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某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物,以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。

实验步骤如下:

①配置培养基(成分:

牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);

②制作无菌平板;

③设置空白对照组和若干实验组,进行相关操作;

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间,统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题:

(1)该培养基中微生物所需的氮来源于_________________。

若要完成步骤②,该培养基中的成分X通常是_________________。

(2)步骤③中,实验组的操作是_________________。

(3)若在某次调查中,某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,这种结果说明在此次调查中出现了_________________现象。

若将30(即36-6)个/平板作为本组菌落数的平均值,该做法_______________(填“正确”或“不正确”)。

(1)牛肉膏、蛋白胨琼脂

(2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间

(3)污染 

 

不正确

[2009宁夏卷 

(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑__________、__________和渗透压等条件。

由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、__________、__________等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。

(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行__________(消毒、灭菌);

操作者的双手需要进行清洗和__________;

静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能__________。

(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的__________。

(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的_____________。

(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。

对于固体培养基应采用的检测方法是__________。

(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过__________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

(1)温度 

酸碱度 

易培养 

生活周期短 

(2)灭菌 

消毒 

损伤DNA的结构 

(3)比例合适 

(4)鉴定(或分类) 

(5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生. 

(6)灭菌

[2013全国一卷 

回答下列有关泡菜制作的问题 

(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是__________,为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的作用是__________。

(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行__________的过程。

该过程发生在乳酸菌细胞的__________中。

(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有__________、__________和__________等。

(4)从开始制作到泡菜品质昂佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸。

这段时闻内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是__________,原因是______________________________。

(1)杀灭杂菌 

增加乳酸菌的数量 

(2)无氧呼吸 

细胞质 

(3)温度 

腌制时间 

食盐用量 

(4)乳酸菌数量增加,杂菌数量减少 

乳酸菌比杂菌更为耐酸 

[2013宁夏卷生物——选修l:

临床试用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。

实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

回答下列问题:

(1) 

为了从样本中获取致病菌菌落,可用__________法或__________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。

(2) 

取该单菌落适当稀释,用__________法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。

(3) 

为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A,B,C,D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A__________;

含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B__________;

含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明__________;

含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的__________。

(4) 

根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选择抗生素__________。

(1)划线 

稀释涂布(或涂布) 

(2)涂布 

(3)敏感 

不敏感 

该致病菌对C的敏感性比对A弱 

耐药菌 

(4)A

[2013山东卷 

胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得,流程如下:

(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时,可选用____________________或平板划线法接种。

采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是_________________________。

(2)培养酵母菌R时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供__________和__________。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和__________以防止胡萝卜素分解;

萃取过程中宜采用__________方式加热以防止温度过高;

萃取液浓缩前需进行过滤。

其目的是______________________________。

(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。

鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为___________。

(1)稀释涂布平板法 

灭菌(防止杂菌污染) 

(2)碳源 

氮源 

(3)时间 

水浴 

滤去不溶物(4)(实验)对照

[2009广东卷 

生物技术实践](10分)

材料:

饲料原料中的磷元素有相当一部分存在于植酸中,猪、禽等动物由于缺乏有关酶,无法有效利用植酸,造成磷源浪费,而且植酸随粪便排除后易造成环境有机磷污染。

植酸酶能催化植酸水解成肌醇和磷酸,因此成为目前重要的饲料添加剂之一。

(1)商品化植酸酶主要来自微生物。

在产酶菌株筛选过程中,常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板,植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生______________________________,可根据其大小选择目的菌株,所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。

活性测定可以植酸钠作为底物,活性可用一定条件下单位时间________________________________________表示。

(2)利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图:

发酵液含酶的发酵液

菌体去除透析液(Ⅰ)去除

Ⅰ中的主要成分为__________;

Ⅱ中包含植酸酶等多种蛋白质。

请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

(3)为建设基因工程菌,可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。

PCR反应包含多次循环,每次循环包括三步:

____________________。

反应过程中打开模板DNA双链的方法是____________________。

(4)植酸酶外,微生物还能应用在哪些酶的生产中?

(至少写两种)

(1)透明圈植酸钠的消耗量(减少量)或磷酸(肌醇)的生成量

(2)小分子杂质凝胶色谱法:

根据蛋白质之间的分子大小、吸附性质等差异进行纯化(或电泳法:

根据蛋白质之间的电荷、分子大小等差异进行纯化)

(3)变性、复性和延伸(长)加热(或高温处理)

(4)蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶

回答下列有关泡菜制作的问题:

(1)制作泡菜时,所用盐水需煮沸,其目的是__________。

为了缩短制作时间,有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液,加入陈泡菜液的目的是____________________。

(2)泡菜制作过程中,乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行__________的过程。

(3)泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有____________________、____________________和____________________等。

(4)从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内,泡菜液逐渐变酸,这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________________,原因是_______________________。

(1)杀灭杂菌增加乳酸菌数量

(2)无氧呼吸细胞质(3)温度腌制时间食言用量(4)乳酸菌数量增多,杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸

[2011新课标全国卷 

有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

回答问题:

(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于___________培养基。

(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即__________和__________。

(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力__________。

(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______________和_______________。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯__________附近。

【答案】

(1)原油 

选择

(2)平板划线法 

稀释涂布平板法

(3)强(4)干热灭菌法 

高压蒸汽灭菌法 

火焰

[2012全国新课标 

为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,其研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。

培养基编号

浓度/mg·

L-1

m/%

n/个

6-BA

IAA

1

0.5

76.7

3.1

2

0.1

77.4

6.1

3

0.2

66.7

5.3

4

60.0

5.0

回答下列问题

(1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为__________和__________两类。

上述培养基中,6-BA属于__________类生长调节剂。

(2)在该实验中,自变量是__________,因变量是____________________,自变量的取值范围是______________________________。

(3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是__________号培养基。

(4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入________(填“6-BA”或“IAA”)。

(1)大量元素微量元素细胞分裂素

(2)1AA浓度再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体的丛芽平均数(n)0~0.5mg·

(3)1(4)6-BA

[2013新课标全国卷Ⅱ 

临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。

实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用__________法或__________法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。

(2)取该单菌落适当稀释,用__________法接种于固体培养基表面,在37℃培养箱中培养24h,使其均匀生长,布满平板。

(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A____________________;

含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B____________________;

含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明____________________;

含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的____________________。

(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素_______。

(1)划线稀释涂布(或涂布)

(2)涂布(3)敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌(4)A

[2015新课标全国卷Ⅱ 

回答与胡萝卜素有关的问题:

(1)胡梦卜含有的胡萝卜素中,最主要的是__________(填“α-胡萝卜素”、“β-胡萝卜素”或“γ-胡萝卜素”),该胡萝卜亲在人体内可以转变成两分子弱光下视物不清的病症,该疾病称为__________,胡萝卜素是__________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。

(2)工业生产上,用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时,__________(填“需要”或“不需要”)将鲜活的盐藻干燥。

(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂,应选用其中的__________作为胡萝卜素的萃取剂,不选用另外一种的理由是____________________。

(1)β-胡萝卜素维生素A夜盲症非挥发性

(2)需要

(3)乙酸乙酯萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶,而乙醇为水溶性有机溶剂

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