苦参生物碱的提取实验报告Word格式文档下载.docx

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　　③洗脱并回流提取苦参总碱。

（2）分别用柱层析法和溶解度差异法分离氧化苦参碱。

　　三、实验时间

　　步骤所需时间/h

　　渗漉2

　　离子交换2

　　回流5

　　柱层析（或溶解度差异法）

　　2.5

　　鉴定0.5

　　四、实验原理

　　1.提取与分离方法

　　利用苦参生物碱具有弱碱性，可与强酸结合成易溶于水的盐的性质，将总碱从药材中提取出来。

结合动态连接提取工艺过程，实现生物碱充分溶出。

然后，加碱碱化，即可得到苦参生物总碱。

以苦参碱为例：

　　2.工艺流程

　　五、实验材料与设备

　　1.实验设备与仪器

　　层析柱，渗漉桶，烧杯，布氏漏斗，医用搪瓷盘，恒温水浴箱，层析槽，索氏提取器，研钵。

　　2.实验材料与试剂

　　苦参，强酸性阳离子树脂，层析用氧化铝，三氯甲烷，甲醇，浓氨水，乙醚，碘化铋钾，盐酸，氢氧化钠。

　　碘-碘化钾试剂，碘化汞钾试剂，碘化铋钾试剂，硅钨酸试剂。

　　六、实验步骤

　　1.反应提取步骤

（1）动态连续提取

　　①取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸，拌匀，放置30min,使生药膨胀。

②然后装入渗漉桶中，边加边压，层层加紧，全部装完后，药面压平，盖一层滤纸，滤纸上压一些洗净的玻璃塞。

　　③加入一定浓度的hcl溶液经过药面，以4~5mL/min的速度渗漉，收集渗漉液至无明显的生物碱反应为止，收集渗漉液约2500mL。

（2）交换

　　①将收集的渗漉液置于阳离子交换树脂进行交换，如交换液有为交换的生物碱时，仍可以继续交换，直至流出液无生物碱反应为止。

　　②将树脂倾入烧杯中，用蒸馏水洗涤数次，除去杂质，于布氏漏斗中抽干，倒入唐磁盘中晾干。

　　（3）总生物碱的洗脱

　　①将晾干的树脂，加浓氨水适量，搅匀，使湿润度适宜，树脂充分膨胀，盖好放置20min。

　　②装入索氏提取器中，加三氯甲烷300mL在水浴上回流洗脱，提至尽生物碱为止。

　　③回收三氯甲烷，得棕色粘稠物。

　　④加无水丙酮适量，加热溶解，过滤，减压蒸干。

　　必要时重复此操作，以脱除粗生物碱中的水，再在无水丙酮中重结晶。

　　2．氧化苦参的分离

（1）柱色谱法取100目色谱用氧化铝50g，用漏斗缓慢加入色谱柱内（1cm×

24cm，干法装柱），取苦参0.2g，加入适量氧化铝，搅匀，研细，装入色谱柱顶端，先用50ml三氯甲烷通过色谱柱，再用三氯甲烷-甲醇（9:

1）洗脱，流速

　　为1mL/min。

每10mL为一份（约收集15份），经薄层层色谱鉴定，相同流出成分合并，在水浴上挥发去溶剂，剩余物加无水丙酮溶解，放置，析出结晶为氧化苦参碱。

（2）溶解度差异法将苦参总碱溶于少量三氯甲烷中，加入10倍量乙醚，放置后有沉淀析出，过滤吸出的沉淀，滤液浓缩后再溶于少量三氯甲烷中，加入乙醚放置，再过滤析出沉淀，合并两次的沉淀物，用丙酮重结晶，即为氧化苦参碱。

　　（3）实验要求上述本工艺实验的操作步骤为典型实例，实验过程要求改变盐酸浓度以及渗漉速度，其余条件不变，在进行本实验时有两组同学做同一组浓度，但渗漉速度不同，以此比较不同盐酸浓度、不同渗漉速度下的提取率差异。

　　3.薄层色谱鉴定

　　样品：

苦参总碱、氧化苦参碱、苦参碱标准品、氧化苦参碱标准品

（1）吸附剂：

硅胶g；

展开剂：

三氯甲烷-甲醇-浓氨水（5:

0.6:

0.2）；

（2）吸附剂：

氧化铝；

三氯甲烷-甲醇-乙醚（44:

3）；

　　（3）显色剂：

改良碘化铋钾。

　　4.沉淀试验

　　取苦参总碱少许溶于稀盐酸中，分置4个小试管中，分别滴加下列试剂1~2滴，观察现象：

　　碘-碘化钾试剂碘化汞钾试剂碘化铋钾试剂硅钨酸试剂

　　七、注意事项

（1）浓盐酸、氨水均具有刺激性，使用时注意通风。

（2）丙酮、三氯甲烷、甲醇、无水乙醇和乙醚均为易燃品，注意防火安全。

　　（3）在将药材装柱时，不要将药材塞得过紧或过松。

过紧，渗漉速度太慢；

过松，渗漉速度太快，达不到渗漉效果。

　　八、实验报告内容

　　2、在收集渗漉液的过程中，溶液的颜色有何变化？

在回流提取中，有何现象发生？

　　答：

渗滤液的颜色刚开始为深棕黄色，随着渗漉时间的增加颜色慢慢变浅在回流过程中，树脂颜色慢慢变浅，溶液颜色逐渐加深。

　　3、.薄层色谱的结果如何？

因为所用盐酸浓度太低才2%，所能提取到的样品太少了，所以层析跑出来是没有东西的。

　　4、.实验报告除了完成单组实验内容和结果讨论外，还必须结合所有实验结果绘制出产品收率与盐酸浓度的关系曲线，并进行工艺分析讨论。

因为前几组用的盐酸浓度都很低，没有结果，所以产品收率与盐酸浓度的关系曲线没办法绘制。

　　由此实验可见，盐酸的浓度对苦参提取的影响之大。

　　九、参考文献

　　1肖崇厚主编·

中药化学·

上海：

上海科技出版社，1997

　　2杨其蕴主编·

天然药物化学·

中国医药出版社，1995

　　3章育中等·

苦参及其制剂中生物碱的薄层分离和含量测定·

药学学报·

1981,16（4）：

274~276

　　九、思考题

　　1干法装柱与湿法装柱有何区别？

湿法装柱

　　先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。

　　干法装柱

　　直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结

　　篇二：

实验三苦参生物碱的提取与鉴识

　　实验三苦参生物碱的提取与鉴识

　　背景

　　1.1苦参的化学成分

　　苦参,又名苦骨（见《本草纲目》川）、川参（见《贵州民间方药集》、凤凰爪（见翌广西中兽医药植））、牛参（见《湖南药物志》）,陶宏景谓:

“叶极似槐叶,花黄色,子作荚,根味至苦恶。

”李时珍谓:

“苦以味名,参以功名。

”lz]始载于（（神农本草经》,列为中品。

为豆科（Leg姗zn口sae）植物苦参（￡叩加rafla。

escensAzt.）的干燥根。

分布于我国南北各地Is],春秋两季采挖,除去根头及小支根,洗净,干燥、或趁鲜切片,干燥。

苦参性味苦寒,归心、肝、胃、大肠、膀肤经。

功能清热燥湿、祛风杀虫、利尿通淋。

用于热痢、便血、黄疽尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤癌痒、疥癣麻风等诸多病症。

　　苦参中含有多种有效成分,目前已知的主要有生物碱类、黄酮类、挥发油类化合物,还含有少量醒类、皂试类及氨基酸等其它化合物。

下面分别介绍各类化合物的主要成分。

　　1.LI生物碱

　　国内外学者从苦参根、苦参茎和叶及其花【4一l0]中共分离出26种生物碱。

苦参生物碱大多数是哇诺里西咤类（quinolizidine一type）,极少数为双呱陡类（dipiperidine--type）。

喳诺里西陡生物碱多数为苦参碱型生物碱,另有两种金雀花碱型（eytisine一type）生物碱,两种无叶豆碱型（sparteine一type）生物碱,一种羽扇豆碱型（lupinine一type）生物碱。

包括苦参碱（matrine）,氧化苦参碱（oxymatrine）,槐果碱（sophoearpine）、氧化槐果碱（n一oxysophoearpine）、异槐果碱（isosoph。

carpine）、异苦参碱（isomatrine）、7,11一去氢苦参碱（7,11一dehydromatrine）、槐胺碱（sophoramine）、异槐胺碱（isosophoramine）、新槐胺碱（neosophoramine）、■3一去氢槐胺碱（■`3一dehydrosophoramine）、■`一去氢槐胺碱（■7-dehydrosophoramine）、槐醇（sophoranol）,9。

一经基槐胺碱（9。

一hydroxysophoramine）、5。

9。

一二轻基苦参碱（5。

ga一dehydroxymatrine）、氧化槐醇（sophoranoln一oxide）、雀花碱（lupanine）、臭豆碱（anagyrine）、膺靛叶碱（baptifoline）、mamanine,Kuraramine、1sokuraramine等。

　　1.1.2黄酮类化合物

　　从苦参根和狭叶苦参根分离的黄酮类化合物己有29种[ll,2],多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类,少数为黄酮类、异黄酮类、查耳酮类和紫檀素类,其中仅有两种化合物为试,取代基除了常见的轻基、甲氧基外,多数化合物还具有异戊烯基（取代基A

　　1.1.3挥发油成分

　　王秀坤等!

`4】对苦参中的挥发油成分进行了分析,采用苦参粗粉与水共蒸馏,乙醚处理,无水硫酸钠脱水干燥,回收乙醚得油状物,再经气相色谱、质谱分析,共鉴定出47个成分。

鉴定出的化合物以二十烷烃为主成分,占58.12%。

就结构类型看,以烯烃为主,其次为烷烃和醇类,尚含酸醛酮酚等。

　　1.1.4其它类型的化合物

　　从苦参根中还分离得到一系列2一烷基色酮的衍生物I`5]、一种醒类化合物和两种三砧皂试l`6】。

王秀坤等llvl对苦参中的游离氨基酸成分进行了分析与鉴定,鉴定出巧种氨基酸,并计算了各成分的含量。

发现苦参中总游离氨基酸含量为162.51mg/l00ml,其中含量最高的为脯氨酸,107.51mg/l00ml,其次为天冬氨酸29.64mg/100ml。

张俊华等I`s]用色谱等方法分离,波谱等方法鉴定苦参中化学成分结构,分离得到5个化合物,分别为蔗糖、二十四碳酸、日一谷肖醇、芥子酸十六酷,伞形花内酷,均为首次从苦参中获得,其中芥子酸十六酷为新化合物。

　　一.实验目的

　　1.本实验通过从苦参中提取苦参生物碱，考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响

　　2.了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用

　　二.实验原理

　　渗滚法（percolation）的提取过程类似多次浸取过程,浸出液可以达到较高浓度,浸出效较好。

此法常温操作不需加热,溶剂用量少,过滤要求较低,使分离操作过程简化,尤其适用于热敏性、易挥发且有效成分含量较低或贵重药材提取。

采用0.5%的硫酸溶液对中药材黄连用渗辘法提取,收集7倍量渗媲液即可保证生物碱的提取率,与回流法比较,渗辘法提取物含杂质少、提取率高、使用溶剂量少即l。

渗渡法的操作技术要求较高,否则会影响提取效率,当提取物为薪性、不易流动的成分时,不宜使用该法。

　　三.实验流程

　　鉴识:

定性反应.薄层色谱等

　　四.实验过程

　　1.离子交换树脂的预处理

　　将7