苦参生物碱的提取实验报告Word格式文档下载.docx

1、洗脱并回流提取苦参总碱。（2）分别用柱层析法和溶解度差异法分离氧化苦参碱。三、实验时间步骤所需时间/h渗漉2离子交换2回流5柱层析（或溶解度差异法）2.5鉴定0.5四、实验原理1.提取与分离方法利用苦参生物碱具有弱碱性，可与强酸结合成易溶于水的盐的性质，将总碱从药材中提取出来。结合动态连接提取工艺过程，实现生物碱充分溶出。然后，加碱碱化，即可得到苦参生物总碱。以苦参碱为例：2.工艺流程五、实验材料与设备1.实验设备与仪器层析柱，渗漉桶，烧杯，布氏漏斗，医用搪瓷盘，恒温水浴箱，层析槽，索氏提取器，研钵。2.实验材料与试剂苦参，强酸性阳离子树脂，层析用氧化铝，三氯甲烷，甲醇，浓氨水，乙醚，碘化铋钾

2、，盐酸，氢氧化钠。碘-碘化钾试剂，碘化汞钾试剂，碘化铋钾试剂，硅钨酸试剂。六、实验步骤1.反应提取步骤（1）动态连续提取取苦参粗粉200g加一定浓度的盐酸，拌匀，放置30min,使生药膨胀。然后装入渗漉桶中，边加边压，层层加紧，全部装完后，药面压平，盖一层滤纸，滤纸上压一些洗净的玻璃塞。加入一定浓度的hcl溶液经过药面，以45mL/min的速度渗漉，收集渗漉液至无明显的生物碱反应为止，收集渗漉液约2500mL。（2）交换将收集的渗漉液置于阳离子交换树脂进行交换，如交换液有为交换的生物碱时，仍可以继续交换，直至流出液无生物碱反应为止。将树脂倾入烧杯中，用蒸馏水洗涤数次，除去杂质，于布氏漏斗中抽干

3、，倒入唐磁盘中晾干。（3）总生物碱的洗脱将晾干的树脂，加浓氨水适量，搅匀，使湿润度适宜，树脂充分膨胀，盖好放置20min。装入索氏提取器中，加三氯甲烷300mL在水浴上回流洗脱，提至尽生物碱为止。回收三氯甲烷，得棕色粘稠物。加无水丙酮适量，加热溶解，过滤，减压蒸干。必要时重复此操作，以脱除粗生物碱中的水，再在无水丙酮中重结晶。2氧化苦参的分离（1）柱色谱法取100目色谱用氧化铝50g，用漏斗缓慢加入色谱柱内（1cm24cm，干法装柱），取苦参0.2g，加入适量氧化铝，搅匀，研细，装入色谱柱顶端，先用50ml三氯甲烷通过色谱柱，再用三氯甲烷-甲醇（9:1）洗脱，流速为1mL/min。每10mL为

4、一份（约收集15份），经薄层层色谱鉴定，相同流出成分合并，在水浴上挥发去溶剂，剩余物加无水丙酮溶解，放置，析出结晶为氧化苦参碱。（2）溶解度差异法将苦参总碱溶于少量三氯甲烷中，加入10倍量乙醚，放置后有沉淀析出，过滤吸出的沉淀，滤液浓缩后再溶于少量三氯甲烷中，加入乙醚放置，再过滤析出沉淀，合并两次的沉淀物，用丙酮重结晶，即为氧化苦参碱。（3）实验要求上述本工艺实验的操作步骤为典型实例，实验过程要求改变盐酸浓度以及渗漉速度，其余条件不变，在进行本实验时有两组同学做同一组浓度，但渗漉速度不同，以此比较不同盐酸浓度、不同渗漉速度下的提取率差异。3.薄层色谱鉴定样品：苦参总碱、氧化苦参碱、苦参碱标准品

5、、氧化苦参碱标准品（1）吸附剂：硅胶g；展开剂：三氯甲烷-甲醇-浓氨水（5:0.6:0.2）；（2）吸附剂：氧化铝；三氯甲烷-甲醇-乙醚（44:3）；（3）显色剂：改良碘化铋钾。4.沉淀试验取苦参总碱少许溶于稀盐酸中，分置4个小试管中，分别滴加下列试剂12滴，观察现象：碘-碘化钾试剂碘化汞钾试剂碘化铋钾试剂硅钨酸试剂七、注意事项（1）浓盐酸、氨水均具有刺激性，使用时注意通风。（2）丙酮、三氯甲烷、甲醇、无水乙醇和乙醚均为易燃品，注意防火安全。（3）在将药材装柱时，不要将药材塞得过紧或过松。过紧，渗漉速度太慢；过松，渗漉速度太快，达不到渗漉效果。八、实验报告内容2、在收集渗漉液的过程中，溶液的颜

6、色有何变化？在回流提取中，有何现象发生？答：渗滤液的颜色刚开始为深棕黄色，随着渗漉时间的增加颜色慢慢变浅在回流过程中，树脂颜色慢慢变浅，溶液颜色逐渐加深。3、.薄层色谱的结果如何？因为所用盐酸浓度太低才2%，所能提取到的样品太少了，所以层析跑出来是没有东西的。4、.实验报告除了完成单组实验内容和结果讨论外，还必须结合所有实验结果绘制出产品收率与盐酸浓度的关系曲线，并进行工艺分析讨论。因为前几组用的盐酸浓度都很低，没有结果，所以产品收率与盐酸浓度的关系曲线没办法绘制。由此实验可见，盐酸的浓度对苦参提取的影响之大。九、参考文献1肖崇厚主编中药化学上海：上海科技出版社，19972杨其蕴主编天然药物化

7、学中国医药出版社，19953章育中等苦参及其制剂中生物碱的薄层分离和含量测定药学学报1981,16（4）：274276九、思考题1干法装柱与湿法装柱有何区别？湿法装柱先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，然后再加压用淋洗剂“走柱子”，本法最大的优点是一般柱子装的比较结实，没有气泡。干法装柱直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，这样就会使得柱子装的很结篇二：实验三苦参生物碱的提取与鉴识实验三苦参生物碱的提取与鉴识背景1.1苦参的化学成分苦参,又名苦骨（见本草纲目川）、川参（见贵州民间方药集、凤凰爪（见翌广西中兽医药

8、植）、牛参（见湖南药物志）,陶宏景谓:“叶极似槐叶,花黄色,子作荚,根味至苦恶。”李时珍谓:“苦以味名,参以功名。”lz始载于（神农本草经,列为中品。为豆科（Leg姗zn口sae）植物苦参（叩加rafla。escensAzt.）的干燥根。分布于我国南北各地Is,春秋两季采挖,除去根头及小支根,洗净,干燥、或趁鲜切片,干燥。苦参性味苦寒,归心、肝、胃、大肠、膀肤经。功能清热燥湿、祛风杀虫、利尿通淋。用于热痢、便血、黄疽尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤癌痒、疥癣麻风等诸多病症。苦参中含有多种有效成分,目前已知的主要有生物碱类、黄酮类、挥发油类化合物,还含有少量醒类、皂试类及氨基酸等其它化

9、合物。下面分别介绍各类化合物的主要成分。1.LI生物碱国内外学者从苦参根、苦参茎和叶及其花【4一l0中共分离出26种生物碱。苦参生物碱大多数是哇诺里西咤类（quinolizidine一type）,极少数为双呱陡类（dipiperidine-type）。喳诺里西陡生物碱多数为苦参碱型生物碱,另有两种金雀花碱型（eytisine一type）生物碱,两种无叶豆碱型（sparteine一type）生物碱,一种羽扇豆碱型（lupinine一type）生物碱。包括苦参碱（matrine）,氧化苦参碱（oxymatrine）,槐果碱（sophoearpine）、氧化槐果碱（n一oxysophoearpine

10、）、异槐果碱（isosoph。carpine）、异苦参碱（isomatrine）、7,11一去氢苦参碱（7,11一dehydromatrine）、槐胺碱（sophoramine）、异槐胺碱（isosophoramine）、新槐胺碱（neosophoramine）、3一去氢槐胺碱（3一dehydrosophoramine）、一去氢槐胺碱（7-dehydrosophoramine）、槐醇（sophoranol）,9。一经基槐胺碱（9。一hydroxysophoramine）、5。,9。一二轻基苦参碱（5。,ga一dehydroxymatrine）、氧化槐醇（sophoranoln一oxide）、雀

11、花碱（lupanine）、臭豆碱（anagyrine）、膺靛叶碱（baptifoline）、mamanine,Kuraramine、1sokuraramine等。1.1.2黄酮类化合物从苦参根和狭叶苦参根分离的黄酮类化合物己有29种ll,2,多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类,少数为黄酮类、异黄酮类、查耳酮类和紫檀素类,其中仅有两种化合物为试,取代基除了常见的轻基、甲氧基外,多数化合物还具有异戊烯基（取代基A1.1.3挥发油成分王秀坤等!4】对苦参中的挥发油成分进行了分析,采用苦参粗粉与水共蒸馏,乙醚处理,无水硫酸钠脱水干燥,回收乙醚得油状物,再经气相色谱、质谱分析,共鉴定出47个成分。鉴定出的化合

12、物以二十烷烃为主成分,占58.12%。就结构类型看,以烯烃为主,其次为烷烃和醇类,尚含酸醛酮酚等。1.1.4其它类型的化合物从苦参根中还分离得到一系列2一烷基色酮的衍生物I5、一种醒类化合物和两种三砧皂试l6】。王秀坤等llvl对苦参中的游离氨基酸成分进行了分析与鉴定,鉴定出巧种氨基酸,并计算了各成分的含量。发现苦参中总游离氨基酸含量为162.51mg/l00ml,其中含量最高的为脯氨酸,107.51mg/l00ml,其次为天冬氨酸29.64mg/100ml。张俊华等Is用色谱等方法分离,波谱等方法鉴定苦参中化学成分结构,分离得到5个化合物,分别为蔗糖、二十四碳酸、日一谷肖醇、芥子酸十六酷,伞

13、形花内酷,均为首次从苦参中获得,其中芥子酸十六酷为新化合物。一.实验目的1.本实验通过从苦参中提取苦参生物碱，考察盐酸的浓度和渗漉速度对提取产率的影响2.了解化学反应萃取分离在天然药物提取过程中的应用二.实验原理渗滚法（percolation）的提取过程类似多次浸取过程,浸出液可以达到较高浓度,浸出效较好。此法常温操作不需加热,溶剂用量少,过滤要求较低,使分离操作过程简化,尤其适用于热敏性、易挥发且有效成分含量较低或贵重药材提取。采用0.5%的硫酸溶液对中药材黄连用渗辘法提取,收集7倍量渗媲液即可保证生物碱的提取率,与回流法比较,渗辘法提取物含杂质少、提取率高、使用溶剂量少即l。渗渡法的操作技术要求较高,否则会影响提取效率,当提取物为薪性、不易流动的成分时,不宜使用该法。三.实验流程鉴识:定性反应.薄层色谱等四.实验过程1.离子交换树脂的预处理将7