临床检验技师微生物检验讲义第十四章肠杆菌科及检验Word格式文档下载.docx

1、糖类发酵试验 触酶试验 氧化酶试验 硝酸盐还原试验分解葡萄糖产酸或产酸产气 + 大部分 - +用葡萄糖氧化 - 发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌鉴别；用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；选择生化反应进行属种鉴别；用诊断血清做凝集反应。埃希菌属分类包括 5 个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。埃希菌属生物学特性短杆菌。第 2 页 共 19 页多数有周鞭毛，能运动，有菌毛、荚膜或微荚膜。兼性厌氧。营养琼脂上呈圆形，凸起，

2、边缘整齐，灰白色的光滑型菌落，直径 23mm，少数菌株产生 - 溶血环。伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。麦康凯和 SS琼脂上，胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。抗原由菌体抗原（ O）、表面抗原（ K）和鞭毛抗原（ H）三种构成。埃希菌属微生物检验及鉴定标本采集：肠道感染采集粪便；肠道外感染可采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性短杆菌。粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，得到典型菌落。药敏试验：超广谱 - 内酰胺酶（ ESBLs）产酶株。肠道内感染：血清学鉴定、毒素测定或毒力试验

3、。第 3 页 共 19 页埃希菌属致病性及临床意义致病因素：侵袭力、内毒素、肠毒素。肠道外感染：泌尿系统感染最常见。还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿，肺炎、新生儿脑膜炎、伤口感染、腹泻。内毒素还可引起发热、休克、 DIC 等。肠道感染病原群临床表现肠产毒性大肠埃霍乱样肠毒素腹泻（水泻）希菌 ETEC肠致病性大肠埃婴儿腹泻希菌 EPEC肠侵袭性大肠埃痢疾样腹泻（黏液脓血便）希菌 EIEC肠出血性大肠埃希菌 EHEC又称O157:H7 可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）：严重的腹痛、痉产志贺样毒素大挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等；严重者可发展为急性肾衰竭肠埃希氏菌（ SLTEC或 UT

4、EC）肠黏附性大肠埃腹泻希菌 EAggEC志贺菌属分类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。志贺菌属生物学特性短小杆菌。无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。普通琼脂平板和 SS培养基上培养 18 24h 形成中等大小、半透明的光滑型菌落， 宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。第 4 页 共 19 页抗原：只有 O抗原无鞭毛（ H）抗原，个别菌型及新分离菌株有K 抗原。O抗原分群特异性抗原和型特异性抗原两类。根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群，40 余种血清型（包括亚型）。加热 100、 60m

5、in 可破坏 K 抗原。志贺菌属微生物检验及鉴定发病早期及治疗前采集新鲜粪便（脓血便或黏液便）。革兰阴性短小杆菌。同时接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。氧化赖氨酸脱硫化苯丙氨酸尿素分 吲哚甲基V-P 枸橼酸 动力糖类发酵试验酶试羧酶试验氢试脱氨酶试解试验 试验红试盐试验 试验验试验不分解乳糖， 分解葡+-萄糖产酸不产气血清分型：A 群痢疾志贺菌甘露醇发酵试验阴性，10 个血清型B 群福氏志贺菌6 个血清型和 X、 Y2 个变种C 群鲍特志贺菌15 个血清型D 群宋内志贺菌迟缓发酵糖类；仅有一个血清型有光滑型和

6、粗糙型两种菌落鉴别反应赖氨酸脱羧酶吲哚试验醋酸钠试验动力试验不分解乳糖，分解葡萄糖产酸不产志贺菌属气发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露+埃希菌属醇产酸产气氧化酶试验硫化氢试验类志贺邻单胞菌第 5 页 共 19 页伤寒沙门菌 + +志贺菌属致病性及临床意义侵袭力、内毒素及外毒素（ A 群产生志贺毒素，具有细胞毒素、肠毒素、神经毒素）。所致疾病：1. 急性菌痢。2. 慢性菌痢：人 - 人传播，可引起暴发流行。3. 中毒性菌痢：小儿多见。4. 一般不入血，不引起败血症。沙门菌属生物学特性直杆菌。无芽胞、无荚膜；大多有周身鞭毛，能运动；多数有菌毛。温度环境： 3537。SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上 35

7、37 24h 可形成直径约 2 4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。产 H2S 者在 SS琼脂上形成黑色中心菌落。第 6 页 共 19 页鼠伤寒、肠炎、汤卜逊、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌老人和儿童的慢性肠炎猪霍乱沙门菌伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状沙门菌属微生物检验及鉴定肠热症的第一、二周采血液，第二、三周采粪便与尿液。食物中毒采集食物与粪便。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。革兰阴性直杆菌。粪便直接接种于 SS和麦康凯平板上。血液和骨髓：增菌后移种到血平板和肠道菌鉴别培养基。尿液：经硫磺酸盐肉汤增菌后，再接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养。氧化酶 触酶硫化氢 硝酸盐还

8、脲酶吲哚甲基红 V-P 试 枸橼酸动力原试验盐试验不发酵乳糖，发酵葡萄糖产酸产气血清学诊断：肥达试验：用已知的伤寒沙门菌 O、 H 抗原，检测患者血清中抗体的含量。诊断伤寒： O凝集效价 1:80 ， H凝集效价 1:160 。沙门菌属致病性及临床意义所致疾病 特点肠热症（伤寒与副伤寒病）食物中毒慢性肠炎败血症变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属生物学特性形态与结构两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状。无芽胞，无荚膜；致病因素侵袭力肠毒素内毒素第 7 页 共 19 页有周身鞭毛，运动活泼。变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属生物学特性一般。 1043。营养琼脂或血琼脂平板： 变形杆菌大多数呈

9、迁徙扩散生长（苯酚、硼酸、胆盐可抑制）。含有胆盐的培养基：菌落扁平、圆形、半透明。肠道菌选择培养基：形成不发酵乳糖菌落。SS培养基：常形成黑色中心菌落。变形杆菌属细菌具 O抗原及 H 抗原。外 - 斐（ Weil-Felix ）反应：普通变形杆菌的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是用以诊断某些立克次体病的依据。变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属微生物检验及鉴定标本采集：尿液、脓汁、伤口分泌物及婴儿粪便等。革兰阴性杆菌，多形性。血琼脂平板、麦康凯或伊红亚甲蓝琼脂平板、 SS琼脂平板孵育 35 3718 24h。变形杆菌属在血琼脂上呈迁徙生长，在 SS琼脂上常为有黑色中心的菌落。变形杆菌属

10、、普罗威登斯菌属及摩根菌属微生物检验及鉴定生化反应氧化酶 明胶液 硫化氢 苯丙氨酸脱 脂酶 枸橼酸 鸟氨酸脱羧 吲哚 麦芽糖发第 8 页 共 19 页化试验氨酶试验酶试验酵试验变形杆菌属普通变形杆菌奇异变形产黏变形普罗威登斯菌属摩根菌属 -变形杆菌属、普罗威登斯菌属及摩根菌属致病性及临床意义肠道寄居的正常菌群，是医源性感染的重要条件致病菌。病原体 所致疾病普通变形杆菌 尿道、创伤、烧伤感染；食物中毒奇异变形杆菌 尿道、创伤、烧伤感染；婴幼儿肠炎产黏变形杆菌 无引起人类感染普罗威登斯菌属 尿道、创伤与烧伤感染摩根菌属 医源性感染的重要病原菌克雷伯菌属分类共有 7 个种，引起的医院感染日见增多。肺

11、炎克雷伯菌最为多见；产酸克雷伯菌次之。克雷伯菌属生物学特性卵圆形或球杆状；培养物菌体较长，可呈多形性或丝状。排列：成双排列。 G- 。有明显荚膜，无鞭毛，无芽胞。第 9 页 共 19 页血琼脂上， 35培养 24h，形成 3 4mm圆形，凸起，灰白色，不溶血的菌落。 有时菌落呈现黏液型，用接种环挑取时呈长丝状。肠道菌选择培养基中为乳糖产酸菌落。克雷伯菌属微生物检验及鉴定肠炎患者采集粪便，败血症者采集血液。带有荚膜的革兰阴性球杆菌。无芽胞，无鞭毛。粪便标本接种于肠道选择鉴别培养基，血液标本先增菌后接种血平板，经 35培养 16 24h，取肠道选择鉴别培养基上乳糖发酵的黏性菌落或血琼脂上灰白色大而

12、黏的菌落。氧化酶试触酶试验鸟氨酸脱羧脲酶试验动力试验 吲哚试验克雷伯菌属大多数发酵乳糖产酸克雷伯杆菌肺炎克雷伯杆菌克雷伯菌属致病性及临床意义肺炎克雷伯菌肺炎亚种 婴儿肠炎、肺炎、脑膜炎、腹膜炎、外伤感染、败血症和成人医源性尿道感染臭鼻亚种 臭鼻症鼻硬节亚种 鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬节病产酸克雷伯菌 呼吸道和泌尿道感染、创伤感染与败血症等耶尔森菌属分类包括 11 个种，其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌与人类致病有关。耶尔森菌属生物学特性染形态特殊结构色鼠疫耶尔森菌 G-短而粗， 两端钝圆，有荚膜， 无鞭毛， 无芽胞。 3%NaCl琼脂培养基上呈明显两极浓染多形性小肠结肠炎耶

13、 G-球杆菌25培养形成周鞭毛，呈翻滚旋转状运动；37培养无第 10 页 共 19 页尔森菌 动力，无芽胞，无荚膜假结核耶尔森 球形或短杆形，两端G- 25培养有周鞭毛，有动力， 37培养无动力菌 浓染鼠疫耶尔森菌气体环境培养条件菌落特征普通培养基： 16 18h 形状不一，浅灰色小菌落；兼性厌氧28 3024 48h 圆形透明，中心突出的浅灰色小菌落。液pH6.9 7.1体培养基可形成菌膜。 底部絮状沉淀呈“钟乳石”状小肠结肠炎耶4 40麦康凯培养基： 不发酵乳糖的无色、 透明或半透明、尔森菌最适 20 28扁平较小的菌落。 SS 琼脂上生长不良普通营养琼脂： 3724h 形成圆形，中心凸起

14、，颗粒状，灰黄色，半透明的菌落假结核耶尔森最适 30SS 琼脂上不生长，含胆盐培养基或麦康凯培养基菌pH6.0 8.0上生长液体培养基： 均匀浑浊生长者为光滑型菌株，沉淀生长为粗糙型菌株耶尔森菌属微生物检验及鉴定氧化酶尿素酶 鸟氨酸脱苯丙氨酸脱吲哚试 甲基红 葡萄糖发甘露醇发+/-耶尔森菌属致病性及临床意义病原体所致疾病临床常见腺鼠疫、败血型鼠疫和肺鼠疫（鼠疫杆菌）人畜共患病，引起人类肠道感染：小肠结肠炎、末端回肠炎、胃肠炎、阑尾炎和第 11 页 共 19 页肠系膜淋巴结炎。可发生败血症，结节性红斑及关节炎等人类感染少见，偶见肠道感染及肠系膜淋巴结炎沙雷菌属分类包括黏质沙雷菌、液化沙雷菌、深红

15、沙雷菌、普城沙雷菌、臭味沙雷菌、虫媒沙雷菌及无花果沙雷菌。广泛分布于自然界，是水和土壤中常居菌群，也是重要的条件致病菌。沙雷菌属生物学特性细小杆菌（体积最小的细菌）。有周鞭毛，能运动；部分有微荚膜，无芽胞。在 4%氯化钠条件下可生长。呈白色、红色或粉红色菌落，直径 1.5 2.0mm。产生两种色素： 灵菌红素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。沙雷菌属微生物检验及鉴定糖类发酵试 - 半乳糖苷酶试 葡萄糖酸盐试 明胶液化试 DNA酶试 脂酶试 枸橼酸盐试验 验 验 验 验 验 验发酵多种糖 + + + + + +沙雷菌属致病性及临床意义黏质沙雷菌可导致呼吸道与泌尿道感染。液化沙雷菌是条件致病菌，主要

16、引起呼吸道感染。肠杆菌属分类包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、聚团肠杆菌、日勾维肠杆菌、坂崎肠杆菌、中间型肠杆菌及河生肠杆菌等 11 个种。肠杆菌属生物学特性短而粗的杆菌。有周鞭毛，能运动，部分有荚膜，无芽胞。第 12 页 共 19 页 30。普通琼脂： 形成大而湿润的黏液状菌落。血琼脂板：不溶血。多数形成乳糖发酵菌落。均匀浑浊，表面有薄膜，管底有黏稠性沉淀物。肠杆菌属微生物检验及鉴定糖类发酵试鸟氨酸脱羧酶DNA酶试 吲哚试甲基红试V-P 试 枸橼酸盐试 动力试大多数发酵乳糖肠杆菌属致病性及临床意义阴沟、产气、聚团、日勾维等肠杆菌常导致条件致病，引起呼吸道、泌尿生殖道感染，亦可引起菌血症，引起新生儿

17、脑膜炎。枸橼酸杆菌属分类包括弗劳地枸橼酸杆菌、异型枸橼酸杆菌和无丙二酸盐枸橼酸杆菌三个种。广泛分布在自然界，属正常菌群成员。枸橼酸杆菌属生物学特性直杆状。单个或成对排列。无荚膜，无芽胞，具有周鞭毛，有动力。血液琼脂：灰色或白色菌落，隆起，边缘整齐，直径 2 4mm，不溶血。肠道选择培养基：大多数菌株发酵乳糖。浑浊生长。枸橼酸杆菌属致病性及临床意义条件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或医疗插管术后的泌尿道、呼吸道中检出，可引起败血症、脑膜炎、骨髓炎、中耳炎和心内膜炎等。哈夫尼亚菌属生物学特性：革兰阴性周毛菌， 30培养长出周鞭毛，能运动，无荚膜，无芽胞，兼性厌氧，普通营养琼脂培养

18、基上易生长。致病性：条件致病菌，偶可致泌尿道、呼吸道感染、小儿化脓性脑膜炎与败血症。爱德华菌属革兰阴性周毛菌，兼性厌氧，在普通琼脂上易生长，菌落较小。罕见条件致病菌。迟缓爱德华菌可导致肠道外感染。泛菌属第 13 页 共 19 页革兰阴性粗短杆菌，有周边毛，能运动；无荚膜和芽胞。生化反应很不规则。成团泛菌是人类的条件致病菌。形态排列培养特点圆形凸起边缘整齐，灰白色光滑菌落，有周鞭毛，菌毛、伊红亚甲蓝琼脂菌落呈蓝紫色并有金属短杆菌光泽。O、 K、H荚膜麦康凯和 SS琼脂上耐受胆盐菌株生长并形成粉红色菌落无荚膜芽胞 无鞭毛普通琼脂平板和 SS培养基上培养 1824h短小杆菌形成中等大小、半透明光滑型菌落，宋内O有菌毛志贺菌可形成扁平、粗糙菌落无芽胞荚膜SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上24h 形成透沙门菌属直杆菌明或半透明菌落， 对胆盐耐受。有周鞭毛菌毛产 H2S 者在 SS琼脂上形成黑色中心菌落营养琼脂或血琼脂平板大多呈迁徙扩散生长。