八步区松材线虫病秋季监测Word文档格式.docx
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秋季普查在10月份进行。
(四)普查方法
普查以乡镇为单位,采取地面人工调查方法,并应用林业有害生物GIS信息管理系统、数据采集设备、无人机等技术手段开展调查。
1.踏查。
根据当地松林分布的特点,设计出便于观察全部林分的踏查路线;
沿踏查路线用无人机、目测方法或借用望远镜查找有无枯死松树,或针叶褪色、黄化、枯萎或针叶呈红褐色等症状的松树,选择取样对象。
踏查应有GPS轨迹记录,使用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航迹,GPS踏查线路命名为:
县(区)+乡镇+踏查+3位数字编码。
将每条踏查路线GPS轨迹导入林业有害生物GIS信息管理系统中保存。
发现松树枯死情况的记录踏查点信息,填写附表1。
2.详查。
根据记录踏查点信息踏查结果,对疑似发病林分进一步详细调查,凡死因不明的可疑松枯死木、濒死木均要取样检验。
按照本方案第三点所列取样方法,抽取一定数量的样品,进行分离镜检,确定是否带有松材线虫。
每个详查样地应有GPS定位记录及发生情况照片,应用广西林业有害生物野外数据采集系统记录航点,样地详查GPS定位命名为:
县(区)+乡镇+样地+3位数字编码。
三、疫情监测
(一)地面人工调查
1.定期巡查监测。
疫情发生区以乡镇为单位,组织专业技术人员每月对重点区域的松林进行巡查,凡发现松树有感病症状,立即取样分离鉴定,确定是否有松材线虫。
2.定点监测。
在疫情发生区边缘地带设置固定监测点,定期调查,发现松树枯死立即取样分离鉴定,确定是否有松材线虫。
(二)诱捕器监测
于松褐天牛羽化期在重点调查区域桂岭镇善华、桂岭、瑞山村,大宁镇螺石、李屋村,仁义镇龙珠、双龙村,信都镇马塘、新联、新红村林间设置诱捕器100个,诱捕松褐天牛活体进行监测。
将诱捕到的松褐天牛成虫活体剪碎后用贝尔曼漏斗法进行分离,镜检是否携带有松材线虫。
填写松材线虫病诱捕器记录表(附表2),将诱捕器诱捕松墨天牛和镜检数据整理记录、保存。
若发现松褐天牛携带松材线虫,应在诱捕点周围100-300米范围内对枯死松树和濒死松树进行取样分离鉴定,确定疫情发生地点。
严禁在疫情发生林分边缘使用诱捕器诱捕松墨天牛,防止疫情向外扩散蔓延。
(三)无人机监测
对地面不易调查的高山密林地区,采用无人机技术进行监测,若发现不明原因枯死松树,根据无人机搭载的GPS采集的位置信息开展实地调查,确认是否发生松材线虫病。
四、取样
(一)取样方法
1.取样部位一般情况下在树干下部(胸高处)、上部(主干与主侧枝交界处)、中部(上、下部之间)3个部位取样。
如仅部分枝条表现症状的,要在树干上部和死亡的枝条上取样。
如外部表现症状明显的可在胸高处取样。
在春季松褐天牛化蛹期,可在蛹室周围取样。
2.取样时在取样部位剥净树皮,直接砍取100-200克木片;
或剥净树皮,用手摇钻从木质部至髓心钻取100-200克木屑;
或在取样部位分别截取2厘米厚的圆盘。
3.取样时应排除人畜破坏、森林火灾、其他病虫害等原因造成的枯死树。
4.取样时应考虑以下因素:
松材线虫病发病高峰期一般在10月,从表现出针叶变黄、树脂分泌减少甚至停止至死亡约1个月至1个半月。
在松林中一般是优势木先发病。
由于不同地区种源的松材线虫的致病性、松树的抗性差异等原因,一些松树仅部分枝条表现感病外部症状。
这种症状在混交林中表现尤其明显。
抽取样品要及时并重点抽取尚未完全枯死或刚枯死的优势木(针叶呈黄绿或黄褐色,尚未完全枯萎,树皮尚未脱落,材质尚未腐朽)。
5.所取的样品要及时贴上标签(记录样品号、采集地点、树种、树龄、取样时间和取样人等)。
并填写取样记录表见附表3。
(二)抽样数量
以林业小班为单位,表现典型症状的松树在10株以下时全部取样;
10株以上时先抽取10株,再选取其余数量的1%-5%。
(三)样品的保存与处理
取回的样品应及时分离鉴定,若需要保存可采取以下方法:
将木片装入塑料袋内,扎紧袋口,在袋上扎几个小孔(也可直接保存木段、圆盘),放入4℃冰箱。
若需长期保存,要经常在样品上喷水(一般在半个月至1个月内完成分离鉴定)。
样品分离鉴定结束后应及时对样品进行销毁。
松材线虫普查监测工作具体技术操作规程参见国家标准《松材线虫普查监测技术规程(GB/T23478—2009)》。
五、分离鉴定
(一)线虫分离
将取回的样品在室内采用贝尔曼漏斗法或浅盘法进行线虫分离,分离时间一般需12小时以上。
将分离液体收集到试管或烧杯中,通过自然沉淀或离心后进行镜检。
(二)线虫培养
疫木保温保湿培养:
将样品锯成小段,置于烧杯中加少量清水,木段下端浸在水中,木段上端用湿纱布覆盖,在30℃条件下保温保湿培养3天,倒取杯中水液,可获得较多雌雄成虫;
或将样品木段适当浸湿,放于塑料袋里,扎紧袋口,置于30℃培养箱中3天取出重新分离,可获得较多雌雄成虫。
(三)玻片的制作
在洁净的载玻片中央滴一水滴,水滴的量以加盖玻片后恰好充满盖玻片下的空间为好。
用细针挑取,或用毛细滴管吸取线虫置于载玻片的水滴中,并使之沉底。
将有线虫的载玻片在酒精灯的火焰上往返通过5-6秒,杀死线虫。
用细针摆好水滴中的死线虫,然后用镊子夹盖玻片从一侧轻轻盖下。
(四)鉴定
1.常规显微镜形态鉴定(仅适用于雌雄成虫,以雌成虫为主):
将制作好的玻片置于显微镜下观察其形态,判别是否为松材线虫,并填写镜检记录表(附表3)。
松材线虫分离、培养、镜检技术操作规程参见国家标准《松材线虫病检疫技术规程(GB/T23476—2009)》
2.分子检测(适用于各虫态):
松材线虫的分子检测技术采用实时PCR检测技术。
五、数据整理与上报
普查数据以乡镇级为单位进行普查数据汇总(附表4、5),普查数据汇总到乡镇级行政区级别,于10月15日之前上报局防治检疫站汇总,局防治检疫站上报贺州市防治检疫站,市防治检疫站汇总上报至自治区防治检疫站。
附表:
1.松材线虫病踏查记录表
2.松材线虫病普查诱捕器记录表
3.松材线虫病采样镜检记录表
4.2018年秋季松材线虫病监测普查统计表
5.2018年秋季松材线虫病监测普查结果统计表
附表1松材线虫病踏查记录表
县(区、林场)名称:
乡镇(分场)名称:
GPS航迹名称:
里程(km):
序号
调查日期
踏查点
踏查点地理坐标
松树种类
松树枯死数量(株)
枯死原因分析
采样数量
(株/号)
经度
纬度
海拔(m)
调查人:
填表时间:
年月日
附表2松材线虫病普查诱捕器记录表
编号
悬挂地点
坐标点
诱心更换时间
诱捕器收虫
采样分离数
分离鉴定结果
时间
松褐天牛
其它天牛
无
其它线虫
松材线虫
附表3 松材线虫病采样镜检记录表
填报单位:
填报日期:
年月日填报人:
样本号
样本采集地点
经纬度坐标
采样时间
采集样品数量
采样人
取样部位
鉴定结果
镜检人
镜检
材料
上
中
下
拟松材线虫
无线虫
注:
镜检材料指松木或松墨天牛活体
附表4 2018年秋季松材线虫病监测普查统计表
填报日期:
所辖单位(县级行政区)
松林面积(万亩)
普查面积(万亩)
枯死松树(株)
清理枯死树(株)
取样数(株)
取样部位
鉴定结果
疑似病死木
其他
其他线虫
合计