈现浊度。

浊度仪采用90°散射光原理。

由光源发出的平行光束通过溶液时，一部分被吸收和散射，另一部分透过溶液。

与入射光成90

°方向的散射光强

度符合雷莱公式，在入射光恒定条件下，在一定浊度范围内，散射光强度与溶液的混浊度成正比。

因此，我们可以通过测量水样中微粒的散射光强度来测量水样的浊度。

三、实验仪器和试剂

1.仪器

（1）浊度仪一台（sgz-2数显浊度仪，上海悦丰仪器仪表有限公司）

（2）混凝试验搅拌仪（my3000-6普通型混凝试验搅拌仪，潜江梅宁仪器有限公司）

（3）电子天平（赛多利斯科学仪器，北京有限公司）

（4）沉淀桶（600ml烧杯）6个；（5）100ml取样瓶6个；（6）乳胶管或塑料软管（直径5~8mm）15~20cm；（7）100ml烧杯1个；（8）100ml量筒1个；

（9）500ml量筒1个；（10）10ml量筒1个；

2.实验试剂

混凝剂：

聚合氯化铝pac；原水（制备工作已由实验员完成）；自来水

四、实验步骤

1）制备原水：

事先用高岭土配制浊度为50ntu左右的浑水，静沉1天以上，取上清液备用。

（已由

实验员完成）

2）用电子天平称取混凝剂（pac）3g溶于1l自来水中，浓度为3g/l。

3）取600ml原水倒入与搅拌仪配套的沉淀桶中。

共六个沉淀桶。

4）根据原水体积，按照投加量80、120、160、200、300、400mg/l计算加药量，并换算成混凝剂溶

液的体积量。

换算后，混凝剂溶液的体积分别为：

16、24、32、40、60、80ml。

5）设置搅拌仪程序：

（1）转速400转/分，搅拌1.5min；（2