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♦优化包括实验动物和动物实验两个方面,涉及试验设计、实验技术、人员培训、饲养环境、动物运输等。

4.标准化实验动物质量控制,包括环境、微生物、遗传、营养四个方面内容。

微生物控制:

基础/普通动物:

不携带所规定的人畜共患病病原和动物烈性传染病病原的动物。

例如流行性出血热、弓形体、沙门氏菌、狂犬病毒等。

清洁动物:

指普通动物应排除的病原外,还应不携带对动物健康危害和对科学研究干扰比较大的病原的动物

SPF动物:

无特定病原体动物,除清洁动物应排除的病原外,还应不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原的动物。

无菌动物:

在动物体内无可检出一切生命体的动物。

♦悉生动物:

已知菌动物。

环境分类

适用动物等级

普通环境

基础动物

屏障环境

清洁级动物、SPF级动物

隔离环境

SPF级动物、悉生动物、无菌动物

遗传学控制:

A.近交系动物的定义:

经至少20代的全同胞兄妹交配培育而成,品系内所有个体都可以追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先,该品系称近交系。

经连续20代以上亲代与子代交配与全同胞兄妹交配有同等效果。

B.亚系的形成:

近交系的亚系分化是指一个近交系内各个分支的动物之间,已经发现或十分可能存在遗传差异。

a. 

F20-40b. 

分开繁殖100代以上c. 

 

遗传差异

C.支系的形成:

一个近交系或亚系内部由于存在各种差异而出现的支系。

包括环境、母方、细胞质、可能(极小)遗传上差异等。

D.近交系动物的特性:

1、同和性:

在一个近交系内所有动物的所有基因位点都是纯合子、个体之间、祖代个体与后代个体之间都是纯合子。

2、同基因性:

一个近交系中所有个体在遗传上是同源的,所有个体都可追溯到一对共同祖先。

个体之间可进行器官移植、皮肤移植、肿瘤移植。

3、一致性:

近交系动物任何可遗传的体征都是一致的,如血型、组织型、形态上的特征、行为的类型。

如个体间出现差异,是环境不均一造成的。

4、长期的遗传稳定性:

近交系动物在遗传上是稳定的。

遗传变异或基因突变的机率极低,并及时清除遗传变异的动物。

5、可分辨性:

近交系动物在遗传上已有分型,可根据这些位点的分型很快地将两个外貌相似的近交系分辨出来。

6、个体性:

从整个近交系动物来看,每个品系在遗传上都是独立的,在某些情况下,品系间的差别显示在量上,而不在质上。

便于筛选。

7、 

分布的广泛性:

大部分近交系动物分布在世界各地,不同地区、不同国家的科学家有可能去重复或验证已取得的理论和数据。

8、背景资料和数据较为完善:

近交系动物在培养和保存过程中都有详细

E.近交同类系/同源导入近交系:

通过杂交—互交或回交等方式将一个基因导入到近交系中,由此形成的一个新的近交系,与原来的近交系只是在一个很小的染色体片段上的基因不同。

突变同类系/同源突变近交系:

两个近交系,除了在一个指明位点等位基因不同外,其他遗传基因全部相同

重组近交系:

将两个无关的近交系动物进行交配产生F2代后,经过连续20代以上的全同胞兄妹交配而育成的近交系,称为重组近交系。

杂交F1代动物:

由两个无关的近交系杂交而繁殖的第一代动物。

主要特性:

1、基因型相同

2、表现型一致,变异低

3、有杂种优势,生活力和抗病力强。

4、试验反应均一

5、具有双系双亲的特性,要通过不同杂交组合的对比观察,从中筛选出最理想的杂交组合。

封闭群动物:

以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物群,在不从其外部引入新的个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为封闭群动物,又称远交系动物。

“安死术”的概念:

即安乐死术,是指以人道的方法处死动物的技术。

在处死动物的过程中尽量减少动物的惊慌、焦虑,使其安静地、无痛苦地死亡。

动物实验室的污水主要来自:

动物的尿粪液、笼器具洗刷、废弃的消毒液、实验中废弃的试剂液。

实验动物各论

小鼠

1.产后发情:

雌鼠产后24~48小时,甚至在产后6~12小时,可出现动情期,在这段时间里,雌鼠排卵可以接受雄鼠交配并受孕,称为“血配”,出现边哺乳边妊娠的情况。

2.假性妊娠:

雌鼠与不孕雄鼠(如结扎后)交配,或用不同方式刺激宫颈后可以造成假性妊娠,可持续孕期15~16天。

3.小鼠在生物医学研究中的应用

1、各种筛选性实验

2、生物效应测定和药物的效价比较试验:

主要用封闭群小鼠作血清、疫苗等生物鉴定工作。

3、药物毒性试验,如LD50

4、肿瘤学研究

5、微生物、寄生虫病学

大鼠

一、营养、代谢性疾病研究

二、药物学研究大鼠血压和血管阻力对药物反应敏感

三、炎症研究大鼠的踝关节对炎症反应很敏感

四、行为学研究大鼠具有行为情绪的变化特征,行为表现多样,情绪敏感,广泛应用于高级神经活动的研究。

如走迷宫。

一、发热及热原实验

二、免疫学研究免疫血清,各种血清的研制

三、动物血管疾病研究容易复制典型的高胆固醇血症、动脉粥样硬化动物模型,兔主动脉粥样硬化斑块,冠状动脉粥养病变与人的病变在组织学上有一定的差异。

最突出的差异是家兔呈现显著的高胆固醇血症(约为正常时的10~40倍),并且几乎在所有器官和组织内均有脂沉积。

(AS最佳模型是小型猪)

⏹医学教学和外科技术的研究

⏹临床前药物安全性评价

一.肿瘤研究皮肤黑色素发病率与人的相应肿瘤有许多共同点。

自发性,良性变恶性

二、心血管疾病

三、皮肤烧伤

四、免疫学研究

猕猴

1、 

作为人类传染性疾病的模型病毒性肝炎,AIDS病、结核杆菌、弓形体等

2、 

粥样硬化症

3、 

老年病动物模型

豚鼠

1.细菌学研究豚鼠对结核杆菌具有高度的易感性

2、研究VitC生理功能的重要动物模型

3、豚鼠的耳窝管对声波极为敏感,常用豚鼠进行内耳疾病研究

4、豚鼠皮肤对刺激反应灵敏,并近似于人。

常作为毒物对皮肤作用的研究,如化妆品。

转基因动物:

用DNA重组技术将人们所需要的目的基因导入动物的受精卵或早期胚胎内,使外源目的基因随细胞的分裂而增殖并在体内表达,且能稳定地遗传给后代的动物。

实验动物法规

一.我国主要的实验动物管理法规

1、《实验动物管理条例》(1988)

2、《实验动物质量管理办法》(1997)2001年修订:

取消大小鼠的普通级

3、《实验动物许可证管理办法(试行)》(2001)由八部委联合颁布

4、《实验动物种子中心管理办法》

5、《省级实验动物质量检测机构技术审查准则》

二.《实验动物许可证管理办法(试行)》本办法于2001年12月5日由科技部、卫生部、教育部、农业部、检疫总局、中医药管理局、解放军总后勤部卫生部联合印发执行。

三.广东省主要实验动物管理法规

1、《广东省实验动物管理办法》1988年

2、《广东省实验动物许可证管理细则(试行)》2002年

3、《关于在我省全面实施实验动物国家标准2001修订版的通知》2003年

4、《广东省实验动物管理条例》2010年6月2日第十一届人民代表大会常务委员会第十九次会议通过,颁布2010年10月1日实施。

四.实验动物伦理与福利

v实验动物伦理:

是指在实验动物生产、使用活动中,人对实验动物的伦理态度和伦理行为规范。

主要包括尊重实验动物生命价值、权利福利,在动物实验中审慎考虑平衡实验目的、公众利益和实验动物生命价值权利。

v实验动物福利:

是让实验动物在康乐的状态下生存,也就是为了使实验动物能够健康、快乐、舒适而采取的一系列行为和给动物提供的相应外部条件。

动物的三个需求

v维持生命的需要

v维持健康的需求

v维持舒适的需求

五大自由:

v享受不受饥渴的自由

v享受生活舒适的自由

v享受不受痛苦伤害和疾病威胁的自由

v享受生活无恐惧悲伤感的自由

v享受表达天性的自由

安死术:

指以人道的方法处死动物的技术,使动物在没有惊恐、痛苦的状态下安静地并尽可能短时间死亡。

结合学习的实验动物福利与伦理,谈谈在科研研究中如何遵守。

科研设计和动物使用:

3R原则,方案符合实验动物福利伦理要求。

工作人员:

维护实验动物福利,关爱实验动物,不得虐待实验动物。

抓取方法得当、态度温和、动作轻柔。

动物处死:

安死术。

处死现场,不宜有其他动物在场。

确认动物死亡后,方可妥善处置尸体。

实验动物福利伦理组织:

保证动物设施、环境符合要求,工作人员培训和学习,动物使用方案审查,监督动物使用情况。

<

1>

饲养过程中

动物设施、环境:

符合标准,定期检测

笼具、垫料、饲料、饮水:

符合标准

•笼具(定期清洗、消毒,孕、产期动物占最小面积110%以上);

•垫料灭菌、除尘,定期更换;

•饲料,满足妊娠期、哺乳期、术后恢复期的营养需要。

•禁食、禁水理由充分

护理:

实验犬、猪分娩,不能自理的幼子,异常动物

环境丰富化:

运动场(犬、猪)、玩具

2>

应用过程中

惊恐和疼痛减少到最低程度,实验现场避免无关人员进入

手术、解剖或器官移植等手术:

有效麻醉,术中、后的监测、镇痛和护理。

保定:

遵循“温和保定,善良抚慰,减少痛苦和应激反应”的原则

保定器具结构合理、规格适宜、坚固耐用、环保卫生、便于操作。

仁慈终点:

是指动物实验过程中,选择动物表现疼痛和压抑的较早阶段为实验的终点。

灵长类实验动物:

仅限于非用灵长类动物不可的实验,除非因伤病不能治愈而备受煎熬者,猿类灵长类动物原则上不予处死,实验结束后单独饲养,直至自然死亡。

3>

运输过程中

运输原则:

•安全、舒适、卫生的原则尽快完成。

•笼具:

合适,防止动物逃逸或其它动物进入、外部微生物侵袭和污染

•保证自由呼吸,必要时可提供通风设备。

•不应与感染性微生物、害虫及可能伤害动物的物品混装。

•监护和照料:

伤病或临产的怀孕动物。

•途中提供必要的饮食和饮用水:

运输时间较长。

运输注意事项:

•装、卸:

最后装,最先卸

•地面或水陆:

照料;

空运实验动物,发运方应将飞机航班号、到港时间等相关信息及时通知接收方,接收方接收后应尽快运送到最终目的地。

•温、高热、雨雪和寒冷等恶劣天气时,防护措施。

•专用运输工具,专用运输车应配置维持实验动物正常呼吸和生活的装置及防震设备。

•运输人员培训。

人类疾病模型

一.人类疾病动物模型是指生物医学研究过程中所建立起来的具有人类疾病模拟表现的动物实验对象及相关实

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