商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定.docx

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商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定

GB5513—85

　　本标准适用于商品粮食中还原糖和非还原糖含量的测定。

其中铁氰化钾法主要适用于小麦粉。

1　还原糖测定

1.1　铁氰化钾法

1.1.1　仪器和用具

　磨口带塞锥形瓶：

100ml；

　量筒：

50ml、25ml；

　移液管：

5ml；

　玻璃漏斗；

　试管：

直径1.8～2.0cm，高约18cm；

　铝锅：

作沸水浴用；

　电炉：

2000W；

　铁丝笼：

放置试管用；

　试管架；

　锥形瓶：

100ml；

　微量滴定管：

5ml或10ml（刻度0.02ml）；

　分析天平：

感量0.0001g。

1.1.2　试剂

　95％乙醇；

　乙酸缓冲液：

3ml冰乙酸、6.8g乙酸钠和比重1.84的硫酸4.5ml，混合后用水稀释至1000ml；

　12％钨酸钠溶液：

12g钨酸钠Na2WO4·2H2O溶于100ml水中；

　0.1N铁氰化钾溶液：

32.9g干燥纯净的铁氰化钾与44.0g碳酸钠溶于1000ml水中；

　乙酸盐溶液：

70g纯氯化钾和40g硫酸锌溶于水中，再加入200ml冰乙酸，再用水稀释至

1000ml，混匀；

　10％碘化钾溶液：

10g纯碘化钾溶于100ml水中，再加一滴饱和氢氧化钠溶液；

　1％淀粉溶液：

1g可溶性淀粉，用少量水润湿调和后，倒入沸水100ml，继续煮沸，搅拌直至溶液清晰；

　0.1N硫代硫酸钠溶液（按GB5490—85《粮食、油料和植物油脂检验　一般规则》附录B进行配制和标定）。

1.1.3　操作方法

　提取样品液：

精确称取粉样5.675g于100ml磨口锥形瓶中，用5ml乙醇浸湿全部试样，再加入

50ml乙酸缓冲液，摇匀后再加入2ml钨酸钠溶液，在振荡器上混合振摇5min，取出过滤，弃去最初几滴滤液，收集滤液于干净锥形瓶中，此滤液即为样品测定液。

另取一锥形瓶不加试样，同上操作，滤液即为空白液。

　氧化：

精确吸取样品液5ml于试管中，再精确加入5ml铁氰化钾溶液，混合后立即将试管（置铁丝笼中，每次可同时作若干样品测定）放入剧烈沸腾的水浴中，并使管中液面在沸水液面下3～4cm，加热准20min后取出，立即用冷水迅速冷却。

　滴定：

将试管内容物倾入100ml锥形瓶中，用25ml乙酸盐溶液洗荡试管一并倾入锥形瓶，加5ml10％碘化钾，混匀后，立即用0.1N硫代硫酸钠滴定至淡黄色，再加1ml淀粉溶液，继续滴定直至溶液蓝色消失，记下用去硫代硫酸钠溶液体积（V1）。

　空白试验：

吸取空白液5ml，代替样品液同，记下消耗的硫代硫酸钠溶液体积（V0）。

1.1.4　结果计算

　　还原糖含量先按公式

（1）计算出氧化样品液中“还原糖”所需0.1N铁氰化钾溶液体积（V3），再根据此体积（ml）查表1，即可查得试样中含还原糖（以麦芽糖计算）的百分数。

按公式

（1）计算：

……………………………………………………

（1）

式中：

V0──

滴定空白液消耗铁氰化钾溶液体积，ml；

V1──

滴定样品液消耗铁氰化钾溶液体积，ml；

V3──

氧化样品液中还原糖所需0.1N铁氰化钾溶液体积，ml；

N──

硫代硫酸钠溶液实际当量浓度。

　　双试验结果允许差不超过0.05％，求其平均数，即为检验结果。

检验结果取小数点后第二位。

1.1.5　0.1N铁氰化钾（ml）与还原糖含量对照可查表1。

　　注：

还原糖含量以麦芽糖计算。

1.2　费林氏液法

1.2.1　仪器和用具

　古氏坩埚：

25ml；

　抽滤瓶：

500ml；

　真空泵或水泵等。

1.2.2　试剂

　费林氏溶液；

　　a．　碱性酒石酸铜甲液：

取硫酸铜结晶34.639g，加适量水溶解，加硫酸0.5ml，再加水至500ml，用精制石棉过滤；

　　b．　碱性酒石酸铜乙液：

取酒石酸钾钠173g与氢氧化钠50g，加适量水溶解，稀释至500ml，用精制石棉过滤，贮存于具有橡皮塞的玻璃瓶内。

　精制石棉：

先用3N盐酸将石棉浸泡2～3日后，用水洗净。

再加10％氢氧化钠溶液浸泡2～3日，倾去溶液，用热碱性酒石酸铜乙液浸泡数小时，用水洗净。

再以3N盐酸浸泡数小时，用水洗至不呈酸性，使之成为微细的软纤维，用水浸泡贮存于玻璃瓶内，作填充古氏坩埚用。

　0.1N高锰酸钾标准溶液。

　1N氢氧化钠溶液：

取氢氧化钠4g，加水溶解至100ml。

　硫酸铁溶液：

取硫酸铁50g，加水200ml溶解后，慢慢加入硫酸100ml，冷后加水至1000ml。

　3N盐酸：

取盐酸25ml，加水至100ml。

1.2.3　操作方法

表1

0.1NK3

Fe（CN）6

ml

还原糖

％

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.80

0.90

1.00

1.10

1.20

1.30

1.40

1.50

1.60

1.70

1.80

1.90

2.00

2.10

2.20

2.30

2.40

2.50

2.60

2.70

2.80

2.90

3.00

3.10

3.20

3.30

3.40

3.50

3.60

3.70

3.80

3.90

4.00

4.10

4.20

4.30

4.40

4.50

4.60

4.70

4.80

4.90

5.00

5.10

5.20

5.30

5.40

5.50

5.60

5.70

5.80

5.90

6.00

6.10

6.20

6.30

6.40

6.50

6.60

6.70

6.80

6.90

7.00

7.10

7.20

7.30

7.40

7.50

7.60

7.70

7.80

7.90

8.00

8.10

8.20

8.30

8.40

8.50

8.60

8.70

8.80

0.05

0.10

0.15

0.20

0.25

0.31

0.36

0.41

0.46

0.51

0.56

0.60

0.65

0.71

0.76

0.80

0.85

0.90

0.96

1.01

1.06

1.11

1.16

1.21

1.26

1.30

1.35

1.40

1.45

1.51

1.56

1.61

1.66

1.71

1.76

1.82

1.88

1.95

2.01

2.07

2.13

2.18

2.25

2.31

2.37

2.44

2.51

2.57

2.64

2.70

2.76

2.82

2.88

2.95

3.02

3.08

3.15

3.22

3.28

3.34

3.41

3.47

3.53

3.60

3.67

3.73

3.79

3.85

3.92

3.98

4.06

4.12

4.18

4.25

4.31

4.38

4.45

4.51

4.58

4.65

4.72

4.78

4.85

4.92

4.99

5.05

5.12

5.19

　试样处理：

准确称取试样10～20g放入250ml容量瓶中，加水200ml，在45℃水浴中加热1h，并时时振摇，到时待冷后加水至刻度，静置后，吸取澄清液200ml于另一250ml容量瓶中，加碱性酒石酸铜甲液10ml和1N氢氧化钠溶液4ml，摇匀，加水至刻度，静置30min，用干燥滤纸过滤，弃去初滤液，其余滤液供测定还原糖和非还原糖用。

　滴定：

精密吸取制备的试样溶液50ml于400ml烧杯中，加入碱性酒石酸铜甲、乙液各25ml，盖一表面皿，置电炉上加热，在4min内沸腾，再煮沸2min，趁热用铺有石棉的古氏坩埚（或垂融坩埚）抽滤，并用60℃热水洗涤烧杯和沉淀，至洗液不呈碱性为止。

将古氏坩埚放回原400ml烧杯中，加硫酸铁溶液25ml和水25ml，用玻棒搅拌，使氧化亚铜完全溶解，以0.1N高锰酸钾标准溶液滴定至微红色。

同时取水50ml，加碱性酒石酸铜甲、乙液各25ml，做试剂空白试验。

1.2.4　结果计算

　　相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜重量按公式

（2）计算：

x＝（V－V0）N×71.54

……………………………………………………

（2）

式中：

x──

相当于试样中还原糖重量的氧化亚铜的重量，mg；

V──

试样消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；

V0──

试样空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积，ml；

N──

高锰酸钾标准溶液的当量浓度；

71.54──

1N高锰酸钾标准溶液1ml相当于氧化亚铜的毫克数。

　　由所得的氧化亚铜重量，按附录A的表查出相当的还原糖（以葡萄糖计）的重量。

　　还原糖干基含量按公式（3）计算：

……………………………………………………（3）

式中：

A──

由附录A表中查得的还原糖（以葡萄糖计）的重量，mg；

W──

试样重量，g；

M──

试样水分百分率，％；

　　双试验结果允许差及小数点位数同

　注：

①

煮沸时间必须控制在4min内。

可先取水50ml加碱性酒石酸铜甲、乙液各25ml，调节好适当的火力后，再作样品。

②

煮沸后的溶液如不呈蓝色，表示糖量过高，可减少试样重量，另作。

2　非还原糖测定

2.1　铁氰化钾法

　　所需仪器和用具同

　　所需试剂同

2.1.1　操作方法

　　分别吸取ml于试管中，先在剧烈沸腾的水浴中加热15min（样品液中非还原糖转化为还原糖），取出迅速冷却后，加入碱性铁氰化钾溶液5ml，混匀后，再放入沸腾水浴中继续加热20min，取出迅速冷却后，立即按，分别记下滴定样品液及空白液消耗硫代硫酸钠体积（）。

2.1.2　结果计算

　　非还原糖含量先按公式（4）计算，求出氧化样品液中总“还原糖”所需0.1N铁氰化钾溶液所需的体积（V4），然后减去单独氧化样品液中“还原糖”所需的铁氰化钾溶液体积（V3）〔公式

（1）〕，最后再根据V4－V3的结果（ml）查表2，即可查得试样中含非还原糖（以蔗糖计）的百分数。

……………………………………………………（4）

式中：

──

滴定空白液消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml；

──

滴定样品液消耗硫代硫酸钠溶液体积，ml；

V4──

氧化样品液中总还原糖所需0.1N铁氰化钾溶液体积，ml；

N──

硫代硫酸钠溶液当量浓度。

　　双试验结果允许差不超过0.05％，求其平均数，即为测定结果。

测定结果取小数点后第二位。

2.1.3　0.1N铁氰化钾（ml）与非还原糖含量对照可查表2。

　　注：

非还原糖含量以蔗糖计算。

表2

0.1NK3Fe（CN）6

ml

非还原糖

％

0.10

0.20

0.30

0.40

0.50

0.60

0.70

0.80

0.90

1.00

1.10

1.20

1.30

1.40

1.50

1.60

1.70

1.80

1.90

2.00

2.10

2.20

2.30

2.40

2.50

2.60

2.70

2.80

2.90

3.00

3.10

3.20

3.30

3.40

3.50

3.60

3.70

3.80

3.90

4.00

4.10

4.20

4.30

4.40

4.50

4.60

4.70

4.80

4.90

5.00

5.10

5.20

5.30

5.40

5.