药理学实验的基本知识与技术文档格式.docx

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药理学实验的基本知识与技术文档格式.docx

11、实验十一有机磷酸酯类中毒及解救……………………………………………………14

12、实验十二普鲁卡因的传导麻醉作用……………………………………………………15

13、实验十三苯巴比妥的抗惊厥作用………………………………………………………16

14、实验十四氯丙嗪的镇静和降温作用……………………………………………………17

15、实验十五药物的镇痛作用………………………………………………………………18

16、实验十六尼可刹米对抗吗啡中毒的呼吸抑制…………………………………………19

17、实验十七药物的抗心律失常作用………………………………………………………20

18、实验十八普萘洛尔的抗缺氧作用………………………………………………………20

19、实验十九理化因素及药物对离体蛙心的影响…………………………………………21

20、实验二十枸椽酸钠的抗凝血作用………………………………………………………23

21、实验二十一糖皮质激素对细胞膜的保护作用

22、实验二十二链霉素毒性反应及钙剂的对抗作用………………………………………23

23、实验二十三磺胺类药物的溶解性……………………………………………………24

24、常用仪器简介………………………………………………………………………………25

25、附录一:

几种常用注射麻醉剂的参考剂量………………………………………………31

26、附录二:

常用生理溶液的成分和配制……………………………………………………32

27、附录三:

常用实验动物的一些生理常数…………………………………………………33

28附录四:

动物与人体的每千克体重剂量折算系数表………………………………………33

实验一药理学实验的基本知识与技术

一、实验的目的

药理学实验是培养学生了解药理学实验方法,掌握药理学实验操作,提高专业素质的重要手段,是药理学教学的重要组成部分。

通过实验,训练学生动手操作的能力,比较和分析客观事物的能力,独立思考和解决问题的能力。

同时,通过实验培养学生对科学工作的严谨态度、严密的方法和实事求是的工作作风,为今后的工作实践打下坚实的基础。

二、实验要求

1、实验前

认真仔细地阅读《药理学实验指导》,了解实验的目的,理解实验原理,熟悉实验方法和操作步骤;

结合实验内容,复习与本次实验有关的理论知识;

对于使用的仪器要了解其基本结构和功能、操作方法和使用注意事项。

2、实验时

做好小组内部分工,各尽其责,做好原始记录,注意培养自己的动手能力与独立解决问题的能力,正确调试仪器,严格按操作程序进行实验。

3、实验后

认真整理实验原始记录,对实验结果进行分析讨论,书写实验报告。

三、实验结果的整理和实验报告的书写

1、实验结果的处理

实验结束后应及时地对原始记录进行整理和分析,整理时需要科学认真的态度,无论实验是预期的结果或意外,都要实事求是地整理表达。

药理实验结果有测量资料(如血压值、心率值、体温值等)和记数资料(如死亡率、阳性反应率等)两大类。

我们在记录和整理这些资料时均应以正确的单位和数值定量表示。

一般来说,应尽量将获得的资料组成图或表,使结果有重点地表达出来,以便分析、比较。

做表格时,一般将观察项目列在表内左侧,由上而下逐项填写,实验中的变化过程则由左向右按顺序填写。

绘图时,应在纵轴和横轴上列出数值刻度,标明单位,并在图下方注明实验条件。

如果不是连续性变化,也可用直方图表示。

总之,图表的制作原则应体现直观性。

有关图表的详细制作要求可参考有关文献。

2、实验报告的书写

书写实验报告是对实验的总结,是培养学生文字表达能力和综合分析能力的重要训练方式。

完整的实验报告应包括以下内容:

(1)实验题目一般将实验题目放在实验报告纸的第一行正中并在右边注明实验时间、条件等。

(2)实验目的实验目的相当于论文的引言,主要说明本实验要解决的问题及其意义。

尽可能简洁、清楚。

(3)实验材料包括实验仪器、试剂与药品、实验动物等内容。

(4)实验方法是对实验动物的分组、实验条件、给药方法、操作步骤及观察指标等简要地表述。

(5)实验结果实验结果的记录应是经过整理的数据或图表,与实验结果有关的重要情况也应加以说明。

(6)讨论讨论是根据已知的理论知识针对实验中观察到的现象与结果进行解释和分析,逐步推出结论。

讨论应避免离开实验结果去空谈理论。

如果属于非预期的实验结果,则应分析可能的原因。

(7)结论结论是对实验结果进行分析后所得到的概括性判断。

结论应与实验目的相呼应,文字要精炼。

本次实验中未能得到充分证据的理论分析,不应写入结论。

四、实验动物

1、实验动物的选择

在药理学实验中,药物的作用大多数是通过动物用药后的反应而表现出来的。

一般根据实验的需要选用动物,最常用的有小白鼠、大白鼠、家兔、豚鼠、青蛙、狗、猫等。

选用动物的原则是:

(1)该种动物的某一系统或器官能反映实验药物的选择作用,达到实验目的。

例如青蛙和蟾蜍的心脏,在离体情况下仍能有节奏的搏动,所以常用来研究药物对心脏的作用;

豚鼠因对组织胺敏感,易于致敏,所以在对平喘药和抗组织胺药的研究中常用。

(2)动物来源充分,符合精简节约的原则。

例如小白鼠是实验最常用的一种动物,因其便于大量繁殖,所以适合于需要大量动物的实验,如药物筛选、半数致死量测定等的研究。

(3)操作方便,有利于实验进行。

例如家兔在实验中应用也很多,易得到且易驯服,便于静脉注射和灌胃,常用于观察药物对中枢神经系统、心血管系统的作用,由于家兔体温变化灵敏,也常用于体温实验、热原检查等。

(4)选用的实验动物需身体健康,除特殊实验规定外,均应发育成熟。

2、实验动物的性别鉴定

兔将兔呈仰卧位,自尾部向前观察,肛门位于尾基部之前。

肛门前有泄殖孔,成年雄兔的泄殖孔附近可见阴囊。

雌兔肛门前有两个相距很近的孔,分别为尿道和阴道孔。

此外,雌兔腹部有5对乳头。

小鼠和大鼠雄性阴囊明显可见,性器官与肛门距离较远,二者间有毛。

雌性者性器官与肛门距离近,界限不清,腹部有乳头。

蟾蜍用拇指及食指挟皮肤提起时,雄性通常会发出叫声,而雌性不会叫。

另外,前趾蹼上棕黑色小突起(常分布在拇指和食指蹼上)有助于辨认,如有则为雄。

另提起动物时,前肢作环抱状则为雄性,前肢呈伸直状则为雌性。

3、实验动物的编号

犬、兔等较大动物可用特制号码牌固定于耳上。

小白鼠、大白鼠及白色家兔等可用黄色苦味酸涂于毛上标号,如给小鼠标记1-10号,可将小鼠背部的肩、腰、臀部按左、中、右分化为九个区,从右到左标记1-9号,第10号不作标记。

4、实验动物的捉拿方法

蛙和蟾蜍通常以左手握持动物,以中指和食指夹住左前肢,以拇指压住右前肢,将两下肢拉直固定于无名指和小指之间。

毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持动物的头部。

右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔摆动探针毁脑组织。

毁脑后,退回探针向后刺入椎骨破坏脊髓。

小白鼠捉拿方法有两种:

一种是用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其它粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓住粗糙表面迅速用左手拇指和食指捏住小鼠颈背部皮肤并以小指和手掌尺侧夹住其尾根部固定于手中。

另一种抓法是只用左手,先用食指和拇指抓住尾部,再用手掌尺侧及小指夹住尾根,然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。

前一方法简单易学,后一方法稍难,但便于快速捉拿给药。

大鼠捉拿及固定方法基本同小鼠。

捉拿时,右手抓住鼠尾,将大鼠放在粗糙面上,左手戴上保护手套或用厚布盖上大鼠,握住整个身体并固定其头部以防咬伤。

豚鼠捉拿时以拇指和中指从豚鼠背部绕到腋下,另一只手托住其臀部。

体重小者可用一只手捉拿,体重大者捉拿时宜用双手。

兔用左手抓住颈背部皮肤,轻轻将兔捉起,以右手托住其臀部,使兔呈坐姿势。

5、实验动物的给药途径与方法

蛙和蟾蜍蛙及蟾蜍皮下有数个淋巴囊,注入药物易吸收。

一般以腹,胸或股淋巴囊作为给药途径。

注射方法:

一手抓住蛙,固定四肢,将其腹部朝上,另一手持注射器,将注射针头先从蛙大腿止端刺入,经大腿肌层再入腹壁皮下刺入腹淋巴囊内,然后注入药液,此种注射方法可防止拔出针头时药液外溢。

注射量0.25~1.0ml/只。

小白鼠

(1)灌胃法左手拇指和食指捏住小白鼠颈背部皮肤,无名指或小指将尾部紧压在手掌上,使口部朝上,颈部拉直,右手持装有灌胃管的注射器,操作时小心自口角插入口腔,用灌胃管向后上方压迫小白鼠头部,使口腔与食道成一直线,再将灌胃管沿上腭壁轻轻推进食道,当推进2-3cm时,胃管的前端到达膈肌水平,此时可稍感有抵抗。

一般在此位置推进药液即可。

如此时动物呼吸无异常,可将药液注入,如遇阻力应抽出灌胃管重新插入,推注药液后轻轻拉出灌胃管。

一次灌注量为0.1~0.3ml∕10g.操作切忌粗暴,以防损伤食管及膈肌。

(2)皮下注射法最好两人合作,一人左手抓住小白鼠头部,右手拉住尾巴,另一人持注射器选用5号或6号针头,轻轻拉起背部皮肤,将注射针刺入皮下,稍稍摆动针头,若容易摆动则表明针尖的位置确在皮下,即可注入药液,注射量0.05~0.2ml∕10g。

(3)肌肉注射法小白鼠固定如上述。

将注射的针头刺入小白鼠臀部外侧肌肉,注入药液。

注射量一般为0.2ml∕次∕只。

(4)腹腔注射法左手固定动物,使小白鼠呈头低位,腹部朝上。

右手持注射器,在左侧或右侧下腹部向头部方向刺入皮下,沿皮下向前推进3-5mm,然后使针头与皮肤呈45°

角穿过腹肌刺入腹腔,针尖进入腹腔时可有抵抗消失感。

此时可轻轻推进药液。

一次注射量0.1-0.2ml∕10g。

(1)灌胃法如用兔固定箱,可一人操作,右手将开口器固定于兔口中,左手插入导尿管。

如无固定箱,需两人合作进行,一人坐好,将兔的躯干夹于两腿之间,左手抓双耳,固定其头部,右手握住其两前肢。

术者将开口器从口角插入横放于兔口中,将兔舌压在开口器下面。

此时助手用双手固定开口器。

术者将导尿管经开口器中央小孔慢慢沿上腭壁插入食管约15-18cm。

为避免误入气管,可将导尿管的外口端放入水中,如有气泡从导尿管中逸出,说明已插入气管,应拔出重新插入。

若无气泡逸出,则用注射器将药液灌入,并以少量清水冲洗导尿管。

灌胃完毕后,先拔出导尿管,再拿出开口器。

(2)静脉注射法兔静脉注射一般采用耳缘静脉。

注射时一人固定兔身,也可用固定器将兔固定。

注射者用手拔去注射部位的兔毛,用酒精棉球涂擦耳缘静脉部皮肤,以左手食指放在耳下将兔耳垫起,并以拇指按压耳缘部分,右手持带有6-7号针头的注射器,尽量从血管远端刺入血管(不一定有回血)。

并用左手拇指固定针头,右手徐徐注入药液。

若推药有阻力或发现局部发白隆起,表示针头在血管外,这时应将针头稍退后,再重新穿刺血管,注射完毕后,用棉球压住针眼,拔去针头。

6、实验动物的处死方法

实验结束后,常需将动物

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