微生物基础实训习题Word文件下载.docx

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38．进行稀释测数使用的主要器材有_________、______________、___________、_________。

39．显微计数的操作程序是_____________________、__________________、_________________________、__________________、_____________________、_____________________、_____________________、__________________________。

40．进行酵母菌的显微计数使用的主要工具是____________和_______________。

41．进行细菌的显微计数时使用的主要工具是___________和_____________。

42．测微生物大小使用的主要工具是_____________、_____________和__________。

43．普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是_________________,_______________,_______________,_______________,_______________,_________________,________________,__________________,____________________。

44．摇床振荡培养通常用来培养___________微生物，享格特的厌氧操作方法通常用来培养______________菌。

45．从土壤中分离真菌时,通常在培养基中加入________和__________抑制细菌的生长。

46．由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。

如在培养基中加入_________，会杀死或抑制____________的生长而分离出___________；

在培养基中加入__________，有利于分离到革兰氏阴性菌。

47．检查乳品和饮料是否含有__________等肠道细菌，可采用_______________培养基，在这种培养基平板上____________会形成具有__________光泽的紫黑色小菌落。

二．选择题：

1．牛肉膏蛋白胨培养基适用于。

A．真菌

B、放线菌

C、细菌

D、蓝细菌

2．高氏1号培养基用来培养：

。

A.细菌

B.真菌

C.放线菌

3．实验室中最常用的真菌固体培养基是。

A．马铃薯培养基

B、高氏一号培养基

C、马铃薯蔗糖培养基

D、牛肉膏蛋白胨培养基

4．配制固体培养基时，琼脂的常用浓度为：

A．0.2%左右

B、0.5%左右

C、1.5-2.0%

D、15-20%

5．配制半固体培养基时，琼脂的常用浓度为：

6．半固体培养基的琼脂加入量通常是:

。

A.1%

B.0.5%

C.0.1%

D．1.5-2.0%

7．半固体培养基的主要用途是:

A.检查细菌的运动性

B.检查细菌的好氧性

C.A.B.两项

8．培养基配制好后分装入试管，液体培养基的分装量以试管高度的：

为宜。

A．1/2

B．1/3

C、1/4

D、1/5

9．固体培养基的分装量不超过试管高度的。

10．固体培养基分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的为宜。

A．1/2

D、1/5

11．半固体培养基的分装量以试管高度的为宜。

12．盛放培养基的试管应该塞棉花是因为起作用

A过滤

B密封

C防潮

D阻氧

13．培养基中使用酵母膏主要为微生物提供：

A．生长因素

B．C源

C.N源

14．用牛肉膏作培养基能为微生物提供：

A.C源

B.N源

C.生长因素

D.A,B,C都提供

15．制备培养基中常用的碳源物质是：

A，糖类物质

B．碳酸盐

C．农副产品

16．高温干燥灭菌的温度应控制在。

A．120º

C，1h

B、140º

C，2h

C、150～170º

C，1～2h

D、200º

C，3h

17．干热灭菌的关键操作是:

A.灭菌物不能有水

B.保温过程中不能开箱门

C.降温不能太快

18．一般试验室用培养皿灭菌，常采用。

A．灭菌，150～170º

C，1-2h

B、湿热高压蒸汽灭菌121º

C，3h

C．间歇灭菌，2次，100º

C，每次1h

D、巴斯德灭菌60º

C，1h

19．在寻常烤箱中，在１６０℃达到灭菌效果所需时间为。

Ａ　５分钟　

Ｂ　３０分钟　

Ｃ　５０分钟　

Ｄ　９０分钟

20．实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是:

A.121℃/30min

B.115℃/30min

C.130℃/30min

21．使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:

A.排冷气彻底

B.保温时间适当

C.灭菌完后排气不能太快

D.A-C

22．常规加压灭菌的致死温度为。

A．100º

C，半小时

B、110º

C、121º

D、105º

C，半小时

23．高压灭菌锅杀死微生物需要下列所有条件，除之外。

Ａ　蒸汽温度１２１℃　　　

Ｂ　每平方英寸１５英镑压力

Ｃ　１０个大气压的体积　　

Ｄ　１５分钟

24．一种含有葡萄糖的液体培养基，需采用：

灭菌

A．15磅/英寸²

加压蒸汽灭菌

B、10磅/英寸²

C、煮沸消毒

25．巴氏消毒的工艺条件是:

A.62-63℃/30min

B.71-72℃/15min

C.A.B.均可

26．牛奶常用的消毒法为。

Ａ　巴斯德消毒法　

Ｂ　煮沸消毒法　

Ｃ　间歇灭菌法　

Ｄ　加压蒸汽灭菌法

27．任何降低环境中微生物数量的物质是。

Ａ　消毒剂　

Ｂ　防腐剂　

Ｃ　媒介　

Ｄ　氧化剂

28．乙醇是常用的消毒剂。

其杀菌效果最好的浓度为：

A．50%

B、70%

C、95%

D、100%

29．间歇灭菌过程需要下列所有条件，除了之外。

Ａ　蒸汽温度１００℃　　　

Ｂ　每平方英寸１０英镑压力

Ｃ　３０分钟时间　　　　　

Ｄ　连续三天的处理

30，无菌室空气灭菌常用方法是:

A.甲醛熏蒸

B.紫外灯照射

C.喷石炭酸

D.A.B.并用

31．紫外线能杀菌。

其中以波长为的杀菌力最强。

A．200nm

B、300nm

C、265nm—266nm

D、300nm以上

32．下列方法中测定样品中微生物活菌数量的方法是。

A．平板菌落计数法

B、比浊法

C、测含氮量法

D、称干重法

33．平板划线分离法需要下面所有的物品，除了之外。

Ａ　接种环　

Ｂ　琼脂培养基平板　

Ｃ　细菌的培养物　

Ｄ　电泳仪

34．细菌平板接种制备好后，放入恒温箱培养，需。

A．正放

B、斜放

C、倒置

D、随意

35．深层穿刺接种细菌到试管固体培养基中能。

Ａ　提供厌氧菌生长条件　　　

Ｂ　除去代谢废物的一个机会

Ｃ　增加钾和钠离子的数目　　

Ｄ　增加氧气

36．除外，下列方法都是厌氧菌培养法。

Ａ　高层琼脂柱　

Ｂ　亨盖特滚管技术　

Ｃ　堆积培养　

Ｄ　曲法培养

37．进行简单染色使用的染色液通常是:

A.复红

B.蕃红

C.结晶紫

D.孔雀绿

E.A-D均可

38．革兰氏染色是对的染色。

A．细胞壁

B、细胞质

C、细胞膜

D、细胞核

39．革兰氏染色法乙醇脱色后革兰氏阴性细菌呈。

A．蓝紫色

B、红色

C、无色

D、深绿色

40．革兰氏染色的关键操作步骤是。

A．结晶紫染色

B、碘液固定

C、酒精脱色

D、复染

41．用来染芽孢的染料通常是。

A．孔雀绿

B、结晶紫

C、复红

D、番红

42．霉菌水浸制片的关键操作是：

A.菌丝要分散

B.菌丝首先要用50%的乙醇浸润

C.盖盖玻片不能有气泡

D.A-C

43．下列是显微镜的高倍镜。

A15×

B45×

C90×

D100×

44．微生物镜检时要。

A先低倍镜后高倍镜

B直接高倍镜

C直接用油镜

D先高倍镜后低倍镜

45．在使用显微镜油镜时为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加:

A.二甲苯

B.水

C.香柏油

46．在高倍镜调至最清晰后，下列油镜操作顺序正确的是：

1．将镜筒提升2、转换油镜镜头3、滴加香柏油4．下降镜筒

A．

（1）、

（2）、（3）、（4）

B．

（2）、

（1）、（3）、（4）

C．（3）、

（2）、

（1）、（4）

D（3）、

（1）、

（2）、（4）

47．显微镜使用过后，用擦镜纸擦过香柏油，要用有机熔剂擦掉油镜上残存的香柏油，使用的是

A．乙醚

B、酒精

C、丙酮

D、二甲苯

三．判别题：

1．显微镜镜头的放大倍数越大，它的数值孔径值越大，其镜口角也越大。

（）。

2．数值孔径愈大，显微镜的分辩率愈高（）

3．使用高倍镜和油镜时，进入物镜的光线要尽可能明亮些（）

4．用油镜镜检时应将聚光器升至最高。

5．使用高倍镜时,可将聚光器升至最高。

6．使用油镜的正确操作步骤是:

（）。

1.低倍镜观察。

2.高倍镜观察。

3.转出高倍镜头，滴加香柏油后用油镜观察。

7．为了节省时间，可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油镜观察。

8．在擦拭显微镜镜头时，应向一个方向擦拭。

9．在使用完油镜后，镜头上的油要用擦镜纸擦干净（）

10．浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。

（）。

11．制作细菌涂片时，菌种要多些，以免个体太小不好寻找（）

12．制成涂片后，就可以在火焰上迅速通过1—2次来固定涂片（）

13．细菌染色中的水洗要从玻片上端细细流下，避免直接冲在涂片上（）

14．涂片水洗至无色后，便可以置于油镜下观察（）

15．革兰氏染色的关键一步是脱色。

如脱色时间过长，会造成革兰染色反应的假阳性（）

16．在革兰氏染色中，被染成红色的细菌称革兰氏阳性菌，染成紫色的细菌称革兰氏阴性菌（）

17．革兰氏染色法是细胞质染色，而不是细胞壁染色。

（）

18．E.coli经革兰氏染色后，菌体呈红色，它是革兰氏正反应细菌。

19．芽孢染色中：

（1）染色过程须用微火加热，自染料开始冒蒸汽时算起约4—5分钟（）

（2）在加热过程中切勿使染料蒸干,必要时可添加少许染料（）

（3）加热完毕后,要马上用自来水冲洗至孔雀绿不再裉色为止（）

20．观察根霉，青霉只需用低倍镜观察即可。

21．在光学显微镜下，根霉的孢子囊是透明的。

（）。

22．所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。

（）

23．所有真菌菌落的表面干燥，呈绒毛状。

24．所有放线菌菌落表面干燥，呈粉粒状。

25．实验室做固体培养基时，常加1.8%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时,琼脂加入量通常是0.5%。

:

26．实验室做固体培养基，常加2%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是1%。

27．为了满足微生物对微量元素的需要，配制培养基所用的水最好使用自来水。

28．用分装器将培养基分装试管时，应谨防培养基沾染试管口。

29．琼脂的熔化温度是80℃以上，凝固温度是45℃以下。

30．琼脂的熔化温度是95℃以上，凝固温度是45℃以下。

31．棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。

32．棉花塞入试管的长度应为棉塞全长的1/2。

33．摆斜面的长度应不超过试管长度的2/3。

34．摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。

35．配制固体培养基时，一旦分装好后要趁热将试管摆斜，使培养基凝成斜面。

36．培养基配制好后就可以马上用于接种。

（）

37．用于固化培养基时琼脂较之明胶具有更多的优点（）

38．火焰灼烧法灭菌彻底、迅速简便且应用广泛，适于各种物体的灭菌（）

39．干热灭菌法相对湿热灭菌法的优点是可保持物品干燥（）

40．玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。

（）。

41．加压蒸汽灭菌时，时间从压力开始升高时算起约20min（）

42．使用手提灭菌锅灭菌后，为了尽快排除锅内蒸汽，可直接打开排气阀排气。

43．酒精浓度愈高，杀菌力愈强（）

44．波长为265nm—266nm的紫外线杀菌力最强。

因此可以用于培养基的灭菌（）

45．巴斯德消毒法不能杀死细菌的芽孢。

46．可采用高压蒸汽灭菌对抗体进行灭菌。

47．对热敏感的溶液可采用巴斯德消毒法来灭菌。

48．无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。

:

49．无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中。

50．稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。

51．稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。

52．做稀释平板测数时，只需一支吸管从头稀释到尾即可。

53．做稀释平板测数时，每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。

54．稀释平板测数时，放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。

55．稀释平板测数时细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。

56．稀释平板测数时，细菌、放线菌，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数。

57．稀释平板测数时，真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。

58．稀释平板测数时，细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。

59．用混菌法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是1ml。

60．用涂抹法测微生物活菌数时，每个平皿中的菌液加入量是0.1ml。

61．稀释平板测数时，无论是用混菌法，还是用涂抹法,每个平皿中的菌液加入量都是1ml。

62．稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。

63．显微镜下对细菌细胞计数的数量结果要低于平板技术获得的结果（）

64．实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。

65．血球计数板两边的平台比计数区高0.1cm。

66．血球计数板两边的平台比计数区高0.1mm。

67．血球计数板计数区的面积是1mm2。

68．用血球计数板计数时，任数5个大方格（80个小格）的菌数即可。

69．在使用细菌计数板计数时，为了防止计数偏大，计数区四周压线的菌只能数两边。

70．血球]计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。

（〕。

71．血球计数板计数区共有400个小格，每小格的面积是1/400cm2。

72．镜台测微尺每小格的实际长度是10微米。

73．目镜测微尺每小格的实际长度是10μm。

74．镜台测微尺每小格的实际长度是10nm（纳米）。

75．目镜测微尺每格的实际长度是未知的，需用长度已知的镜台测微尺校正。

76．测微生物的细胞大小时,需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。

77．测微生物细胞大小时，需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。

四、名词解释

数值孔径分辨力无菌操作超净工作台纯培养技术培养基合成培养基天然培养基半合成培养基选择培养基加富培养基鉴别培养基革兰氏染色法简单染色法消毒灭菌巴氏消毒干热灭菌间歇灭菌过滤除菌湿热灭菌稀释平板计数法显微直接计数法平板划线分离法

五、问答题

1．试述在普通光学显微镜下测定微生物细胞大小的基本方法。

2．试述划线分离的操作方法。

3．如何检查细菌的运动性?

4．简述配制培养基的基本原则:

5．试述配制培养基的基本过程及应该注意的问题。

6．试述显微计数的基本方法。

7．革兰氏染色反应的成败关键是什么?

为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?

8．如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?

9．察氏培养基的组成为:

蔗糖:

30克,磷酸氢二钾:

1.0克,硝酸钠:

2克,硫酸镁0.5克,氯化钾:

0.5克,硫酸亚铁:

0.01克,蒸馏水:

1000ml.试述:

1.该培养基的C源,N源各是什么物质。

2.除C源和N源外的其它物质起什么作用:

3.该培养基为什么不加生长因子?

参考答案

1．显微镜的光学系统由__反光镜,聚光镜,物镜和__目镜___组成。

2．显微镜的机械部分包括_镜座，镜臂，载物台，转换器，镜筒，推动器,粗动螺旋,微动螺旋，聚光镜升降螺旋等九部分组成。

4使用显微镜低倍镜观察时,聚光器应该_降低，使用显微镜高倍镜观察时，聚光器应该适当升高。

4．高倍镜头的数值孔径通常为__0.65___，放大倍数为___40x____。

5．油镜头的数值孔径通常为_____1.25__，放大倍数为___100x或90x__。

6．低倍镜头的数值孔径通常是__0.25___，放大倍数为____10x或8x_。

7．用日光灯作光源时，通常用__平面___反光镜，用自然光作光源时，通常用__凹面__反光镜。

8．细菌经简单染色后呈__所染染料的颜色___。

9．简单染色的操作程是__涂片__,__干燥__,__固定_,_复红染色1-2分钟__,__水洗_,__晾干__。

10．革兰氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，结晶紫染色1分钟，水洗,碘液媒染1分钟，水洗，95%的乙醇脱色25秒，水洗，蕃红复染3-5分钟，水洗，晾干。

11．细菌经革兰氏染色后，革兰氏正反应菌呈__紫色_____，革兰氏负反应菌呈____红色____。

12．革兰氏染色的关键操作是__酒精脱色__。

13．细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染的原因是__G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后，菌体紫色脱去，故需用蕃红复染，这样在光镜下才能见到红色的菌体。

14．两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于__酒精脱色时间过长_和__菌体培养时间太长_引起。

15．有荚膜的细菌用负染色法染色后,荚膜为__无__色，菌体为__红___色。

16．芽胞染色的操作程序是___涂片，干燥，固定，孔雀绿加热染色15分钟，水洗，复红染色2-3分钟，水洗，晾干。

17．用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时，可使菌体呈_红___色，使芽胞呈__绿__色。

18．芽胞染色的关键操作是__孔雀绿加热染色适当___。

19．霉菌水浸片的制片程序是_加一滴水于载玻片中央，用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润，将菌丝用蒸馏水水洗，将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散，盖上盖玻片。

20．制霉菌水浸片时加棉兰染色液可