浅论克氏螯虾壳聚糖对实验性大鼠血脂水平及动脉粥样硬化形成的影响Word格式.docx
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血清TC、TG、LDL、MDA含量明显降低,HDL、SOD含量明显提高（）。
结论：
克氏螯虾壳聚糖对实验性高脂血症大鼠有较好的降血脂、抗脂质过氧化损伤作用，可减缓大鼠动脉粥样硬化的形成。
【关键词】克氏螯虾壳聚糖;
大鼠;
血脂;
抗氧化;
动脉粥样硬化
[Abstract]Objective:
ToinvestigatetheactionoftheCrayfishchitosanonbloodlipidsandatherogenesisintheexperimentalhyperlipidemiarats.Methods:
Fortyratswererandomlydividedintocontrolgroup,highfatmodelgroup,lowdoseCrayfishchitosangroup,mediumdoseCrayfishchitosangroupandhighdoseCrayfishchitosangroup,everygrouphadeightrats.Bytheninthweekend,theserumcholesterol（TC）,triglyceride（TG）,lowdensitylipoproteincholesterol（LDLc）,highdensitylipoproteincholesterol（HDLc）,MDAandsuperoxidedismutase（SOD）activityweredetermined.Theaortapathomorphismwasobserved.Results:
Comparedwiththefatmodelgroup,theaorticwallthicknesswasdecreasedandfoamcellsreducedsignificantlyinCrayfishchitosangroup.ThecontentsofserumTC,TG,LDLc,MDAdecreasedsignificantlyandHDLc,SODwasincreasedsignificantly（）inCrayfishchitosangroup.Conclusion:
Crayfishchitosancanincreasebloodlipidantioxidationandreducetheatherosclerosisformationintheexperimentalhyperlipidemiarats.
[Keywords]Crayfishchitosan;
rats;
bloodlipid;
antioxidant;
atherosclerosis
克氏螯虾壳聚糖（Crayfishchitosan）是本课题组从克氏螯虾的外壳中提取、制备的一种碱性氨基多糖，是自然界唯一带有阳离子的可食用碱性多糖[1]。
研究表明克氏螯虾壳聚糖具有抗菌、降血糖等作用，但对调血脂抗氧化，预防动脉粥样硬化方面的研究尚未见报道。
本文通过对实验性高脂血症模型大鼠的研究，探讨克氏螯虾壳聚糖调血脂抗氧化，预防动脉粥样硬化形成的作用，为克氏螯虾壳聚糖的临床应用提供实验依据。
1材料与方法
仪器与试剂
日本岛津CL7300型全自动生化分析仪,日本Olympus显微镜。
克氏螯虾壳聚糖，由镇江科力生物技术有限公司制备;
胆固醇，上海伯奥生物科技有限公司产品;
维生素D，上海通用药业股份有限公司产品;
胆酸钠片，温州生物化学制药厂;
丙硫氧嘧啶片，上海复星药业有限公司;
总胆固醇（totalcholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白（lowdensitylipoproteincholesterol，LDLc）、高密度脂蛋白（highdensitylipoproteincholesterol，HDLc）检测试剂盒，由北京中生北控生物科技股份有限公司生产;
超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD）和丙二醛（malonaldehyde，MDA）检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。
动物与饲料
SD大鼠，雄性，40只，体质量180～205g，由江苏大学实验动物中心提供。
基础饲料由江苏大学实验动物中心提供。
高脂饲料，用%基础饲料、10%猪油、3%胆固醇、%胆酸钠、5%白糖、%丙硫氧嘧啶配制而成。
方法
动物分组与造模
用基础饲料适应性喂养SD大鼠5d后，随机分为5组：
正常对照组，高脂模型组,克氏螯虾壳聚糖低、中、高剂量组,每组8只。
对照组每日以基础饲料喂养，给等量%氯化钠溶液灌胃;
高脂模型组以40ml/kg剂量一次性腹腔注射维生素D后,每日以高脂饲料喂养，给等量%氯化钠溶液灌胃;
克氏螯虾壳聚糖低、中、高剂量组自造模日起给高脂饲料的同时分别用克氏螯虾壳聚糖300，600，900mg/kg灌胃，1次/d。
生化指标检测
实验9周后禁食不禁水12h，麻醉后眼眶后静脉丛采血，分离血清。
严格按照试剂盒说明书，分别以校准血清进行仪器校准,再进行室内质控血清测定,质控结果在允许范围内,分别对血清TG、TC、HDLc、LDLc、SOD和MDA进行测定。
大鼠主动脉病理形态观察
采完血后取主动脉约1cm，用10%甲醛溶液固定。
逐级乙醇脱水,石蜡包埋切片,苏木精伊红（HE）染色，显微镜下观察大鼠主动脉病理形态的变化。
统计学方法
数据以均数±
标准差（x±
s）表示，用Stata软件进行单因素方差分析,表示差异有统计学意义。
2结果
克氏螯虾壳聚糖对大鼠主动脉病理形态的影响
正常对照组大鼠血管内膜表面光滑而连续完整，未见细胞黏附，内膜下间隙较窄，中膜平滑肌细胞排列规整，无增生;
高脂模型组大鼠血管壁增厚，内膜粗糙，内皮细胞呈连续性缺失，底层的胶原纤维显露，大量单核细胞黏附于内皮表面或潜入内皮下，内皮下间隙增宽，内弹力板分离断裂;
克氏螯虾壳聚糖组大鼠血管内膜光滑，低、中剂量组大鼠血管内膜局部仅有少量单核细胞黏附，偶见内皮细胞缺失，平滑肌细胞增生，但明显好于模型组，高剂量组大鼠血管内膜与正常对照组相似，几乎看不出区别。
克氏螯虾壳聚糖对大鼠血脂水平的影响
给高脂饲料后，高脂模型组大鼠血清TC、TG、LDLc含量显着升高，HDLc含量显着降低，与正常对照组相比，差异均有统计学意义（），表明高脂模型造模成功。
给予克氏螯虾壳聚糖后，各剂量组TC、TG、LDLc含量均降低，HDLc含量均升高，中、高剂量组与高脂模型组比较，差异有统计学意义（）;
低剂量组的LDLc含量与高脂模型组比较，差异也有统计学意义（）。
见表1。
表1各组大鼠血清TC、TG、HDLc及LDLc含量比较
克氏螯虾壳聚糖对大鼠血清SOD及MDA含量的影响
与正常对照组比较，高脂模型组大鼠血清SOD含量显着下降（），MDA则显着升高（），给予克氏螯虾壳聚糖，各剂量组SOD均升高，与高脂模型组比较差异有统计学意义（低、中剂量组，高剂量组）;
壳聚糖各剂量组MDA含量有所下降，与高脂模型组比较，差异均有统计学意义（），见表2。
表2各组大鼠血清SOD及MDA含量比较
3讨论
动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是指动脉内膜的脂质、血液成分的沉积，平滑肌细胞及胶原纤维增生，伴有坏死及钙化等不同程度病变的一类慢性进行性病理过程。
AS的发展是多因素综合作用的复杂过程，大多公认的机制是：
①氧化型低密度脂蛋白胆固醇（oxLDL）损伤内皮细胞功能，释放炎性因子和细胞因子;
②巨噬细胞吞噬oxLDL形成泡沫细胞与胆固醇结晶构成脂质核心;
③血管中膜的平滑肌细胞迁移至内膜转化成分泌型的平滑肌细胞并增殖，分泌
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