高中生物二轮复习浙江专版课时跟踪检测专题十一生物技术实践Word文档下载推荐.docx

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培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌，但对于培养基中有遇高温易分解的成分，就不能用此方法，如培养基中的尿素等物质；

划线接种结束后需要将培养皿倒置，以防止蒸发冷凝成的水滴入培养基而造成污染。

4．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用以尿素为唯一氮源的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作、培养与观察，则乙组实验属于（　　）

A．空白对照　　　　　B．标准对照

C．相互对照D．条件对照

选D　乙组和甲组实验的培养条件不同，形成了条件对照。

5．某兴趣小组欲利用固定化酶进行酶解淀粉的实验，下列有关说法错误的是（　　）

A．固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了酶柱中酶的含量

B．淀粉溶液流速过快会导致流出液中含有淀粉

C．各组实验所用的淀粉溶液浓度应相同

D．淀粉溶液的pH对实验结果有影响

选A　固定化酶柱长度和淀粉溶液流速决定了淀粉的分解反应的程度，A错误；

淀粉溶液流速过快使反应时间变短，会导致流出液中含有淀粉，B正确；

淀粉溶液浓度为无关变量，各组实验所用的浓度应相同，C正确；

淀粉溶液的pH对酶的催化实验结果有影响，D正确。

6．下列关于固定化酶的说法，错误的是（　　）

A．固定化酶的不足之处是不能催化一系列反应

B．固定化酶可再次利用，降低了生产成本

C．固定后的酶既能与反应物接触，又能与产物分离

D．固定化酶易溶于水

选D　由于酶具有专一性，因此固定化酶不能催化一系列反应；

固定化酶可反复利用，降低了生产成本；

固定后的酶既能与反应物接触，又能与产物分离；

固定化酶不易溶于水，易与产物分离。

7．关于探究果胶酶最适用量的实验，下列叙述错误的是（　　）

A．各组需加入等量不同浓度的果胶酶溶液

B．要保证各组适宜并相同的pH和温度等条件

C．需要检测不同反应时间条件下的生成物量

D．几组实验之间可形成相互对照，不需单设空白对照

选C　探究果胶酶最适用量的实验，自变量是果胶酶浓度，所以各组需加入等量不同浓度的果胶酶溶液；

实验设置时，除自变量不同之外，其他无关变量应相同且适宜；

需要检测相同反应时间条件下的生成物量；

几组实验之间可形成相互对照，不需单设空白对照。

8．在用果胶酶处理苹果泥时，为了使果胶酶能够充分地催化反应，应采取的措施是（　　）

A．加大苹果泥用量

B．加大果胶酶用量

C．进一步提高温度

D．用玻璃棒不时地搅拌反应混合物

选D　在用果胶酶处理苹果泥时，若让果胶酶充分地催化反应，则需扩大果胶酶和苹果泥的接触面积，尽量使果胶酶和苹果泥充分接触，因此可用玻璃棒不时地搅拌反应混合物。

对苹果泥用量、酶用量及反应所需的温度和pH的调整，在一定范围内只能加快反应速度，而不能使果胶酶充分地催化反应。

9．下列不属于酶的固定方式的是（　　）

A．将酶包埋在细微网格中

B．将酶相互连接起来

C．将酶吸附在载体表面

D．将酶加上糖衣做成胶囊

选D　将酶包埋在细微网格中属于酶固定方式中的包埋法；

将酶相互连接起来属于酶固定方式中的共价偶联法或交联法；

将酶吸附在载体表面属于酶固定方式中的吸附法；

将酶加上糖衣是为了防止胃液里的胃蛋白酶分解酶制剂，不属于酶的固定方法。

10．下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法，错误的是（　　）

A．植物组织培养中的关键性激素是生长素和细胞分裂素

B．先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化

C．先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂又分化

D．同时使用生长素和细胞分裂素时，两者摩尔浓度的比例影响植物细胞的发育方向

选B　用于植物组织培养的培养基中除营养成分外，还需添加植物激素，一般包括生长素和细胞分裂素；

外植体脱分化、再分化的诱导方向取决于二者的比例。

先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂，但细胞不分化；

先使用细胞分裂素，后使用生长素，对细胞的分裂和分化均有利。

11．下列有关平板划线操作的叙述，正确的是（　　）

A．灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种

B．划线结束后，为避免实验菌污染环境和感染操作者，必须再次灼烧接种环

C．在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同

D．划线时最后一区域一定要与第一区域相连，达到首尾相接

选B　灼烧接种环后要冷却，方能取菌种，以避免温度太高杀死菌种；

第一次划线前灼烧接种环是为了杀死其他杂菌，保证实验菌的纯净，每次划线前灼烧接种环的目的是杀死残留在接种环上的实验菌；

划线时最后一区域与第一区域不能相连。

12．下列与泡菜中亚硝酸盐含量测定相关的叙述，错误的是（　　）

A．测定用的对氨基苯磺酸溶液和N1萘基乙二胺溶液均需装入棕色瓶中并放于冰箱保存

B．测定用的显色剂其实是已配制好的对氨基苯磺酸溶液和N1萘基乙二胺溶液的等体积混合液

C．测定时所用的每毫升亚硝酸钠标准溶液相当于5.0μg亚硝酸钠

D．绘制标准曲线时应以亚硝酸钠质量为横坐标，以光密度值为纵坐标绘制

选A　对氨基苯磺酸溶液应用棕色瓶室温保存，N1萘基乙二胺溶液应装入棕色瓶中放入冰箱保存。

13．下列关于分离以尿素为氮源的微生物的实验操作，错误的是（　　）

A．将土壤样品用无菌水进行一系列的梯度稀释

B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板

C．对尿素固体培养基的灭菌应采用121℃（500g/cm2压力）的高压蒸汽灭菌法

D．若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养

选C　将土壤样品用无菌水进行一系列的梯度稀释，便于统计样品中活菌的数目；

同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，这样求得的平均值更接近真实值；

尿素遇高温会分解，因此不能采用高压蒸汽灭菌法灭菌，应用G6玻璃砂漏斗进行过滤；

生物实验的原则之一是对照实验，将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照，排除非测试因素对实验的影响，可使结论更有说服力。

[B卷·

强化提能练]

1．（2019·

绍兴市适应性考试）为了从土壤中分离以尿素为氮源的微生物，某小组做了相关实验，其基本流程如下，请据图回答下列问题：

（1）实验流程中，物质甲是________。

为了体现尿素培养基的分离效果，需设置对照组，对照组的培养基是________________，该培养基常用的灭菌方法是____________。

（2）下表中有四种培养基，为了分离出以尿素为氮源的微生物，应采用的培养基是____。

（填编号）

培养基

蛋白胨

葡萄糖

NaCl

K2HPO4

酚红

琼脂糖

琼脂

水

尿素

A

－

＋

B

C

D

注：

“＋”表示加入，“－”表示不加。

（3）制备菌液时，步骤乙的操作是________。

A．灭菌B．稀释　

C．过滤　D．扩大培养

（4）为了统计每克土壤样品中以尿素为氮源的微生物的数目，接种时宜采用________________法。

将相同浓度的土壤稀释液分别接种在实验组和对照组培养基上，在______℃的恒温培养箱中培养24～48h，观察比较菌落数，发现对照组培养基中菌落的数目比实验组________。

（1）为了从土壤中分离出以尿素为氮源的微生物，需要用无菌水制备土壤浸出液，为了体现尿素培养基的效果，需设置对照组，对照组的培养基为LB全营养固体培养基，以观察全营养培养基上生长细菌的菌落数。

LB全营养培养基可以用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。

（2）为了分离出以尿素为氮源的微生物，应用以尿素为唯一氮源并添加酚红指示剂的培养基，同时培养基中要加入葡萄糖提供碳源，用琼脂糖作为凝固剂。

（3）为了获得单菌落，需要对土壤浸出液进行适度稀释。

浓度太大，不能形成单菌落。

（4）用于微生物计数时，接种方法可以采用涂布分离法，大多数细菌生长的温度是37℃左右。

将相同浓度的土壤稀释液分别接种在实验组和对照组培养基上，在37℃的恒温培养箱中培养24～48h发现对照组培养基中菌落的数目比实验组多。

答案：

（1）无菌水　LB（全营养）固体培养基　高压蒸汽灭菌　

（2）A　（3）B　（4）涂布分离　37　多

2．生活饮用水的微生物安全性日常检测是很重要的。

请回答下列问题：

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用__________法灭菌。

检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用________进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样分别用玻璃刮刀________到LB固体培养基，________于恒温培养箱，在__________℃条件进行培养。

用该方法统计样本菌落数时________（填“需要”或“不需要”）设置对照组。

（3）如图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列相关叙述正确的是________。

A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置

B．步骤②将接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液划线

C．步骤③向多个方向划线，使接种物逐步稀释，培养后出现单个菌落

D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数

（1）培养大肠杆菌所用的LB培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌。

检验大肠杆菌的含量时，通常将水样用无菌水进行一系列的梯度稀释。

（2）将稀释后的水样用玻璃刮刀涂布到LB固体培养基，倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养。

用该方法统计样本菌落数时需要设置对照组。

（3）培养和纯化大肠杆菌时尽可能使大肠杆菌细胞分散成单个，培养出单个菌落。

步骤①倒平板操作时，应将平板冷却凝固5～10min后再倒过来放置；

步骤②接种环在火焰上灼烧后应冷却，再蘸取菌液划线；

步骤③向多个方向划线，使接种物逐步稀释，培养后出现单个菌落；

划线分离法经过步骤④恒温培养箱培养后不能对大肠杆菌进行计数，涂布分离法可用于菌落的计数。

（1）高压蒸汽灭菌　无菌水　

（2）涂布　倒置　37　需要　（3）C

3.

如图是固定化酶反应柱，请回答下列问题：

（1）将α淀粉酶溶于水中，再加入石英砂，不时搅拌，这样α淀粉酶就可以固定在石英砂上。

这种固定化的方法称为__________________。

30min后，装入如图所示的反应器中，构成固定化酶反应柱，并用10倍体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是___________________________

______________________________________________________。

洗涤时，蒸馏水流速__________（填“能”或“不能”）过快。

（2）实验时，将此反应柱固定在支架上，用滴管滴加可溶性淀粉溶液，并以0.3mL/min的流速过柱，控制流速的目的是___________________________________________________

________________________。

在流出5mL淀粉溶液后接收0.5mL流出液，加入1～2滴________________，观察颜色。

为了使观察到的颜色变化明显，可__________后再观察。

如果溶液呈红色，说明淀粉水解成为________。

（3）实验后，用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此反应柱，洗涤的目的是________________________________________________________________________。

洗涤后，放置在4℃冰箱中保存。

几天后，可重复使用。

（4）一段时间后，某同学从冰箱中取出此反应柱，重复上述实验，却没有了相同的结果，试分析可能的原因。

_____________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

（1）固定化酶的制作方法有吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法，本题所用方法为吸附法。

洗涤是除去未吸附的游离的酶，在洗涤时流速不能过快，为1mL/min。

（2）以相对较慢的流速使淀粉溶液流过反应柱，可以让吸附着的酶与底物充分反应。

根据KII2溶液与淀粉反应呈蓝色，与糊精反应呈红色的原理来鉴定反应情况。

（3）实验完成后还需要对反应柱进行洗涤，以除去未参与反应的反应物及生成的产物，以便重复使用。

（4）一段时间后重复使用得不到相同的结果，应是酶出了问题，可能这些酶已经失活，或再次操作时相应的反应条件（如温度）不适合等。

（1）吸附法　除去未吸附的游离α淀粉酶　不能

（2）使淀粉溶液与α淀粉酶充分接触充分反应　KII2溶液　稀释　糊精　（3）洗去残留的反应物和产物

（4）从酶的活性、酶的数量、反应条件等方面分析，合理答案均可

4．（2019·

宁波市十校期末）啤酒是以粮食作物大麦（富含淀粉）酿造为主。

回答下列问题：

（1）所用大麦大多是没有发芽的，在酿造过程中需要将麦汁进行________过程，在实际生产中往往要将反应温度提高至90℃以上，因此添加的酶应具有________特点，而该步骤设置的优点有______________________（写出一点即可）。

（2）再根据酿造情况添加酵母菌，形成具有独特风味的啤酒。

________、________等会影响啤酒的风味。

（3）如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1—2—3—4—5，下列说法中正确的是________。

A．操作前要将接种环用酒精消毒

B．划线操作时将皿盖完全打开，划完立即盖上

C．只有在5区才可以得到所需菌落

D．在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌

（4）酿造过程可在如图所示的发酵罐中进行。

下列有关叙述错误的是________。

A．夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理

B．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气的进气量不宜太大

C．正常发酵过程中罐内的压力不会低于大气压

D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵

（1）用发芽的大麦进行酿造，在酿造过程中需要将麦汁进行糖化处理，目的是将淀粉水解。

由于实际生产中往往反应温度较高，因此添加的酶具有耐高温的特点，高温下生产的优点有增大产物量、缩短反应时间或增大反应速率等。

（2）用大麦和酵母菌酿造啤酒，其中菌种和大麦品种都会影响啤酒的风味。

（3）在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，接种环的灭菌方法应是在火焰上灼烧，A错误，D正确；

为了减少被空气中杂菌污染的机会，接种时划线操作是在火焰周围进行，且皿盖不能完全打开，B错误；

在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误。

（4）果酒制作是利用酵母菌的厌氧呼吸，酵母菌适宜生存的温度为25～30℃，而夏天温度较高，因此夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A正确；

产生酒精表明此时已经进行厌氧呼吸，厌氧呼吸过程中不能充气，否则会抑制酵母菌的厌氧呼吸，B错误；

正常发酵过程中，酵母菌厌氧呼吸不消耗气体，但是不断产生二氧化碳，因此罐内的压力不会低于大气压，C正确；

可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵，D正确。

（1）淀粉水解（或糖化）　耐高温　增大产物量、缩短反应时间、增大反应速率　

（2）菌种　大麦品种　（3）D　（4）B

5．（2019·

温州市选考适应性考试）请分析回答关于葡萄酒生产和检测方面的问题：

（1）各大酒庄酿制葡萄酒时，为保持各产区葡萄酒的特有口感，发酵菌种主要来自附在葡萄皮上的________。

该菌种在学生实验中也被频繁使用。

实验室在保存该菌种时，通常将该菌种接种到________培养基上，再放入冰箱中冷藏。

（2）某实验小组酿制的葡萄酒有一股酸味，从发酵条件分析，可能原因是____________导致醋化醋杆菌大量生长产生醋酸，其反应式为________________。

（3）该实验小组为研究过滤、沉淀后葡萄酒中的活菌数，检测流程如图所示。

―→

①检测过程中，应将不同稀释度的样液用________法分别接种于若干组平面培养基上，培养24～48小时出现________后计数。

②下列关于检测流程的叙述中，正确的是________。

A．配制培养基时应在调节酸碱度以前灭菌

B．为防止外来微生物污染，应将培养皿倒置在超净台上培养

C．根据培养结果，只需统计适宜稀释度样液组的菌落数

D．理论上，统计分析结果会略高于实际活菌数

（1）为保持各产区葡萄酒的特有口感，可利用附在葡萄皮上的（野生）酵母菌作为菌种进行发酵；

要保存菌种，可先将要保存的菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养，当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中冷藏保存。

（2）某实验小组酿制的葡萄酒有一股酸味，从发酵条件分析，可能原因是有氧条件导致醋化醋杆菌大量生长产生醋酸。

其反应式为C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。

（3）①常用稀释涂布法来统计样品中活菌的数目。

在检测过程中，应将不同稀释度的样液用涂布分离法分别接种于若干组平面培养基上，培养24～48小时出现（单）菌落后计数。

②培养基的pH值（酸碱度）直接影响培养物对离子的吸收，配制培养基时应在调节酸碱度以后灭菌，A错误；

倒置培养一方面可防止凝结在皿盖上的水蒸气流到培养基表面导致染菌，另一方面有利于菌种利用培养基营养，加快生长速度。

但不是将培养皿直接倒置在超净台上，而是倒置于恒温培养箱，在37℃条件进行培养，B错误；

当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少个活菌，因此只需统计适宜稀释度样液组的菌落数即可，C正确；

当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此理论上，统计分析结果会比实际活菌数目低，D错误。

（1）（野生）酵母菌　斜面　

（2）有氧条件∕有氧环境　C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O　（3）①涂布分离　（单）菌落　②C

6．（2019·

衢州市五校联盟高三联考）回答下列问题：

乳糖酶催化水解乳糖产生半乳糖和葡萄糖，解决了医学上的乳糖不耐症，同时还能将生成的低聚半乳糖广泛应用于食品加工领域。

乳糖酶大部分来自酵母菌的发酵，某实验室开展了高产乳糖酶酵母菌的筛选、酶的固定化及其特性的研究。

（1）已知Xgal在乳糖酶的催化下会产生蓝色产物，在初筛高产乳糖酶菌株时，先对菌株进行扩大培养，然后采用________法将菌液涂布接种在________与蔗糖以1∶1配比为碳源的平板培养基上，并在培养基表面涂匀无色化合物Xgal溶液进行鉴定，经培养后，挑选________较大的单菌落作为初筛高产菌株。

（2）将初筛高产菌株分别接种于液体培养基中，于30℃、140转/min________36h。

取少量发酵液低温离心后收集发酵上清液，以及将沉淀中菌体进行超声波、________、________处理使酶释放出来，经离心后收集菌体破壁上清液，测定两种上清液的酶活力并比较，筛选出活力高的菌株。

（3）将制备的乳糖酶粗液进行分离纯化，然后进行乳糖酶的固定化，磁性壳聚糖微球是一种新型高分子材料，它表面的氨基可以与蛋白质分子的羧基反应生成肽键，从而将蛋白质分子固定，因此利用它固定酶的方法是________________________________________。

A．包埋法B．吸附法　

C．共价偶联法　D．交联法

（4）将固定化乳糖酶装柱后建立固定化酶反应器，下列各项对固定化酶反应器连续生产影响最小的因素是___________________________________________________________。

A．反应液的溶氧量　　　B．固定化酶的活性

C．固定化酶柱的长度　　　D．反应液的流速

（1）在初筛高产乳糖酶菌株时，可以用涂布分离法将菌液涂布接种在乳糖与蔗糖以1∶1配比为碳源的平板培养基上，并在培养基表面涂匀无色化合物Xgal溶液进行鉴定，由于Xgal在乳糖酶的催化下会产生蓝色产物，蓝色区域越大说明菌落产生乳糖酶的能力越强，故挑选蓝色区域较大的单菌落作为初筛高产菌株。

（2）将初筛高产菌株接种于液体培养基中振荡培养36h。

将沉淀中菌体进行超声波、酶解、冷冻研磨处理使酶释放出来，经离心后收集菌体破壁上清液，测定两种上清液的酶活力并比较，筛选出活力高的菌株。

（3）磁性壳聚糖微球表面的氨基可以与蛋白质分子的羧基反应生成肽键（共价键），从而将蛋白质分子固定，该方法是利用载体表面的活性功能基团与酶分子上的非必需基团形成化学共价键，从而实现不可逆结合的酶固定方法，属于共价偶联法。

故A、B、D错误，C正确。

（4）固定化酶的活性、固定化酶柱的长度、反应液的流速均会影响到固定化酶反应器连续生产，反应液的溶氧量几乎不影响固定化酶反应器的连续生产，A正确。

（1）涂布分离　乳糖　蓝色区域

（2）振荡培养　酶解　冷冻研磨　（3）C　（4）A

7．某现代农业基地利用组织培养技术大量生产蓝莓，并将部分蓝莓进行培育和深加工。

（1）从自然生长的蓝莓上获得的幼芽在过程①中一般利用______________、________________进行消毒处理，经过无菌分割后，将组织块接种在A培养基中，以促进组织块的__________和____________。

幼苗在C培养基中主要是通过控制_