芒果叶多酚的提取Word格式文档下载.docx
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B液：
称取110°
C烘干2h的磷酸二氢钾9.07g，烧杯中溶解，转移至1000ml容量瓶中，加蒸馏水定容取上述A液85ml、B液15ml混合均匀。
3.1.3标准曲线的绘制
称取0.2000g焦性没食子酸标准样品，移入100mL容量瓶中，加50%乙醇溶液定容至100mL，得2mg/mL焦性没食子酸储备液。
分别吸取焦性没食子酸储备液0mL、1mL、、2mL、3mL、4mL、5mL、6mL、7mL、8mL、9mL、10mL、11mL、12mL，移入50mL容量瓶中，加50%乙醇溶液定容至50mL。
取1mL移入25mL比色管中，加4mL水和5mL酒石酸亚铁溶液，加pH值7.5的KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液定容至25mL，室温静置5min,用1cm玻璃比色皿于540nm处测定吸光度，绘制标准曲线。
表1标准曲线绘制数据
浓度（mg/ml）
0.04
0.08
0.12
0.16
0.20
0.24
0.28
0.32
0.36
0.40
0.44
0.48
吸光度
0.026
0.048
0.075
0.096
0.125
0.153
0.178
0.205
0.226
0.256
0.281
0.312
以吸光度为纵坐标，标准液浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线：
图1焦性没食子酸标准曲线
3.2单因素实验[5-14]
称取芒果叶粉末1.00g于150mL锥形瓶中，加入一定量的乙醇溶解，经超声波处理后水浴浸提一段时间，固液离心分离，得测定样液。
准确吸取1mL测定样液，加乙醇稀释到25mL，再吸取1mL于25mL具塞比色管中，再加入4mL水和5mL酒石酸亚铁溶液，加pH值7.5KH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液定容。
采用比色法，以焦性没食子酸为标准液，以试剂空白作对照，于540nm波长处测定吸光度，以焦性没食子酸的相当值表示。
根据标准曲线，计算出芒果叶样品中的总多酚含量。
3.2.1乙醇浓度选择实验（浸提30min、料液比1：
20、超声时间15min、超声功率240W）
表2乙醇浓度选择实验
乙醇浓度
多酚提取率（mg/g）
样品质量（g）
10%
30.8480
0.157
1.0029
30%
48.3746
0.248
1.0013
50%
43.5389
0.254
1.0030
70%
46.1807
0.236
1.0015
90%
46.8641
0.246
1.0069
图2乙醇浓度选择实验
3.2.2料液比选择实验（浸提30min、超声时间15min、超声功率240W、乙醇浓度50%）
表3料液比选择实验
料液比
1：
10
37.7687
0.192
1.0003
15
45.3558
0.232
1.0021
20
53.3560
0.275
1.0064
25
48.5801
0.249
1.0027
30
40.2940
0.207
1.0090
图3料液比选择实验
3.2.3超声功率选择实验（浸提30min、超声时间15min、乙醇浓度50%、料液比1：
20）
表4超声功率选择实验
超声功率（W）
80
50.1963
0.258
1.0048
160
51.4541
0.264
1.0026
240
320
51.8983
0.268
1.0088
400
48.8737
0.250
1.0006
图4超声功率选择实验
3.2.4超声时间选择实验（浸提时间30min、乙醇浓度50%、料液比1：
20、超声功率240W）
表5超声时间选择实验
超声时间（min）
5
46.5214
0.240
1.0076
50.3832
0.259
50.7548
0.260
1.0036
51.5628
52.1614
0.271
1.0005
51.1477
0.266
1.0020
图5超声时间选择实验
3.2.4乙醇PH选择实验（浸提时间30min、乙醇浓度40%、料液比1：
23、超声功率240w、超声时间28min）
表6乙醇pH选择实验
乙醇pH
吸光度
3.01
54.2131
0.278
1.0011
4.02
53.8870
0.277
5.01
55.2081
0.284
1.0039
5.98
56.2646
0.290
1.0055
7.02
55.1321
1.0053
7.99
54.1075
0.279
1.0066
图6乙醇PH选择实验
3.2.5浸提次数选择实验
表7浸提次数选择实验
浸提次数
1
52.7386
0.270
1.0010
2
49.9239
3
50.0154
0.257
1.0046
4
49.7475
0.255
1.0023
图7浸提次数选择实验
3.3正交实验
选择L9（34）正交表，即4因素3水平9次实验正交试验
表8正交试验数据安排表
因素
乙醇浓度（%）
超声功率（w）
40
17
200
22
50
60
23
280
28
表9正交实验结果及数据处理
实验号
多酚含量（mg/g）
1（40）
1（1：
17）
1（200）
1（22）
50.0104
2（1：
2（240）
2（25）
58.2768
3（1：
23）
3（280）
3（28）
60.3480
2（50）
49.3543
52.5258
6
54.5156
7
3（60）
49.4685
8
54.1428
9
54.9890
K1
168.6352
148.8332
158.6688
157.5252
K2
156.3957
164.9454
162.6201
162.2609
K3
158.6003
169.8526
162.3423
163.8451
k1
56.2117
49.6111
52.8896
52.5084
k2
52.1319
54.9818
54.2067
54.0870
k3
52.8668
56.6175
54.1141
54.6150
优水平
A1
B3
C2
D3
R
4.0798
7.0064
1.3171
2.1066
主次顺序
DBAC
影响因素
乙醇浓度>
时间>
温度>
最优水平
A2B2C3D2
正交试验数据显示最佳提取条件为乙醇浓度40%、料液比1：
23、超声功率240w、超声时间28min,乙醇pH=6。
在此条件下对芒果叶多酚提取，优水平下测的总多酚含量为65.6534mg/g本实验在以上的研究前提下，运用超声波细胞粉碎技术提取芒果叶多酚蒸发浓缩提取液，提取多酚类物质，最后以固态形式提取，计算产量。
4实验设备
BILON88-II型超声波细胞粉碎机101-1A型数显电热鼓风干燥箱上皿电子天平800台式离心机pH计；
移液管吸量管容量瓶离心管蒸发皿烧杯药匙等
5实验材料及试剂
材料：
芒果叶（采自韩山师范学院东丽B区）
试剂：
无水乙醇（用于配置40%的乙醇溶液）、蒸馏水
a、试剂的配置：
配置40%乙醇溶液
b、材料的处理：
将采回的芒果叶样品洗净后用蒸馏水润洗、晾干后于干燥箱中以60℃烘干后将其研磨成粉，装入磨口瓶置于干燥器中备用。
6实验操作步骤：
配置40%乙醇溶液，调节溶液pH=6。
称取芒果叶粉5.00g于250ml锥形瓶中，在已知最优料液比为1：
23的条件下，在锥形瓶中加入110ml40%的乙醇溶液，用保鲜膜将锥形瓶口封住，用橡皮筋固定保鲜膜，浸泡30min备用。
在保鲜膜上扎一小口，将锥形瓶放入超声波细胞粉碎机中，调节仪器功率240w，超声时间28min.。
将超声后的溶混合液倒入离心管，在转速为3000r/min的条件下离心10min，取出上清液，进行转速为3000r/min二次离心10min。
收集离心后上清液，测量体积并记录。
然后进行旋转蒸发操作，浓缩上清液。
旋转蒸发操作至粘稠状，将其转移至蒸发皿中。
将蒸发皿放入数显电热鼓风干燥箱，60℃条件下烘干，至最后提取物呈固体状态后取出，干燥器中冷却至室温。
电子天平中称量，计算产量及产率。
回收提取物。
7结果及计算
将产品置于电子天平中称量，计算产品质量m。
在正交实验得出的最佳提取条件下，理论提取多酚值为65.6534mg/g，则芒果叶多酚提取率为：
（m/65.6534）*100%
8注意事项
⑴乙醇溶液pH的调节范围为：
5.98-6.02
⑵超声波细胞粉碎机刚开始工作时，功率不稳定，故需要在超声刚开始时进行人为控制调节，待功率稳定后便可，此过程约10min。
⑶离心时离心管中不可盛放过多提取液，以免在离心时提取液溅出，降低提取率。
⑷超声过程中液体温度有所上升，在离心时需待提取液冷却至室温，以免离心管破裂，造成实验失败。
⑸提取物的冷却要在干燥器中进行。
9费用预算
无水乙醇12*2=24元
多酚标准品20mg100元
10芒果叶多酚研究展望
10.1回收利用
我国已发现300余种多酚含量高的植物[15]，主要分布在温带、亚热带和热带地区，而芒果叶就是属于这其中的一种，但是由于体制的不完善，提取工艺的落后等原因，这些宝贵的资源并没有得到充分的利用，而是随着人们的不合理利用被浪费掉，同时对环境造成不利的影响，因此从环保角度和资源的可持续发展考虑，对于芒果叶这种通常被废弃的富含多酚的物质必须充分回收利用。
10.2精细化生产
芒果叶等植物多酚通常是一个成分复杂的混合物，其研究和应用要求不同结构特征，不同分子量范围的植物多酚应有不同的适用领域。
传统的植物多酚生产方法特别是工业化生产把多酚甚至很多非多酚的物质一起提取出来，作为一个整体利用，而且为了提高得率，采用的浸提条件较强，对多酚的破坏较多，对多酚的利用不利。
因此这并不适合植物多酚的精细化利用，为达到对多酚的精细化利用的目的，需要对植物多酚的提取、分离方法做较大的改进。
特别是要找到适合于工业生产的提取分离方法，从而更加有选择性、有针对性地利用植物多酚的各种组分。
本文通过超声波法辅助提取芒果叶多酚，不仅为芒果叶多酚产品的开发提供了一定的参考价值，还为芒果叶多酚的深加工和综合利用打下基础，促进其在药理、临床、食品等方面的研究。
参考文献
[1]华景清,蔡健.仙人掌芒果营养保健果酱的研制[J].食品科技,2004（8）:
29
[2]柳书倩.芒果营养有几何[J].中华合作时报,2002.5.31（002）
[3]张赟彬,缪存铅.甘薯渣中多酚类物质的提取工艺研究[J].粮油加工,2007（9）:
115
[4]程慧青,肖荔人,陈庆华.微波法提取茶多酚及茶多酚镧配合物的研究[J].福建师范大学学报（自然科学版）,2007,（01）:
105-108
[5]汪兴平,周志,莫开菊等.微波对茶多酚浸出及其结构和组成的影响研究[J].农业工程学报,2002,（02）:
110-114.
[6]程慧青,肖荔人,陈庆华.微波法提取茶多酚及茶多酚镧配合物的研究[J].福建师范大学学报（自然科学版）,2007,（01）:
[7]程慧青,肖荔人,林云珠等.微波法提取茶多酚工艺优化实验[J].福建农业科技,2006,（02）:
51-53
[8]汪兴平,周志,莫开菊等.微波对茶多酚浸出及其结构和组成的影响研究[J].农业工程学报,2002,（02）:
19-21
[9]荆琪,邓宇.微波法从茶叶中提取茶多酚[J].中国食品添加剂,2003,（01）:
25-30
[10]姚永志,左锦静,王子涵.乙醇提取花生红衣多酚物质的研究[J].中国油脂,2007,（03）:
15-35
[11]何春雷,罗学平,张路等.从热溶性绿茶粉中提取茶多酚的试验研究[J].食品科技,2006,（12）:
87-90
[12]王海燕,崔春,赵谋明等.烟草多酚提取工艺优化及成分定性分析[J].华南理工大学学报（自然科学版）,2008,（03）:
65-68
[13]肖香,王洪新.迷迭香抗氧化剂的提取工艺研究[J].河南工业大学学报（自然科学版）,2006,（02）:
54-59
[14]罗金岳,程康华,刘经诚等.淡竹叶中茶多酚的微波辅助提取[J].南京林业大学学报（自然科学版）,2005,（04）:
29-32
[15]南京林产工业学院.栲胶生产工艺学[M].北京:
中国林业出版社,1983.281
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