非法添加物的监控和检测131730文档格式.docx

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（2）以非药品冒充药品或者以他种药品冒充此种药品的。

有以下情形之一的药品，按假药论处：

1国务院药品监视管理部门规定制止使用的；

2按照本法必须批准而未经批准消费、进口，或按照本法必须检验而未经检验即销售的；

3变质的；

4被污染的；

5使用按照本法必须获得批准文号而未获得批准文号的原料药消费的

6所说明的适应症或者主治功能超出规定范围的。

显然，药物中非法添加成分而产生“药物〞属于假药范畴。

B、保健食品中添加的药物那么是非法添加物的另外一种常见情况。

二、非法添加物检测的重要性

在我国，无论是药物还是保健食品，均应按国家药监局批准的消费工艺消费，并采用与此工艺相应的质量标准进展消费、流通过程中的质量监控。

这就意味着消费出来的药物或保健品成清楚晰、物质的含量稳定。

而非法添加者的本意是打着药物或保健品的幌子，非法敛财。

因此，由此指导思想消费出的“药或保健品〞就必然带有添加物质不明、添加量的不确定的特性。

这种“商品〞一旦销售，就可能因使用者不知情而错用、滥用，从而带来的安康危害甚至生命危险，引发严重的社会问题。

实例1：

假“糖脂宁胶囊〞假药事件。

2021年初，新疆喀什地区两名糖尿病患者在服用标识为广西平南制药厂消费的“糖脂宁胶囊〞〔国药准字B20020219，批号081101〕之后，出现疑似低血糖并发症死亡。

广西壮族自治区食品药品监视管理局迅速赶赴制药企业现场核查。

“糖脂宁胶囊〞为2005年1月份广西平南制药厂正式投产的一种用匙羹藤液中提取的匙羹素GA入药的新药，每年消费的量不大。

经对广西平南制药厂现场初步核查，药监部门未发现该厂消费批号为081101的糖脂宁胶囊，同时将该厂2021年消费的糖脂宁胶囊现场留样抽样，送自治区食品药品检验所检验，也未检出格列本脲、格列吡嗪、苯乙双胍及二甲双胍等降糖化学成分。

进一步，对药品外包装进展真伪核比照拟，认定致人死亡的批号为081101的“糖脂宁胶囊〞为假冒消费厂家、批准文号、检验报告书的产品，是在中药里参加了西药格列苯脲。

“格列苯脲〞别名“优降糖〞，本身也是一种降糖药，降糖快而持久，但是它的使用有严格的限量，一天最高不能超过15毫克，大剂量服用“格列苯脲〞会出现低血糖甚至危及生命。

而假“糖脂宁胶囊〞假药所含格列本脲的量上下差异很大，最高达12.3mg/粒。

最为严重的是，假药糖脂宁胶囊网站上，产品手册明确说明的使用日服用剂量是：

每天3次，每次2~3粒。

正是这样的剂量，导致了新疆地区两名患者失去了珍贵的生命。

实例2：

含化学药物的保健品。

枸橼酸西地那非的主要成效是治疗男性性功能障碍。

因其对并发心血管系统疾病和糖尿病患者有严重不良反响，所以国家药监局出台了对于?

枸橼酸西地那非管理暂行规定?

的通知，要求该药必须在医生的指导下使用,不得在药店零售。

只有县级以上医院心血管科、内分泌科和男性科具有主任医师及其以上专业技术职务任职资格并经执业注册的医师，方可开具该药处方。

但由于枸橼酸西地那非的特殊用途和高额利润,加之其合成道路早已不是机密,因此,一些地下工厂和不法分子,为牟取暴利,非法添加、销售其原料和制剂,并改头换面,大多以保健食品作招牌,堂而皇之登堂入室，摆上了零售柜台。

2005年浙江省某县药监局在专项检查时发现：

有一种名为“美国三鞭粒〞的保健品，标示的批准文号为“藏卫食准字〔2004〕第012号〞，而消费厂家为“香港太和堂生物工程〞，标示的主要成份中有“美国原装viger〞。

检查人员当即进展检验，结果发现该产品中参加了“枸橼酸西地那非〞。

由于在保健品中擅自添加西药成分，其毒副作用无法意料，故国家明令制止。

由上述典型事件的介绍可见，对非法添加物的检测并非看看其是否是“质量差些〞的小事，而是国家、社会高度关注的问题。

三、非法添加物的检测方法

经典化学法及其缺乏：

采用化学试剂，显色。

方法简单、本钱低廉、可用于现场粗筛，假阳性率高，且检测不灵敏。

快检方法如近红外法。

对于特定样本具有一定的准确性，适宜初筛。

但需先建立数学模型。

对于各种非法添加物，以下为常用检测方法，其中液相色谱-质谱联用法最为有效：

1、薄层色谱法〔TLC〕TLC法进展化合物的定性分析,样品用量小,提取时间短,简单、方便，但限于目的明确添加物、且共存成分不干扰的情况下分析。

由于中药或保健食品成分复杂,薄层色谱分析仅通过别离、显色,与“疑是化合物〞对照品比较Rf值及所显斑点颜色来判断是否含有特定的添加成分,很有可能出现假阳性。

因此作为一种初筛的方法。

对于有疑心的样品,经TLC方法初筛后,还应采用各种HPLC法、对照品比较方式进一步确实证。

2、高效液相色谱法〔HPLC〕HPLC法的优点是别离性能好。

假设采用二级管阵列检测器检测,比较别离得到的色谱峰与对照品色谱峰的保存时间及紫外光谱图,可一定程度明确保健食品或中药中是否含有与对照品一致的化学成分。

HPLC法因此不仅是药品检验中普遍使用的主要分析方法,也是中药或保健食品中涉嫌非法掺假的一个重要检测手段。

3、液相色谱-质谱联用法〔HPLC-MS〕HPLC-MS法将液相色谱的高效别离才能与质谱的强鉴别才能、高灵敏度相结合,可以同时得到化合物的保存时间、分子质量及特征构造碎片等信息,适用于复杂样本中化合物的分析，具有专属性强、灵敏度高的优点,已成为中药或保健食品中非法添加化合物识别和判断的不可或缺的方法和技术手段。

由于非法添加物质具有一定的未知性，而且被添加的中药或保健品自身就含有很多成分〔有些甚至是不明成分〕，因此给非法添加物的识别和断定带来了很大的困难。

一般来说,对于疑似样品,需要综合运用多种检测手段才能到达定性确凿的目的。

可先采用TLC方法进展初筛,再用HPLC方法做进一步确实定；

当确定存在疑问时，LC-MS/MS法将作为未知化合物构造判断的重要手段,通过对照品分析，以补充更多证据，最终综合分析试验结果，获得断定的结论。

四、非法添加物的检测实例

例一：

某降糖制剂中添加格列苯脲的检测。

TLC方法检测：

汲取供试品溶液、阴性对照液、格列本脲对照品溶液各5μL,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以氯仿-环己烷-乙醇-冰醋酸（8:

13:

1:

1）为展开剂,展开,取出,置紫外光灯（254nm）下检视,4批次中有2批次供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上显一样颜色的斑点。

HPLC进一步确定，色谱条件:

C18色谱柱（150mm×

4.6mm,5μm）,流动相:

甲醇-磷酸二氢铵溶液（65:

35）,检测波长274nm,流速1.00mL/min,柱温30℃。

结果见图2。

4批次中有2批次降糖胶囊供试品色谱中出现与对照品色谱峰相应保存时间一样的色谱峰。

中药制剂中通常含有多种中药,每种药材均含有多种组分,无论采用薄层色谱法或液相色谱法进展检测时,都可能因方法的选择性不强,干扰多等因素，出现假阳性、假阴性结果，导致误判。

采用液相色谱-质谱联用方法,对待测物中色谱峰进展一级质谱、二级质谱测定,并与对照品的相应信息相比较,假设两者的准分子离子峰和二级质谱裂解碎片一致,那么可确定此色谱峰对应化合物为为阳性化合物。

假设准分子离子峰和二级质谱裂解碎片和对照品的不一致,那么可推断该色谱峰是保存时间与可疑化合物一致的假阳性结果。

质谱/质谱技术是通过一级质谱获得准分子离子峰,再经二级质谱检测,可以对供试品进展构造确证,大大进步了检测的专属性。

采用液相色谱-质谱联用法对中药降糖制剂中非法掺入的格列苯脲的测定方法。

HPLC条件：

C18色谱柱（150mm×

4.6mm,5μm）,流动相A为乙腈;

流动相B为醋酸铵水溶液;

流动相C为甲醇;

流速:

0.4mL·

min-1,线性梯度洗脱（见表1）,柱温:

25℃;

进样量10μL。

质谱检测方式：

产物离子扫描方式。

得到的色谱图如下，

格列苯脲对照品质谱图如下：

样品质谱图如下，

例二：

中药中非法掺入枸橼酸西地那非。

TLC法：

以硅胶GF254为薄层板,用乙醇-正己烷-氨水（70：

30：

1）为展开剂,汲取供试品溶液和对照品溶液各点样5μL，用展开剂展开,晾干,254nm紫外灯下检视。

具有典型的阳性结果的某胶囊试剂结果如下:

通过薄层色谱法，对产品中是否添加枸橼酸西地那非进展初步的别离监测。

如发现对照品比移值处样品也存在相应斑点时需要进一步实验判断，液相色谱是判断方法之一。

而液相色谱-质谱联用法那么是更为可靠的非法添加物确定方法。

HPLC法：

色谱柱：

ODS〔3.9mm×

150mm，5μm〕，流动相一定酸度水溶液-甲醇-乙腈〔58:

25:

17〕。

紫外检测。

将阳性结果所有供试品及对照品溶液均用甲醇稀释5倍，进样。

得到上述胶囊制剂的色谱图如下,

HPLC-MS法。

HPLC条件：

C18色谱柱,流动相为0.01mol·

L-1醋酸铵溶液-乙腈-甲醇（35:

10:

55）,进样量为10μL。

质谱条件：

电喷雾电离源,正、负离子检测。

采用正负离子检测方式对西地那非对照品溶液进展HPLC-MS分析,在“疑是〞物质色谱峰处，测得准分子离子分别为[M+H]+m/z475（正离子方式）和[M-H]-m/z473（负离子方式）,分别对其进展二级质谱分析,分别产生m/z377,311,283（正离子方式）和445（负离子方式）的碎片离子见以下图:

在一样的色谱和质谱条件下对10种中药供试溶液进展了HPLC-MS分析,在制剂A、B中,在西地那非对照品HPLC色谱峰（保存时间）处有色谱峰出现,保存时间分别为7.554,7.553min,且其一级质谱中分别检测到西地那非的准分子离子m/z475（正离子方式）和473（负离子方式）,分别对m/z475（正离子方式）和473（负离子方式）的离子进展二级质谱分析,产生与西地那非对照品完全一致的碎片离子,见上图。

比较对照品与“疑是〞物质色谱保存时间、一级质谱准分子离子、二级质谱碎片离子三方面的信息,证实中药制剂A、B中掺有西地那非。

采用液相色谱-质谱联用法,通过与对照品比较，对质荷比的挑选获得复杂基质中单一组分的色谱图,同时二级质谱可以对待测化合物进展构造确证,进一步保证药物定性分析的结果准确、可靠。

五、结语

药物的非法添加，危害宏大；

采用各种药物分析的方法和技术手段，对中药、保健食品等中非法添加物进展监控和检测，有利于保障消费者平安，对社会安定意义重大。

由于非法添加的隐蔽性和不明确性，对于非法添加的监视和检测常常是药物分析的挑战性课题，各种分析方法的结合使用常常是解决问题的必须手段和方式。