临床检验技师微生物检验讲义第十四章肠杆菌科及检验Word格式文档下载.docx
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糖类发酵试验触酶试验氧化酶试验硝酸盐还原试验
分解葡萄糖产酸或产酸产气+大部分-+
①用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌鉴别；
②用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者
均为阴性反应三个类群；
③选择生化反应进行属种鉴别；
④用诊断血清做凝集反应。
埃希菌属——分类
包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。
临床最常见的是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。
埃希菌属——生物学特性
短杆菌。
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多数有周鞭毛，能运动，
有菌毛、荚膜或微荚膜。
兼性厌氧。
营养琼脂上呈圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的光滑型菌落，直径2～3mm，少数菌株产生
β-溶血环。
伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。
麦康凯和SS琼脂上，胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。
抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。
埃希菌属——微生物检验及鉴定
标本采集：
肠道感染采集粪便；
肠道外感染可采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。
脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性短杆菌。
粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，得到典型菌落。
药敏试验：
超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）产酶株。
肠道内感染：
血清学鉴定、毒素测定或毒力试验。
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埃希菌属——致病性及临床意义
致病因素：
侵袭力、内毒素、肠毒素。
肠道外感染：
泌尿系统感染最常见。
还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿，肺炎、新生儿脑膜炎、伤口感染、腹泻。
内毒素还可引起发热、休克、DIC等。
肠道感染
病原群
临床表现
肠产毒性大肠埃
霍乱样肠毒素腹泻（水泻）
希菌ETEC
肠致病性大肠埃
婴儿腹泻
希菌EPEC
肠侵袭性大肠埃
痢疾样腹泻（黏液脓血便）
希菌EIEC
肠出血性大肠埃
希菌EHEC
又称
O157:
H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（
HUS）：
严重的腹痛、痉
产志贺样毒素大
挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等；
严重者可发展为急性肾衰竭
肠埃希氏菌
（SLTEC或UTEC）
肠黏附性大肠埃
腹泻
希菌EAggEC
志贺菌属——分类
细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。
根据生化反应与血清学试验分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。
我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。
志贺菌属——生物学特性
短小杆菌。
无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。
普通琼脂平板和SS培养基上培养18～24h形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。
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抗原：
只有O抗原无鞭毛（H）抗原，个别菌型及新分离菌株有
K抗原。
O抗原分群特异性抗原和型特异性抗原两类。
根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群，
40余种血清型（包括亚型）。
加热100℃、60min可破坏K抗原。
志贺菌属——微生物检验及鉴定
发病早期及治疗前采集新鲜粪便（脓血便或黏液便）。
革兰阴性短小杆菌。
同时接种强弱选择性不同的两个平板。
强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（
SS）；
弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。
氧化
赖氨酸脱
硫化
苯丙氨酸
尿素分吲哚
甲基
V-P枸橼酸动力
糖类发酵试验
酶试
羧酶试验
氢试
脱氨酶试
解试验试验
红试
盐试验试验
验
试验
不分解乳糖，分解葡
+-
萄糖产酸不产气
血清分型：
A群痢疾志贺菌
甘露醇发酵试验阴性，
10个血清型
B群福氏志贺菌
6个血清型和X、Y2个变种
C群鲍特志贺菌
15个血清型
D群宋内志贺菌
迟缓发酵糖类；
仅有一个血清型有光滑型和粗糙型两种菌落
鉴别反应
赖氨酸脱羧酶
吲哚试验
醋酸钠试验
动力试验
不分解乳糖，分解葡萄糖产酸不产
志贺菌属
气
发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露
+
埃希菌属
醇产酸产气
氧化酶试验
硫化氢试验
类志贺邻单胞菌
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伤寒沙门菌++
志贺菌属——致病性及临床意义
侵袭力、内毒素及外毒素（A群产生志贺毒素，具有细胞毒素、肠毒素、神经毒素）。
所致疾病：
1.急性菌痢。
2.慢性菌痢：
人-人传播，可引起暴发流行。
3.中毒性菌痢：
小儿多见。
4.一般不入血，不引起败血症。
沙门菌属——生物学特性
直杆菌。
无芽胞、无荚膜；
大多有周身鞭毛，能运动；
多数有菌毛。
温度环境：
35～37℃。
SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上35～37℃24h可形成直径约2～4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。
产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落。
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鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌老人和儿童的慢性肠炎
猪霍乱沙门菌
伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状
沙门菌属——微生物检验及鉴定
肠热症的第一、二周采血液，第二、三周采粪便与尿液。
食物中毒采集食物与粪便。
整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。
革兰阴性直杆菌。
粪便直接接种于SS和麦康凯平板上。
血液和骨髓：
增菌后移种到血平板和肠道菌鉴别培养基。
尿液：
经硫磺酸盐肉汤增菌后，再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养。
氧化酶触酶
硫化氢硝酸盐还
脲酶
吲哚
甲基红V-P试枸橼酸
动力
原试验
盐试验
不发酵乳糖，发酵葡
萄糖产酸产气
血清学诊断：
肥达试验：
用已知的伤寒沙门菌O、H抗原，检测患者血清中抗体的含量。
诊断伤寒：
O凝集效价≥1:
80，H凝集效价≥1:
160。
沙门菌属——致病性及临床意义
所致疾病特点
肠热症
（伤寒与副伤寒病）食物中毒慢性肠炎
败血症
变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属——生物学特性形态与结构
两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状。
无芽胞，无荚膜；
致病因素
侵袭力
肠毒素
内毒素
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有周身鞭毛，运动活泼。
变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属——生物学特性
一般。
10～43℃。
营养琼脂或血琼脂平板：
变形杆菌大多数呈迁徙扩散生长（苯酚、硼酸、胆盐可抑制）。
含有胆盐的培养基：
菌落扁平、圆形、半透明。
肠道菌选择培养基：
形成不发酵乳糖菌落。
SS培养基：
常形成黑色中心菌落。
变形杆菌属细菌具O抗原及H抗原。
外-斐（Weil-Felix）反应：
普通变形杆菌的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是用以诊断某些立克次体病的依据。
变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属——微生物检验及鉴定标本采集：
尿液、脓汁、伤口分泌物及婴儿粪便等。
革兰阴性杆菌，多形性。
血琼脂平板、麦康凯或伊红亚甲蓝琼脂平板、SS琼脂平板孵育35～37℃18～24h。
变形杆菌属在血琼脂上呈迁徙生长，在SS琼脂上常为有黑色中心的菌落。
变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属——微生物检验及鉴定
生化反应
氧化酶明胶液硫化氢苯丙氨酸脱脂酶枸橼酸鸟氨酸脱羧吲哚麦芽糖发
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化试验
氨酶试验
酶试验
酵试验
变形杆菌
属
普通变形
杆菌
奇异变形
产黏变形
普罗威登
斯菌属
摩根菌属-
变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属——致病性及临床意义肠道寄居的正常菌群，是医源性感染的重要条件致病菌。
病原体所致疾病
普通变形杆菌尿道、创伤、烧伤感染；
食物中毒
奇异变形杆菌尿道、创伤、烧伤感染；
婴幼儿肠炎
产黏变形杆菌无引起人类感染
普罗威登斯菌属尿道、创伤与烧伤感染
摩根菌属医源性感染的重要病原菌
克雷伯菌属——分类
共有7个种，引起的医院感染日见增多。
肺炎克雷伯菌最为多见；
产酸克雷伯菌次之。
克雷伯菌属——生物学特性
卵圆形或球杆状；
培养物菌体较长，可呈多形性或丝状。
排列：
成双排列。
G-。
有明显荚膜，无鞭毛，无芽胞。
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血琼脂上，35℃培养24h，形成3～4mm圆形，凸起，灰白色，不溶血的菌落。
有时菌落呈现黏液型，用接种环挑取时呈长丝状。
肠道菌选择培养基中为乳糖产酸菌落。
克雷伯菌属——微生物检验及鉴定
肠炎患者采集粪便，败血症者采集血液。
带有荚膜的革兰阴性球杆菌。
无芽胞，无鞭毛。
粪便标本接种于肠道选择鉴别培养基，血液标本先增菌后接种血平板，经35℃培养16～24h，取肠道选择鉴别培养基上乳糖发酵的黏性菌落或血琼脂上灰白色大而黏的菌落。
氧化酶试
触酶试验
鸟氨酸脱羧
脲酶试验
动力试验吲哚试验
克雷伯菌属
大多数发酵乳
糖
产酸克雷伯杆菌
肺炎克雷伯杆菌
克雷伯菌属——致病性及临床意义
肺炎克雷伯菌
肺炎亚种婴儿肠炎、肺炎、脑膜炎、腹膜炎、外伤感染、败血症和成人医源性尿道感染
臭鼻亚种臭鼻症
鼻硬节亚种鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬节病
产酸克雷伯菌呼吸道和泌尿道感染、创伤感染与败血症等
耶尔森菌属——分类
包括11个种，其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌与人类致病有关。
耶尔森菌属——生物学特性
染
形态
特殊结构
色
鼠疫耶尔森菌G-
短而粗，两端钝圆，
有荚膜，无鞭毛，无芽胞。
3%NaCl琼脂培养基上呈明显
两极浓染
多形性
小肠结肠炎耶G-
球杆菌
25℃培养形成周鞭毛，呈翻滚旋转状运动；
37℃培养无
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尔森菌动力，无芽胞，无荚膜
假结核耶尔森球形或短杆形，两端
G-25℃培养有周鞭毛，有动力，37℃培养无动力
菌浓染
鼠疫耶尔森菌
气体环境
培养条件
菌落特征
普通培养基：
16～18h形状不一，浅灰色小菌落；
兼性厌氧
28～30℃
24～48h圆形透明，中心突出的浅灰色小菌落。
液
pH6.9～7.1
体培养基可形成菌膜。
底部絮状沉淀呈“钟乳石”
状
小肠结肠炎耶
4～40℃
麦康凯培养基：
不发酵乳糖的无色、透明或半透明、
尔森菌
最适20～28℃
扁平较小的菌落。
SS琼脂上生长不良
普通营养琼脂：
37℃24h形成圆形，中心凸起，颗
粒状，灰黄色，半透明的菌落
假结核耶尔森
最适30℃
SS琼脂上不生长，含胆盐培养基或麦康凯培养基
菌
pH6.0～8.0
上生长
液体培养基：
均匀浑浊生长者为光滑型菌株，
沉淀
生长为粗糙型菌株
耶尔森菌属——微生物检验及鉴定
氧化酶
尿素酶鸟氨酸脱
苯丙氨酸脱
吲哚试甲基红葡萄糖发
甘露醇发
+/-
耶尔森菌属——致病性及临床意义
病原体
所致疾病
临床常见腺鼠疫、败血型鼠疫和肺鼠疫
（鼠疫杆菌）
人畜共患病，引起人类肠道感染：
小肠结肠炎、末端回肠炎、胃肠炎、阑尾炎和
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肠系膜淋巴结炎。
可发生败血症，结节性红斑及关节炎等
人类感染少见，偶见肠道感染及肠系膜淋巴结炎
沙雷菌属——分类
包括黏质沙雷菌、液化沙雷菌、深红沙雷菌、普城沙雷菌、臭味沙雷菌、虫媒沙雷菌及无花果沙雷菌。
广泛分布于自然界，是水和土壤中常居菌群，也是重要的条件致病菌。
沙雷菌属——生物学特性
细小杆菌（体积最小的细菌）。
有周鞭毛，能运动；
部分有微荚膜，无芽胞。
在4%氯化钠条件下可生长。
呈白色、红色或粉红色菌落，直径1.5～2.0mm。
产生两种色素：
灵菌红素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。
沙雷菌属——微生物检验及鉴定
糖类发酵试β-半乳糖苷酶试葡萄糖酸盐试明胶液化试DNA酶试脂酶试枸橼酸盐试
验验验验验验验
发酵多种糖++++++
沙雷菌属——致病性及临床意义
黏质沙雷菌可导致呼吸道与泌尿道感染。
液化沙雷菌是条件致病菌，主要引起呼吸道感染。
肠杆菌属——分类
包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、聚团肠杆菌、日勾维肠杆菌、坂崎肠杆菌、中间型肠杆菌及河生肠杆菌等11个种。
肠杆菌属——生物学特性
短而粗的杆菌。
有周鞭毛，能运动，部分有荚膜，无芽胞。
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30℃。
普通琼脂：
形成大而湿润的黏液状菌落。
血琼脂板：
不溶血。
多数形成乳糖发酵菌落。
均匀浑浊，表面有薄膜，管底有黏稠性沉淀物。
肠杆菌属——微生物检验及鉴定
糖类发酵试
鸟氨酸脱羧酶
DNA酶试吲哚试
甲基红试
V-P试枸橼酸盐试动力试
大多数发酵
乳糖
肠杆菌属——致病性及临床意义
阴沟、产气、聚团、日勾维等肠杆菌常导致条件致病，引起呼吸道、泌尿生殖道感染，亦可引起菌血症，引起新生儿脑膜炎。
枸橼酸杆菌属——分类
包括弗劳地枸橼酸杆菌、异型枸橼酸杆菌和无丙二酸盐枸橼酸杆菌三个种。
广泛分布在自然界，属正常菌群成员。
枸橼酸杆菌属——生物学特性
直杆状。
单个或成对排列。
无荚膜，无芽胞，具有周鞭毛，有动力。
血液琼脂：
灰色或白色菌落，隆起，边缘整齐，直径2～4mm，不溶血。
肠道选择培养基：
大多数菌株发酵乳糖。
浑浊生长。
枸橼酸杆菌属——致病性及临床意义
条件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或医疗插管术后的泌尿道、呼吸道中检出，可引起败血症、脑膜炎、骨髓炎、中耳炎和心内膜炎等。
哈夫尼亚菌属
生物学特性：
革兰阴性周毛菌，30℃培养长出周鞭毛，能运动，无荚膜，无芽胞，兼性厌氧，普通营养琼脂培养基上易生长。
致病性：
条件致病菌，偶可致泌尿道、呼吸道感染、小儿化脓性脑膜炎与败血症。
爱德华菌属
革兰阴性周毛菌，兼性厌氧，在普通琼脂上易生长，菌落较小。
罕见条件致病菌。
迟缓爱德华菌可导致肠道外感染。
泛菌属
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革兰阴性粗短杆菌，有周边毛，能运动；
无荚膜和芽胞。
生化反应很不规则。
成团泛菌是人类的条件致病菌。
形态排列
培养特点
圆形凸起边缘整齐，灰白色光滑菌落，
有周鞭毛，菌毛、
伊红亚甲蓝琼脂菌落呈蓝紫色并有金属
短杆菌
光泽。
O、K、H
荚膜
麦康凯和SS琼脂上耐受胆盐菌株生长并
形成粉红色菌落
无荚膜芽胞无鞭毛
普通琼脂平板和SS培养基上培养18～24h
短小杆菌
形成中等大小、半透明光滑型菌落，宋内
O
有菌毛
志贺菌可形成扁平、粗糙菌落
无芽胞荚膜
SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上
24h形成透
沙门菌属
直杆菌
明或半透明菌落，对胆盐耐受。
有周鞭毛菌毛
产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落
营养琼脂或血琼脂平板大多呈迁徙扩散
生长。
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