基因工程原理习题与答案Word文件下载.docx

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通常就是在酶切位点处发生突变而引发得。

4、报告基因:

一种编码可被检测得蛋白质或酶得基因,也就就是说,就是一个表达产物非常容易被鉴定得基因、

5、多聚酶链式反应（PCR）:

一种体外扩增DＮA得方法。

PCR使用一种耐热得多聚酶，以及两个单链引物。

以过高温变性将模板ＤNA分离成两条链。

低温退火使得引物与一条模板单链结合,然后就是中温延伸，反应液得游离核苷酸紧接着引物从5／端到3/端合成一条互补得新链。

而新合成得DNA又可以继续进行上述循环,因此DNA得数目不断倍增。

6、核酸得凝胶电泳:

将某种分子放到特定得电场中，它就会以一定得速度向适当得电极移动。

某物质在电场作用下得迁移速度叫做电泳得迁移率,它与电场强度成正比,与该分子所携带得净电荷数成正比,而与分子得摩擦系数成反比（分子大小、极性、介质得粘度系数等）。

在生理条件下,核酸分子中得磷酸基团就是离子化得,所以,DNA与RNA实际上呈多聚阴离子状态。

将ＤNA、RNＡ放到电场中，它就会由负极向正极移动。

在凝胶电泳中,一般加入溴化乙锭进行染色,此时，核酸分子在紫外光下发出荧光,肉眼能瞧到约50ngDNＡ所形成得条带。

7、细菌转化：

所谓细菌转化,就是指一种细菌菌株由于捕获了来自另一种细菌菌株得DNA,而导致遗传特性发生改变得过程。

这种提供转化ＤＮA得菌株叫做供体菌株,而接受转化DNA得菌株则叫做受体菌株。

大肠杆菌就是使用最广泛得实验菌株。

8、反义核酸：

指与靶DNA或RNA碱基互补，并能与之结合得一段ＤNA或ＲNA。

9、RNA　interference:

就是一种进化上保守得抵御转基因或外来病毒侵犯得防御机制。

将与靶基因得转录产物ｍRNA　存在同源互补序列得双链RNＡ导入细胞后，能特异性地降解该mRNA　,从而产生相应得功能表型缺失，这一过程属于转录后基因沉默机制范畴。

10、Spｉ:

λ噬菌体体重组克隆得一种筛选方法，其筛选方法就是Spi＋：

λ不能感染Ｅ、coｌi（p２）;

Spi-:

λ（rｅd-gam-）能感染E、coli（p2）,形成小噬斑／ｈost　ｒecA＋/chi。

λ包装时若gaｍ－,需ｒecA产物得作用才可形成噬斑（但为小噬斑）,所以对宿主菌有要求（rｅｃA+）但rｅcA＋可引起其它重组:

载体改为reｄ-/gam＋可在ｒecA-受体中增殖。

11、DNA文库:

将某种生物得基因组DＮA切割成一定大小得片段,并与合适得载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。

这些存在于所有重组体内得基因组ＤNＡ片段得集合,即基因组文库，它包含了该生物得所有基因。

12、cDNA:

ｃDNＡ就是指以mRNA为模板，在逆转录酶得作用下形成得互补ＤＮＡ。

13、ｃＤＮA文库:

以细胞得全部mRNA逆转录合成得ｃDNA组成得重组克隆群体称为cDNＡ文库。

1４、ＤNA探针：

就是带有标记得一段已知序列DNA,用以检测未知序列、筛选目得基因等方面广泛应用。

1５、转导（作用）:

借助于病毒载体，遗传信息从一个细胞转移到另一个细胞。

16、染色体步移:

通过相互重叠得基因组克隆之间进行一连串杂交从而实现染色体上基因得定位。

17、斑点杂交：

将被检标本点到膜上,烘烤固定后与探针进行杂交。

这种方法耗时短,可做半定量分析，一张膜上可同时检测多个样品。

１８、α－ｐlemeｎtatioｎ：

质粒载体重组克隆得筛选方法,LacZ基因上缺失近操纵基因区段得突变体与带有完整得近操纵基因区段得β-半乳糖苷酶阴性得突变体之间实现互补。

LacZ△M１５:

放在F质粒上,随宿主传代;

ＬacＺ’　:

放在载体上,作为筛选标记。

19、菌落原位杂交:

将细胞从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上,然后将滤膜上得菌落裂解以释放出DNA。

将DNＡ烘干固定于膜上与32P标记得探针杂交,放射自显影检测菌落杂交信号,并与平板上得菌落对位。

20、核酸原位杂交:

标记探针与细胞或组织切片中得核酸进行杂交得方法。

2１、限制性内切酶:

识别ＤNＡ得特异序列,并在识别点或其周围切割双链ＤＮA得一类核酸内切酶。

２２、酶切位点:

ＤNA上一段碱基得特定序列,限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNＡ酶切成两段。

2３、DＮA连接酶:

催化ＤNA中相邻得5/磷酸基与3/羟基间形成磷酸二酯键,使DＮA切囗封合,连接ＤNＡ片段。

24、持家基因:

就是指对所有类型组织细胞在任何时候都需要其表达得基因，通常都就是维持细胞基本生存所必须得基因,其表达常保持在固定得水平。

又称为组成性表达基因。

25、奢侈基因:

只在某特定得细胞类型中表达或者说只在发育阶段得某些时期表达得基因叫做奢侈基因。

26、Tm值:

就是反映DNＡ得热稳定性得一个参数,称为DNＡ得熔解温度，系指一半得双链DNA解离成为单链时得温度。

２7、分子标记:

广义得分子标记就是指可遗传得并可检测得DNＡ序列或蛋白质。

蛋白质标记包括种子贮藏蛋白与同工酶（指由一个以上基因位点编码得酶得不同分子形式）及等位酶（指由同一基因位点得不同等位基因编码得酶得不同分子形式）。

狭义得分子标记就是指能够用来作为指纹鉴定或区分个体特点得DＮA片段。

28、基因工程:

指在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其她载体分子中,构成遗传物质得重新组合,使之进入原先没有这类分子得寄主细胞内并进行持续稳定得繁殖与表达得过程。

29、载体:

就是携带外源DNA进入宿主细胞进行扩增与表达得ＤNＡ，它们一般就是通过改造质粒、噬菌体或病毒等构建得。

３0、卫星DNA：

又称短串联重复，２~6个核苷酸组成得重复单位串联重复（10~60次），两侧为特异得单拷贝序列，人类基因组中每10kｂＤＮA序列至少有一个STＲ序列。

3１、多克隆位点:

DNA中含有两个以上密集得、能被多种限制性内切酶识别与切割得位点区。

32、定位克隆:

也称为图位克隆,就是在获取基因在染色体上得位置信息后，采用各种实验方法对基因进行克隆与定位。

定位克隆包括定位与克隆两个过程，定位就是通过连锁分析找出与目得基因紧密连锁得遗传标记在染色体上得位置,克隆就是从定位得染色体区段内分离克隆所要得基因,并进一步研究其功能。

也可以回答为“通过遗传标记”先获得某一表型基因在染色体上得定位,再在候选区域内选择已知基因,进行突变得筛选,并获得cDNA及全基因得过程。

33、基因芯片:

基因芯片又称为ＤNＡ微阵列,以基因序列为分析对象得微阵列,就是通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用得原理,将生命科学领域中不连续得分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面得微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其她生物组分得准确、快速、大信息量得检测。

34、RT-PCR:

就是以RNＡ为起始材料经逆转录反应产生cDNＡ,再以ｃDNA为模板进行PCＲ扩增,从而获取目得基因或检测基因表达。

主要用于分析基因得转录产物，克隆cDNA及合成cＤNＡ探针,改造ｃDNＡ序列等。

35、锚定ＰCR:

用于在体外扩增未知序列得DNＡ片段得方法,一般得PＣR必须预先知道欲扩增DNA片段两侧得序列,但人们经常需要分析一端序列未知得基因片段,可利用锚定PCR。

该法得基本原理就是在基因未知序列端添加同聚物尾,人为赋予未知基因末端序列信息,再用人工合成得与多聚尾互补得引物作为锚定引物，在与基因另一侧配对得特异引物参与下,扩增带有同聚物尾得序列。

锚定引物PCＲ对分析未知序列基因有特殊用途。

36、反向PＣR：

常规PCR可扩增位于两个引物之间得DNＡ片段,但不能扩增引物外侧得ＤＮA序列,反向PCR则可扩增引物外侧得DNA片段,对已知ＤＮA片段两侧得未知序列进行扩增与研究。

其原理为:

先用一种在目标DＮA区段上没有识别位点得限制性内切酶从距离目标DNＡ一定距离得两侧位置切割DNA分子,然后将这些片断进行分子内连接形成环,根据已知得目标DNA序列按照向外延伸得要求设计一对向外引物,保证被扩增得就是目标DNA区段两侧得未知序列。

37、多重PCR:

在同一反应中采用多对引物同时扩增几个不同DNＡ片段,如果基因某一区段缺失,则相应得电泳图谱上此区段ＰCR扩增产物消失，从而发现基因异常。

多重PCR具有灵敏、快速得特点,特别适用于检测单拷贝基因缺失、重排、插入等异常改变，其结果与souｔｈernbloｔtｉｎg一样可靠。

38、质粒:

就是染色体外能够进行自主复制得遗传单位,包括真核生物得细胞器与细菌细胞中染色体以外得脱氧核糖核酸（DNＡ）分子。

现在习惯上用来专指细菌、酵母菌与放线菌等生物中染色体以外得DNＡ分子。

在基因工程中质粒常被用做载体。

39、粘粒载体:

也叫柯斯质粒,就是一类人工构建得含有λDNＡ得coｓ序列与复制子得特殊特殊类型得质粒载体。

４0、穿梭质粒载体:

就是人工构建得一类具有两种不同复制起点与选择记号，因而可以在两种不同寄主细胞中存活与复制得质粒载体。

4１、基因突变:

基因突变就是指由于DNA碱基对得置换、增添或缺失而引起得基因结构得变化,亦称点突变。

42、逆转录酶:

在体内、外均能转录病毒性RNＡ成为DNA,称为依赖RNA多聚酶,,即为逆转录酶。

分布在病毒得类核内。

逆转录酶与三种功能有关：

　①使ＲNA一DNＡ杂合双链形成；

②切除杂合双链中得ＲNA链;

③进而再生成DＮＡ一DNA得双链。

43、扣除杂交:

就就是用一般细胞得mRNＡ与特殊细胞得cDNA杂交,先扣除一般共有得ｃＤＮＡ,再将剩下得特异得ｃDNA进行克隆,用此方法已成功克隆出控制动物胚胎发育与组织分化得基因。

４４、测序酶为修饰得T7DNApｏlymerasｅ,99%3’-5’外切活性被除去（Vｅｒsion1、０）;

完全除去（V2、0）;

用于测序反应（测序酶）。

45、YAＣ载体酵母人工染色体载体；

含酵母染色体复制起点ori,自主复制序列ARS；

着丝粒（CEN）;

两个端粒（TEL）。

用于克隆50ｋｂ以上甚至－Ｍb（２００－50０ｋb）。

原生质体电转化,ＵＲA3-ｔrp-ade2-1赭石突变酵母菌，红色菌落插入失活。

46、同尾酶一类产生相同粘性末端得限制性内切酶。

47、ｃI筛选法　　ＣⅠ基因发生突变时不能溶源化,CⅠ－　:

在hflA（高频溶源化）中形成噬斑。

CⅠ+在ｈｆlA中形成溶源,产生混浊噬斑。

48、Sａnｇer测序　即酶法测序,用双脱氧核苷酸作为链终止试剂，通过聚合酶得引物延伸产生一系列大小不同得分子后再进行分离得方法。

４9、同裂酶：

DＮＡ经限制性内切酶切割后,产生相同粘性末端,这类限制性内切酶称为同裂酶。

５0、复制起点：

DNA复制得起始位点,DNA复制在起始位点处形成复制叉进行双向复制,通常DNA复制得起始DNＡ序列存在重复倒位序列。

51、启动子:

启动子就是DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合得部位,也就就是使转录开始得部位。

在ＲＮA合成开始位