牧草营养价值评定分析方法文档格式.docx
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W--瓷盘重加新鲜样重，W1--瓷盘重，W2--瓷盘重加风干样重
4．将测过初水分的样品在粉碎机上进行粉碎，并通过40-60目筛，制成风干样品。
装入磨口广口瓶中备用。
实验粗水分的测定（只讲解，不做）
一、原理：
100-105℃烘箱除去风干样品中吸附水
二、仪器设备：
称量瓶（2个），分析天平（感量0.0001g），恒温干燥箱（1台），干燥器（1台（用变色硅酸干燥剂））
三、步骤：
1、称量瓶恒重：
将称量瓶洗净后置于100-105℃恒温干燥箱烘干1小时，取出移入干燥箱内冷却30分钟，称重m，然后再烘干30分钟，再冷却30分钟，直至两次称重之差小于0.0005g，为恒重。
（按照经验烘一次即可）
2、称样：
向已恒重的称量瓶中加入1.5g左右被测饲料样品，迅速称重m1。
3、称后放入100-105℃愠温干燥箱内，将称量瓶盖打开，烘干约6小时，取出移入干燥器中，冷却30分钟（盖好盖）迅速称重m2。
4、恒重：
称完后，按前面的操作方法继续将称量瓶放入100-105℃恒温干燥箱内，烘1小时，冷却、称重直到恒重（两次称重共不超过0.0005g）。
（为节省时间，本步骤省略）
三、计算
四、注意事项
1．含脂肪高的样品，烘干时间反而会增重，乃脂肪氧化所致，应以增重前一次重量计算。
2．含糖分离的易分解或易焦化样品，可使用减压干燥法（7℃以下，600毫米汞柱以下烘干5小时）。
3．精密度：
含水量在10%以上，允许相对偏差为1%；
5~10%，允许相对偏差为3%；
5%以下，允许相对偏差为5%。
周六下午饲草测定结果的评述与判定（讲解）
周日上午：
消化、定容；
周日下午：
蒸馏、滴定；
◆讲解粗纤维的测定，学生洗净500ml烧杯，入烘箱。
讲解酸洗石棉（负责人提前2天蒸馏水浸泡好）铺古式坩埚的方法（孔不漏而薄），学生铺好古式坩埚，负责人按号（三氯化铁溶液标号）放入马福炉550℃烘1h关闭第二天取出给学生备用。
周日实验三粗蛋白的测定（凯氏定氮法）
饲料中的粗蛋白指真蛋白和其他含氮化合物。
凯氏定氮法是在催化剂的作用下，用浓硫酸消化样品，使样品中的含氮物都转变为氨气，氨气被浓硫酸吸收变为硫酸铵。
加碱后用水蒸汽蒸馏使用氨逸出，用硼酸吸收，氨与酸结合成为四硼酸铵，后者用盐酸标准溶液滴定，即可测定含氮量。
根据含氮量，乘以6.25可得到CP的含量。
凯氏烧瓶、量筒、100ml容量瓶、150ml三角瓶2个、蒸馏装置、酸式滴定管、电炉、分析天平、洗瓶、通风橱。
三、试剂：
98%浓硫酸、混合催化剂、混合指示剂、40%NaOH、4%硼酸、HCl标准溶液
四、步骤：
（吸收氨气化和逸出再吸收酸滴定）
1、消化：
1）称取1g左右被测样品用滤纸包好装入凯氏烧瓶底部。
加入2.5g混合催化剂和10ml98%浓硫酸，静置过夜。
2）将凯氏烧瓶放在电炉上加热，开始加热时，先用小火，以免瓶内产生大量泡沫，溢出瓶口，当泡沫停止产生，再加强火力，使之维持微沸状态，温度保护在330℃左右，不可剧烈沸腾，以免（NH4）2SO4分解而损失。
加热消化时应随时转动凯氏瓶、使硫酸能冲洗附着于瓶壁上的样品，直至瓶内溶液呈蓝绿色澄清液，即消化完毕，一般饲料需消化3-6小时。
2、定容
待凯氏烧瓶冷却后加少量蒸馏水摇动，然后将凯氏瓶中的消化液无损失地转移100ml容量瓶中，用蒸馏水冲洗凯氏烧瓶数次注入容量瓶内，蒸馏水定容，混匀。
3、蒸馏
1）用滴定管准确放10ml2%硼酸溶液于150ml的三角瓶中，并加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂2滴，置于蒸馏装置冷凝管下，使管口浸入硼酸溶液中。
2）用移液管移取10ml消化液，于凯氏定氮仪上的小玻璃杯注入反应室内，再用少量蒸馏水冲洗。
3）取10mlNaOH溶液注入小玻璃杯内，小心地轻轻提起棒状玻璃塞，使NaOH溶液流入反应室立刻将玻璃棒塞紧，并加少量水于玻璃杯内，使少量水流入反应室，以洗涤碱液，小玻璃杯内加入部分蒸馏水，以防漏气。
4）接通电源煮沸蒸汽发生瓶中的蒸馏水开始蒸馏，并夹紧外层套管出口的橡皮管。
5）至接收液变蓝后继续蒸馏3分钟后，撤去三角瓶。
在小玻璃杯内加满水，将玻璃棒提起，使水流入反应室，并夹断气源，于是反应室的残液自动流入反应室外层中，如此反复冲洗几次后，将外层下端出口橡皮管打开，使反应室外层的废液排出，待废液排完后，夹紧橡皮管，每个消化液重复蒸馏两次作为平行。
4、滴定：
用0.02mol/L标准HCl溶液滴定，待溶液刚出现微灰红色，即达终点。
同时做空白滴定。
五、计算：
五、注意事项
1.各种饲料的粗蛋白实际含氮量差异很大，荞麦、玉米用系数6.00，大豆、小麦等用系数5.70，牛奶用系数6.38。
2.在实际操作中要结合饲料中实际含氮量，避免消耗大量HCl标准溶液
3.精密度：
CP>
25%,相对偏差1%
CP：
10%~25%，相对偏差2%
CP<
10%，相对偏差3%
周一上午：
CF测定：
学生称样，酸、碱、醇处理、放入烘箱，中午负责人管理烘箱
周一下午：
NDF\ADF测定的滤袋、洗涤剂准备
周一实验四NDF/ADF的测定
NDF测定：
（1）尼龙袋洗净、烘干、编号、称重（规格为300目，制成8cm×
12cm小袋；
事先经65℃、48h烘至恒重）m1
（2）称取1g左右样品放入尼龙袋m
（3）放入大烧杯
（4）加入中性洗涤剂
（5）在烧杯上口置凹面板
（6）在凹面板中倒入冷水起冷凝作用（防沸）
（7）将烧杯置于可调电炉上加热，在5—10min内煮沸，保持微沸状态1h。
（8）消煮完毕后，离火冷却10min，
（9）将尼龙袋和样品用2倍热水洗涤残渣。
（10）然后再用丙酮冲洗残渣两次至流出的丙酮为无色透明
（11）尼龙袋和样品于105℃烘箱内烘，直至恒重称重。
m2
（m2-m1）/m*100%
（1）尼龙袋和样品放入大烧杯
（2）加入酸性洗涤剂
（3）在烧杯上口置凹面板
（4）在凹面板中倒入冷水起冷凝作用（防沸）
（5）将烧杯置于可调电炉上加热，在5—10min内煮沸，保持微沸状态1h。
（6）消煮完毕后，离火冷却10min，
（7）将尼龙袋和样品取出，用2倍热水洗涤残渣。
（8）然后再用丙酮冲洗残渣两次至流出的丙酮为无色透明
（9）尼龙袋和样品于105℃烘箱内烘，直至恒重称重。
M3
周二试验五ADL（木质素）含量的测定
试验原理
木质素在醋酸的作用下,易溶于乙醇和乙醚的混合液,在硫酸介质中用重铬酸钾氧化为二氧化碳和水,反应方程式如下：
C6H10O5+4K2Cr2O7+16H2SO4=4Cr2（SO4）3+4K2SO4+6CO2+21H2O，
过量的重铬酸钾用硫代硫酸钠回滴,淀粉KI溶液为指示剂。
其中加氯化钡溶液的作用是让溶出的木质素和硫酸钡一起沉淀。
对照：
滴定加入了5ml质量分数25%硫酸和0.05mol/L的重铬酸钾溶液作为空白样
木质素含量按下式计算:
X=K（a-b）/（n×
48）
式中,“48”为1molC11H12O4相当于硫代硫酸钠的当量数;
K为硫代硫酸钠浓度,mol/L;
a为空白滴定所耗硫代硫酸钠体积,ml；
b为滴定溶液所耗硫代硫酸钠体积,ml；
n为干样质量,g。
①质量分数1%醋酸：
②质量分数10%氯化钡：
③质量分数25%的硫酸：
④0.05mol/L重铬酸钾溶液：
14.7g重铬酸钾定容至1000ml⑤质量分数30%KI溶液⑥质量分数0.5%淀粉液
用0.05mol/L重铬酸钾和0.2mol/L硫代硫酸钠滴定
周三试验六粗灰分的测定
饲料中的粗灰分系指饲料中的不燃烧部分，包括矿物质、无机盐等，约占饲料干物质的5%左右，主要为钾、钠、钙、镁、硫、硅、磷、铁及其他微量元素。
灰分在饲料中的含量虽然不多，但在动、植物体的新陈代谢活动中都是有很重要的。
测定灰分的总量，可了解不同生长期中、不同器官组织中灰分的变动情况；
也可在此基础上测定灰分中组成元素的含量，作为合理配合全价日粮的参考。
一、测定原理
将试样放入茂福炉中，在一定温度下灼烧，使有机质燃烧，生a成二氧化碳和水而除去，剩余的不可燃部分（主要是一些矿物质氧化物）总称为粗灰分，包括样品中原先粘上的少量泥土、砂石等杂质。
二、仪器设备等药品
（一）仪器设备
序号
仪器名称
数量
1
2
3
4
分析天平
瓷坩埚，25毫升
电炉
量筒
1~2
5
6
7
8
茂福炉（高温电阻炉）
坩埚钳长柄、短柄
干燥器
滴管
各1个
数个
（二）试剂药品
1．3%H2O2：
取1份30%H2O2，加水9份混匀而成。
2．1∶4HCl：
取1份浓盐酸，加水4份。
3．干燥剂：
无水氯化钙或变色硅胶。
4．凡士林。
三、测定方法
1．用1∶4HCl将瓷坩埚煮沸并洗净，烘干，在茂福炉内于600℃下灼烧半小时，待炉温降至200℃以下，将坩埚移入干燥器内，冷却30分钟，称重，再灼烧，称至两次重量之差小于0.5毫克为恒重。
（m0）
2．在此坩埚中准确称取风干样品1~2克（称准至0.0002克,m1）置电炉上，半开盖子，先低温小心碳化至无烟（勿着火）。
3．稍冷，将坩埚移入茂福炉中，慢慢升高温度至550~600℃灼烧1~2小时，等炉温降到200℃以下，取出坩埚置于干燥器内，冷却30分钟后称重，再灼烧半小时，同样冷却称重，直至前后两次称重之差小于1毫克为恒重。
（为了节省时间，本次实验采用一次连续灼烧6小时，冷却称重（m2）后即不再灼烧）
4．计算
粗灰分（%）=
四、注意事项
1．取样品数量（1~2克），主要看样品灰分含量的高低。
一般对谷类、油料、豆类等作灰分测定时，取样量可取高限或更高一点；
植物的叶和饲草中因灰分含量比籽实高得多，故取样量可取下限。
测草本材料时，粉碎中易产生大小不一的颗粒，应注意研磨和过筛。
2．一般情况下，饲料样品灼烧两小时，已足以充分灰化。
难以灰化和样品量较多时，应酌情增加灼烧时间1~2小时。
3．灼烧后是否需要加水或3%H2O2处理，需看第一次灼烧是否完全（灼烧后的灰分应当是灰的颜色，蓬松状态，故当出现黑灰色或溶融则另作处理）。
在取样较多，灰分含量高，灼烧器皿较小的情况下，单纯延长灼烧时间，有时难以将样品全部灰化，故需加少许水或3%H2O2进行处理，以使中间未灰化的物质露出表面（促进氧化），以使灰化完全。
4．灼烧温度不得超过600℃，否则会使磷酸盐熔融，凝结为固
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