高三一轮复习选修一微生物的培养与应用经典习题Word格式文档下载.doc

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B

2．（2012年高考北京卷）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是（　　）

A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中

B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上

C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上

D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上

本题主要考查几种常见生物学实验对无菌操作的要求。

生产果酒和腐乳时对无菌的要求不是很高，接种不需要进行严格的无菌操作；

土壤浸出液中含有多种杂菌，所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时，不进行严格无菌操作也不会影响实验结果；

植物组织培养技术成功的关键是无菌条件，若接种时不进行严格无菌操作将可能导致实验失败，故C项符合题意。

C

3．（2013年高考新课标全国卷Ⅱ）临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。

实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。

回答下列问题：

（1）为了从样本中获取致病菌单菌落，可用________法或________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2）取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A________；

含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B________；

含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；

含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素________。

本题主要考查微生物培养的相关知识。

（1）将细菌接种到固体培养基上的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

（2）由

（1）获取的致病菌单菌落，经过适当稀释，用涂布法接种至固体培养基表面进一步培养。

（3）在检测致病菌对抗生素的敏感性实验中，若含A种抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明周围的致病菌死亡，该致病菌对A种抗生素敏感；

若含B种抗生素的滤纸片周围没有出现透明圈，说明致病菌对B种抗生素不敏感；

若含C种抗生素的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A的弱；

若含D种抗生素的滤纸片周围透明圈也比含A的小，说明A、B、C、D四种抗生素的杀菌效果最显著的为A。

透明圈中出现的菌落为耐药菌。

（4）根据（3）中分析，为达到抗菌目的最好选用抗生素A。

（1）划线　稀释涂布（或涂布）

（2）涂布

（3）敏感　不敏感　该致病菌对C的敏感性比对A的弱　耐药菌

（4）A

4．（2013年高考四川卷）普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有________________________________________________________________________。

为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。

②、③过程需重复几次，目的是________________________________________________________________________。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。

该同学的接种方法是________；

推测该同学接种时可能的操作失误是________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是________________________________________________________________________。

（4）用凝胶色谱法分离α淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。

本题考查生物技术实践与基因工程在生产生活中的应用。

（1）构建基因表达载体时需限制酶和DNA连接酶。

为筛选可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种，平板内的固体培养基应以淀粉作为唯一碳源。

②、③过程需重复几次，目的是进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌。

（2）分析图乙平板中经培养后的菌落分布状况可知，菌落分布不均匀，此现象可能是该同学涂布不均匀所致。

（3）工程酵母菌与普通酵母菌相比，直接利用淀粉的能力强，分解淀粉产生葡萄糖的能力强，从而使酒精发酵产生CO2的速率更快，因此培养工程酵母菌的发酵罐需要先排气。

（4）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，移动速度较快。

而相对分子质量较小的蛋白质能进入凝胶内部，移动路径较长，移动速度也较慢。

（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶　淀粉

进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌

（2）稀释涂布平板法　涂布不均匀

（3）工程酵母　工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快

（4）小

5．有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。

某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。

回答问题：

（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以______为唯一碳源的固体培养基上。

从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。

（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。

无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

（1）可以将所需要的微生物从混杂的微生物群中分离出来的培养基为选择培养基。

欲筛选出能降解原油的菌株，则培养基中应只含有原油而无其他碳源，这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，能降解原油的细菌才能在只含原油这一碳源的培养基上生存。

（2）分离纯化菌种时，接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单菌落，以便于纯化菌种。

（3）降解原油能力越强的菌株，在菌落周围形成的分解圈越大。

（4）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌（如接种环）、干热灭菌（如培养皿）和高压蒸汽灭菌（如培养基）等。

无菌技术要求整个实验操作都要在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染。

（1）原油　选择　

（2）平板划线法　稀释涂布平板法　（3）强　（4）干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰

课时高效训练

一、选择题

1．关于微生物的实验室培养技术，下列表述正确的是（　　）

A．溶化时将称好的牛肉膏从称量纸上直接倒入烧杯

B．常见的消毒方法包括灼烧、煮沸、紫外线和喷洒化学试剂等

C．配制固体培养基时加入琼脂，其目的是为微生物生长提供碳源

D．用移液管稀释菌液时，吹吸三次的目的是使菌液与水充分混匀

本题考查微生物的培养以及培养基的配置和消毒的方法等。

称好的牛肉膏要连同称量纸一起放入烧杯，待牛肉膏与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸；

灼烧属于灭菌方法，不属于消毒方法；

琼脂是作为固体培养基的凝固剂，而不是为微生物提供碳源；

吹吸三次可以使菌液充分混合均匀，使实验结果更加准确。

D

2．欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（　　）

A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释

B．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板

C．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为对照

D．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌

本题考查土壤中分解尿素的细菌的分离实验操作过程。

在以尿素为碳源的培养基中加入酚红指示剂，指示剂变红说明该菌种能分解尿素；

而含刚果红的培养基是用于鉴别分解纤维素的细菌。

3．分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是（　　）

A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上

B．富集培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少

C．经稀释培养后，用刚果红染色

D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上

经选择培养后，再经稀释，才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上；

富集培养可省略；

经稀释培养后，用刚果红染色；

设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物。

A

4．某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性）。

科学家用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中列出的菌株类型。

依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（注：

L—亮氨酸；

S－链霉素；

“＋”—加入：

“－”—不加入。

如，L－：

不加入亮氨酸；

S＋：

加入链霉素）（　　）

本题考查用选择培养基选择特定类型的菌株。

需要亮氨酸的菌株对链霉素敏感，因此筛选不需要亮氨酸的菌株需要在没有亮氨酸且无链霉素的培养基上培养；

而筛选出抗链霉素的菌株需要在培养基中加入链霉素，而筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株需要加入链霉素，不加亮氨酸，根据这一要求只有B符合。

二、非选择题

5．

（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________、________和渗透压等条件。

由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、________、____________等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。

（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________（消毒、灭菌）；

操作者的双手需进行清洗和________；

静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。

（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。

（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。

（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。

对于固体培养基应采用的检测方法是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（1）大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑温度、酸碱度和渗透压等条件。

（2）灭菌是用强烈的理化因