维生素C含量的测定.doc
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食品保鲜技术课程实验报告
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维生素C含量的测定
一、实验目的与原理
维生素C又称抗坏血酸，分子式C6H8O6还原型维生素C是新鲜果蔬营养成分的重要部分。
（一）二氯酚靛酚法：
天然的抗坏血酸有还原型和脱氢型两种，还原型抗坏血酸分子结构中有烯醇（COH=COH）存在，故为一种极敏感的还原剂，它可失去两个氢原子而氧化为脱氢型抗坏血酸。
染料2,6—二氯酚靛酚钠（C12H6O2NCl2Na）作为氧化剂，可以氧化抗坏血酸而其体身亦被还原成无色的衍生物。
2,6—二氯酚靛酚钠盐易溶于水，其碱性或中性水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈桃红色，这个变化用来鉴别滴定的终点。
由于抗坏血酸在许多因素影响下都易发生变化，因此，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。
（二）碘量法：
抗坏血酸具有还原性，可被I2定量氧化，因而可用I2标准溶液直接测定。
通过消耗碘溶液的体积及其浓度，计算试样中维生素C的含量。
化学反应式如下：
KIO3+5KI+3H2SO4=3K2SO4+3I2+3H2O
二、仪器和用品
1、实验材料
果蔬样品、维生素C标准溶液，1%草酸溶液、2,6-二氯靛酚溶液、10%KI溶液，淀粉液、0.001N标准溶液
2、仪器
滴定管、容量瓶、移液管、烧杯、研钵、漏斗、分析天平容量瓶，滴管
三、实验步骤
1.试剂制备与标定
①标准抗坏血酸溶液：
精确称取抗坏血酸20mg，用1％草酸溶解于100ml容量瓶中，用1%草酸定容。
用移液管移取5ml到50ml容量瓶中，并加1％草酸定容。
②2,6—二氯酚靛酚溶液配制及标定：
称取2,6—二氯酚靛酚即2,6—二氯吲哚酚纳50mg，溶于200ml热水中（热水中溶解52mgNaHCO3），冷却后加水50ml，过滤后盛于棕色药瓶内，避光保存。
标定：
吸取标准抗坏血酸溶液5ml，加1％草酸5ml、20ml蒸馏水，以2,6—二氯酚靛酚染料溶液滴定，至桃红色15秒不褪即为终点。
滴定的溶液的体积相当于0.1mg维生素C，计算出每一毫升染料溶液能氧化的抗坏血酸毫克数。
③待测液的制备：
取10g磨碎的样品液，加1％草酸溶液稀释后无损地移入100ml容量瓶，加1％草酸溶液定容至2500ml，过滤，备用。
2.样品Vc的测定
1%草酸液
（1）二氯酚靛酚滴定法
20g1%草酸液
样品10g研成浆状定容至100ml容量瓶
过滤
250ml容量瓶，草酸定容
200ml锥形瓶
移取10ml
20ml蒸馏水
滴至终点（淡红色，15s内不褪去）
2,6—二氯酚靛酚
（2）碘量法
将定容后的样品待测液用移液管吸取10ml于碘量瓶，用移液管准确加入2ml2NH2SO4溶液，1ml10%KI溶液及1ml淀粉液，摇匀加塞，避光静置2min，用0.001N标准溶液滴定至终点（淡蓝色30s内不褪色），记录并计算。
3.计算
（1）二氯酚靛酚滴定法
Vit.C（mg/100g）=（V*T*100）/W
式中：
V-滴定样品所用的2，6-二氯酚靛酚体积-空白滴定所用的2，6-二氯酚靛酚体积，ml
T-1毫升2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数。
W-滴定时吸取的样品重，g
（2）碘量法
Vit.C（mg/100g）=0.088*y*b/（a*x）*100
式中：
y-消耗的0.001N标准溶液体积，ml
X-移取的滤液体积，ml
0.088-1ml0.001N标准溶液相当于0.088mgVit.C
a/b-样品稀释倍数
四、实验数据记录
样液重：
10.0080g
样品为蔬菜
第一次
第二次
第三次
平均值
空白
法一：
耗用2，6-二氯酚靛酚体积（ml）
1.78
1.77
1.78
1.78
0.15
法二：
耗用KIO3体积（ml）
1.60
1.62
1.58
1.60
0.10
样液重：
10.1510g
样品为橙汁
第一次
第二次
第三次
平均值
空白
法一：
耗用2，6-二氯酚靛酚体积（ml）
0.85
0.82
0.84
0.84
0.15
法二：
耗用KIO3体积（ml）
0.70
0.72
0.70
0.71
0.10
2，6-二氯酚靛酚染料标定
第一次
第二次
第三次
平均值
耗用2，6-二氯酚靛酚溶液体积（ml）
3.30
3.50
3.40
3.40
五、计算过程：
1、2，6-二氯酚靛酚染料标定
1ml2，6-二氯酚靛酚染料溶液相当的抗坏血酸毫克数
T=0.1/（（3.30+3.50+3.40）/3）=0.0294mg
2、蔬菜相关计算
二氯酚靛酚滴定法
Vit.C（mg/100g）=（V*T*100）/W
=
碘量法
Vit.C（mg/100g）=0.088*y*b/（a*x）*100
=
3、橙汁的相关计算
二氯酚靛酚滴定法
Vit.C（mg/100g）=（V*T*100）/W
=
碘量法
Vit.C（mg/100g）=0.088*y*b/（a*x）*100
五、实验讨论
1.实验汇总表
类别
方法
2,6—二氯酚靛酚滴定法测得的含量（mg/100g）
碘量法测得含量（mg/100g）
菜叶
35.91
33.00
橙汁
14.99
13.22
2.结果讨论
1）从上表看出菜叶中维生素c含量远远高于橙汁。
2）用两种方法测定维生素C的含量时，二氯酚靛酚法测定值都比碘量法高，其原因是二氯酚靛酚存在还原型的脱氢抗坏血酸，与有机物结合在一起，使测定值偏高。
3）环境温度影响碘量法的灵敏度，在25度下最灵敏，实验时的温度在25度左右，所以碘量法较为精准。
但原料中存在淀粉含量的多少会影响终点，使终点提前出现，所以淀粉含量高的食物不能用碘量法来测定其维生素C含量。
4）由于两种原料都有颜色，滴定终点颜色偏离，使实验产生偏差。
5）用两种方法法测定维生素C的含量时，取样品时应尽量减少操作时间，并避免与铜、铁等金属接触以防止氧化。
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