S100蛋白S100作业指导书Word文件下载.docx
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使用叠氮化物作为稳定剂的标本或质控液无法分析。
检测前，请确保患者标本、定标液及质控液放置在20–25°
C的环境中。
由于蒸发因素的影响，标本、定标液及质控液在放入分析仪后请在2小时内完成测定。
3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料
采用罗氏原装配套试剂。
试剂：
M：
链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml。
粒子浓度0.72mg/ml，含防腐剂。
R1：
生物素化的抗S100单克隆抗体（灰盖），1瓶，9ml，浓度1.0mg/l，磷酸缓冲液50mmol/l，pH7.2含防腐剂。
R2：
Ru（bpy）32+标记的抗S100单克隆抗体（黑盖），1瓶，9ml。
浓度1.0mg/l，磷酸缓冲液50mmol/l，pH7.2含防腐剂。
校准品：
Cal1阴性定标液（白盖），2*1ml血清,含防腐剂
Cal2阳性定标液（黑盖），2*1ml血清，含防腐剂
质控品：
ElecsysS100质控品1和2（PreciControlS100）货号03330648
其他所需材料：
Elecsys2010/cobase411分析仪所需材料:
货号11662988122,ElecsysProCell,6x380mL,系统缓冲液
货号11662970122,ElecsysCleanCell,6x380mL,检测池洗液
货号11930346122,ElecsysSysWash,1x500mL附加洗液
货号11933159001,SysClean适配器
货号11706829001,Elecsys1010分析杯,12x32反应管，或货号11706802001,Elecsys2010分析杯,60x60反应管
货号11706799001,Elecsys2010分吸吸头,30x120移液管吸头
ModularAnalyticsE170/cobase601免疫分析仪所需材料:
货号04880340,ProCellM,2x2L系统缓冲液
货号04880293,CleanCellM,2x2L检测池洗液
货号03023141001,PC/CC杯,50杯用于在测定前预热ProcellM及CleancellM。
清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗系统。
03005712190,ProbeWashM,12x70mL货号．
XXXXXX医院检验科免疫室分析项目作业指导书
ElecsysE170/E411
LAB－OP－MY0202页，共第页2版本：
货号12102137001,分析杯/分析吸头组合装M,48分析杯x84反应管或加液器吸头,废物袋
货号03023150001,WasteLiner,废物袋
货号03027651001,SysClean适配器M
三种分析仪均需要的材料:
货号11298500316,ElecsysSysClean,5x100mL系统清洗液
4.仪器和校准
使用仪器：
瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys2010/E170/E411全自动电化学发光免疫自动分析仪
仪器校准：
每批S100试剂盒必须用新鲜试剂和S100Cal1,Cal2定标一次。
另外，以下情况需要再次定标：
Elecsys2010：
一个月（同一批号试剂）
7天（放置仪器上的同一试剂盒）
各种分析仪均适用的情况：
根据要求进行标定：
如质控结果超出范围时；
根据规定进行多次标定。
5.操作步骤（以E170为例）
5.1校准操作步骤：
在编缉各项目的参数时，已经在Application—Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。
因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration中进行即可。
3.2进入Calibration—Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点定标（BLANK键）或两点定标（TWOPOINT键）、跨距定标（SPAN键）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最后点SAVE，将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置，点Start，再点Start，仪器开始定标。
在Calibration—Status菜单中看定标结果，点CalibrationResult键看定标结果，点ReactionMonitor键看每个定标物的反应曲线。
5.2样本检测程序：
单个样本输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在SequenceNo栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点SAVE键，样本号自动累加。
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace-Testslection，在SequenceNo栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
6.质量控制
用ElecsysS100质控品1和2（PreciControl）。
质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。
质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。
检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。
7.计算方法
仪器会自动根据Cal1和Cal2的测定值计算Cut-off值。
每一个标本的结果以有反应性或无反应性以及Cutoff指数形式（标）报告。
本信号/Cutoff8.参考范围
健康成人和恶性黑色素瘤患者
检测结果如下：
ElecsysS100来自健康成人和不同期别的恶性黑色素瘤随访患者的标本，用．
医院XXXXXX检验科免疫室分析项目作业指导书
MY020LAB文件编号：
－OP－3页页，共第3版本：
A/02008-02-01生效日期：
健康成人范围的样本量b）>
95%没有疾病，不患肿瘤c）可能为颅脑损伤的成年患者测定。
外伤后小时内进行ElecsysS100GCS表现为轻微颅脑外伤（格拉斯哥昏迷计分：
13-15分）和至少有一种症状的患者3S100ElecsysCCT作为参照，用（头颅计算机线断层摄影术）检查。
以健康个体的X95%值作为分界点，6小时内必须进行CCT测定可获得如下结果：
PPV8.8-13.3%,NPV99.1-100%，32.9%（95%可信区间：
，99.7%，PPV（阳性预测值）11%灵敏度98.8%，和特异度NPV（阴性预测值）30-35.9%）。
灵敏度96.5-100%，特异度
g/L
μd）0.098每个实验室必须调查各自患者群体的参考范围变异性，必要时根据具体情况制订自己的参考范围。
9.分析性能
分析仪的代表性试验数据如下。
各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。
精密度
根据NCCLS（全国临床实验室规范化操作委员会）制订的改良试验计划（EP5-A），应用Elecsys试剂盒、人血液标本和质控液验证ElecsysS100试剂盒检测重复性。
每日测6次共10日（n＝60）；
在E170分析仪上的组间精密度（n＝21），得结果如下：
分析灵敏度（低浓度检测限制）
<
0.005μg/L．
OP－MY020LAB文件编号：
－4第页页，共4版本：
（标准差）（系统定标，定标2SD检测限制定义为可以区别零浓度定标液的最低可测浓度值，计算公式为定标液最小浓度＋）。
2SD，组间精密度范围之内，标本数21液最小浓度＋方法比较
将ElecsysS100现在的试剂盒ElecsysS100（产品目录号03051986（y））与LiamatSangtec100（x1）和LiaisonSangtec100
（x2）
进行比较，得到以下线性关系（pmol/L）。
标本数：
934
标本的浓度范围为0.00and9.87μg/L。
379
标本的浓度范围为0.01and2.08μg/L。
分析特异性
所使用的单克隆抗体没有交叉反应<
1%。
功能灵敏度
<
0.02ug/l
功能灵敏度是指可以重复检测到的最低分析浓度，并且批内变异系数为20％。
10.干扰因素
测定结果不受黄疸（胆红素<
428μmol/L，或<
25mg/dl）、溶血（血红蛋白<
0.621mmol/L，或<
1.0g/dl）、高脂血〔症〕（脂肪乳剂<
1500mg/dl）和生物素（<
205nmol/ml，或<
50ng/mL）的影响。
标准：
回收率90－110％。
对于因某些疾病需要而接受高剂量生物素治疗的患者（>
5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集标本。
浓度达1000IU/mL的类风湿因子对检测没有干扰。
当S100浓度达10ug/ml时，未出现高剂量钩镰效应。
体外对18种常用药物进行试验未发现药物对本测定结果有影响。
由于本试剂盒使用单克隆鼠抗体，所以因治疗或者诊断需要而接受单克隆鼠抗体的患者，其标本检测结果可能有误。
极少数标本中可出现大量链亲和素和抗钌抗体而影响测定结果。
ElecsysS100附带有试剂添加剂以减少以上不良影响。
所以，在诊断中必须结合患者病史、各项实验室检查及其它临床资料来综合评估测定结果。
11.临床意义
S100是一种小分子蛋白质二聚体，分子量为10.5kD，是钙离子结合蛋白多基因家族中的一员1,2。
S100A1（α）和S100B（β）是首先发现的成员，最初由Moore作为一种不能分离的混合物从
牛脑中分离出来3，后来因其能溶于100%饱和硫酸铵溶液中，所以命名为S100。
同时，至少还发现了21种不同成员4。
S100A1和S100B主要在中枢神经系统细胞表达，特别是星型胶质细胞，但是在黑色素细胞和其他组织也有一定程度的表达。
。
1,5,6的异型或同型二聚体组成的蛋白质，具有多种调节细胞内和细胞外活动的功能B1和A1这种由．
LAB－OP－MY0205页，共第页5版本：
A/0生效日期：
恶性黑色素瘤患者，特别是II、III和IV期患者，血清S100浓度升高情况可能预示其疾病进展情况。
一系列的浓度测定对成功跟踪和监测患者治疗非常有用7,8,9,10,11,12,13。
另外，大脑损伤后，CSF（脑脊液）中S100浓度升高，并且释放到周围血液中。
血清S100浓度增加提示血脑屏障被破坏，并且这种升高可能出现在神经损害之前14。
多种不同原因，如脑外伤15,16,17,18,19,10和中风21,22,23引起的大脑损伤患者均可检测到S100。
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