05.病原学基本实验技术.2PPT文档格式.ppt

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病原学基本实验技术教学录像：

病原学基本实验技术-2-2（15min15min）v各实验室教学（各实验室教学（165min）课程内容课程内容课程内容课程内容sosoyjwsosoyjw教学录像：

教学录像：

病原学基本实验技术病原学基本实验技术病原学基本实验技术病原学基本实验技术-2-2进度安排进度安排进度安排进度安排病原学基本实验技术病原学基本实验技术-2抗酸染色法镜检细菌抗酸染色法镜检细菌11细菌生长特性鉴定细菌生长特性鉴定22细菌生化反应鉴定细菌生化反应鉴定33sosoyjwsosoyjw川北医学院川北医学院川北医学院川北医学院病原生物与免疫实验学教学课件病原生物与免疫实验学教学课件病原生物与免疫实验学教学课件病原生物与免疫实验学教学课件sosoyjwsosoyjw各实验室教学各实验室教学实验室教学实验室教学vv时间：

165min165minvv讲解示教（讲解示教（讲解示教（讲解示教（15min15min）：

抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法镜检细菌镜检细菌镜检细菌镜检细菌（10min10min）刚果红负染色法刚果红负染色法刚果红负染色法刚果红负染色法镜检细菌（镜检细菌（镜检细菌（镜检细菌（5min5min）vv操作：

操作：

抗酸染色法与刚果红负染色法镜检细菌（抗酸染色法与刚果红负染色法镜检细菌（抗酸染色法与刚果红负染色法镜检细菌（抗酸染色法与刚果红负染色法镜检细菌（60min60min）vv讲解示教（讲解示教（讲解示教（讲解示教（40min40min）：

）：

细菌的常规鉴定技术（细菌的常规鉴定技术（细菌的常规鉴定技术（细菌的常规鉴定技术（30min30min）血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验与与与与实验动物接种技术（实验动物接种技术（实验动物接种技术（实验动物接种技术（10min10min）vv操作（操作（操作（操作（50min50min）：

观察记录分析上次课观察记录分析上次课观察记录分析上次课观察记录分析上次课杀菌抑菌试验杀菌抑菌试验杀菌抑菌试验杀菌抑菌试验结果（结果（结果（结果（10min10min）细菌生长现象观察细菌生长现象观察细菌生长现象观察细菌生长现象观察与与与与生化反应结果观察生化反应结果观察生化反应结果观察生化反应结果观察（10min10min）玻片法血浆凝固酶试验玻片法血浆凝固酶试验玻片法血浆凝固酶试验玻片法血浆凝固酶试验与与与与家兔的皮内注射（家兔的皮内注射（家兔的皮内注射（家兔的皮内注射（30min30min）进度安排进度安排进度安排进度安排sosoyjwsosoyjw细菌的常规鉴定技术细菌的常规鉴定技术1、生长特性鉴定、生长特性鉴定2、菌体形态鉴定、菌体形态鉴定3、生化反应鉴定、生化反应鉴定4、血清反应鉴定、血清反应鉴定5、毒力鉴定、毒力鉴定6、耐药性鉴定、耐药性鉴定实验室教学实验室教学实验室教学实验室教学sosoyjwsosoyjw生长特性鉴定生长特性鉴定v细菌在培养基中的生长特性细菌在培养基中的生长特性细菌在培养基中的生长特性细菌在培养基中的生长特性普通琼脂平板培养基普通琼脂平板培养基普通琼脂平板培养基普通琼脂平板培养基血琼脂平板培养基血琼脂平板培养基血琼脂平板培养基血琼脂平板培养基半固体培养基半固体培养基半固体培养基半固体培养基液体培养基液体培养基液体培养基液体培养基v细菌计数（课外自学）细菌计数（课外自学）细菌计数（课外自学）细菌计数（课外自学）显微镜直接计数法显微镜直接计数法显微镜直接计数法显微镜直接计数法比浊法比浊法比浊法比浊法菌落计数法菌落计数法菌落计数法菌落计数法细菌常规鉴定细菌常规鉴定细菌常规鉴定细菌常规鉴定sosoyjwsosoyjw普通琼脂平板培养基观察普通琼脂平板培养基观察观察要点（观察要点（观察要点（观察要点（P85P85）：

菌落的大小、形态、透明度、边缘、）：

菌落的大小、形态、透明度、边缘、表面、色素等。

表面、色素等。

sosoyjwsosoyjw血琼脂平板培养基观察血琼脂平板培养基观察溶血：

菌落周围不明显溶溶血：

菌落周围不明显溶血环，常呈草绿色或褐色。

血环，常呈草绿色或褐色。

溶血：

菌落周围宽大透明溶血：

菌落周围宽大透明溶血环，可融合成片。

溶血环，可融合成片。

肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌不完全溶血不完全溶血不完全溶血不完全溶血（溶血）溶血）溶血）溶血）乙型链球菌乙型链球菌乙型链球菌乙型链球菌完全溶血完全溶血完全溶血完全溶血（溶血）溶血）溶血）溶血）sosoyjwsosoyjw肺炎链球菌不完全溶血肺炎链球菌不完全溶血肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌不完全溶血不完全溶血不完全溶血不完全溶血（溶血）溶血）溶血）溶血）sosoyjwsosoyjw乙型链球菌完全溶血乙型链球菌完全溶血乙型链球菌乙型链球菌乙型链球菌乙型链球菌完全溶血完全溶血完全溶血完全溶血（溶血）溶血）溶血）溶血）sosoyjwsosoyjw半固体培养基观察半固体培养基观察痢疾志贺菌痢疾志贺菌痢疾志贺菌痢疾志贺菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌伤寒沙门菌有动力：

有动力：

穿刺线模糊穿刺线模糊培养基混浊培养基混浊无动力：

无动力：

穿刺线清晰穿刺线清晰培养基清亮培养基清亮sosoyjwsosoyjw液体培养基观察液体培养基观察表面膜生长表面膜生长沉淀生长沉淀生长均匀浑浊生长均匀浑浊生长sosoyjwsosoyjw菌体形态鉴定菌体形态鉴定v直接镜检法直接镜检法（镜检细菌动力（镜检细菌动力（镜检细菌动力（镜检细菌动力鞭毛）鞭毛）鞭毛）鞭毛）压滴法与悬滴法高倍镜镜检压滴法与悬滴法高倍镜镜检压滴法与悬滴法高倍镜镜检压滴法与悬滴法高倍镜镜检暗视野显微镜与相差显微镜镜检暗视野显微镜与相差显微镜镜检暗视野显微镜与相差显微镜镜检暗视野显微镜与相差显微镜镜检v染色镜检法染色镜检法（镜检细菌形态）（镜检细菌形态）（镜检细菌形态）（镜检细菌形态）革兰染色法革兰染色法革兰染色法革兰染色法抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法抗酸染色法负染色法负染色法负染色法负染色法其他其他其他其他菌体形态菌体形态菌体形态菌体形态排列方式排列方式排列方式排列方式特殊结构特殊结构特殊结构特殊结构染色反应染色反应染色反应染色反应形形排排特特染染细菌常规鉴定细菌常规鉴定细菌常规鉴定细菌常规鉴定sosoyjwsosoyjw抗酸染色法镜检抗酸杆菌抗酸染色法镜检抗酸杆菌v原理：

细胞壁含有大量脂肪酸，难以被普通染色，原理：

细胞壁含有大量脂肪酸，难以被普通染色，需加热助染，且能抵抗需加热助染，且能抵抗需加热助染，且能抵抗需加热助染，且能抵抗3%3%盐酸酒精的脱色作用。

盐酸酒精的脱色作用。

v方法：

制片方法：

制片染色染色染色染色镜检镜检镜检镜检制片：

涂片（痰液标本）、干燥、固定制片：

涂片（痰液标本）、干燥、固定染色：

染色：

11、石碳酸复红石碳酸复红石碳酸复红石碳酸复红加热加热加热加热初染初染初染初染5min5min，冷却水洗，冷却水洗，冷却水洗，冷却水洗22、33%盐酸酒精盐酸酒精盐酸酒精盐酸酒精脱色脱色脱色脱色510510秒，水洗秒，水洗秒，水洗秒，水洗33、1%1%美兰美兰美兰美兰复染复染复染复染11minmin，水洗，水洗，水洗，水洗镜检：

吸水纸吸干，油镜镜检镜检：

吸水纸吸干，油镜镜检实验室教学实验室教学实验室教学实验室教学sosoyjwsosoyjw抗酸染色原理抗酸染色原理加热初染加热初染加热初染加热初染脱色脱色脱色脱色复染复染复染复染石碳酸复红石碳酸复红石碳酸复红石碳酸复红3%3%盐酸酒精盐酸酒精盐酸酒精盐酸酒精1%1%美兰美兰美兰美兰染色前染色前染色前染色前抗酸菌抗酸菌抗酸菌抗酸菌非抗酸菌非抗酸菌非抗酸菌非抗酸菌抵抗抵抗抵抗抵抗sosoyjwsosoyjw抗酸染色法镜检抗酸杆菌抗酸染色法镜检抗酸杆菌不典型杆状不典型杆状不典型杆状不典型杆状散在不规则排列散在不规则排列散在不规则排列散在不规则排列未见特殊结构未见特殊结构未见特殊结构未见特殊结构菌体染为红色为抗酸。

菌体染为红色为抗酸。

其他非抗酸菌染为蓝色其他非抗酸菌染为蓝色其他非抗酸菌染为蓝色其他非抗酸菌染为蓝色形形排排特特染染sosoyjwsosoyjw刚果红负染色法镜检细菌刚果红负染色法镜检细菌v原理：

背景着色，菌体不着色。

原理：

制片：

11、加一滴加一滴加一滴加一滴2%2%刚果红刚果红刚果红刚果红染液染液染液染液于载玻片上于载玻片上于载玻片上于载玻片上22、用牙签刮取少许牙垢涂于染液中用牙签刮取少许牙垢涂于染液中用牙签刮取少许牙垢涂于染液中用牙签刮取少许牙垢涂于染液中33、充分混匀，自然干燥、充分混匀，自然干燥、充分混匀，自然干燥、充分混匀，自然干燥染色：

11、翻转玻片，涂片处对着浓盐酸瓶口、翻转玻片，涂片处对着浓盐酸瓶口、翻转玻片，涂片处对着浓盐酸瓶口、翻转玻片，涂片处对着