药物分析实验讲义11药本Word格式文档下载.docx

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硫代乙酰胺在弱酸性（pH3．5醋酸盐缓冲液）条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生（以pb2+为代表）生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定量标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较,颜色不得更深。

三、操作步骤

取本品0.6g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解使成25ml，再加稀硝酸10ml；

加水使成约40ml，摇匀，即得供试溶液。

另取标准氯化钠溶液（10µ

gCl-/ml）6.00ml，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10ml，加水使成约40ml，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1ml，用水稀释至50ml，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，观察比较，即得。

取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，移至50ml纳氏比色管中，加水稀释使成45ml，加硫氰酸铵溶液（30→100）3ml，摇匀，如显色，与标准铁溶液（10µ

gFe/ml）2.00ml用同一方法制成的对照液比较，不得更深。

取纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液（10µ

gPb/ml）2.00ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml后，加水稀释使成25ml。

取本品4.0g，置于乙管，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，加水稀释使成25ml；

再在甲乙两管中分别加入硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深（含重金属不得过百万分之五）。

四、注意事项

1.限度检查应遵循平行操作原则，即供试管与对照管的实验条件应尽可能一致，包括实验用具的选择、试剂与试液的量取方法及加入顺序、反应时间的长短等。

2.比色、比浊操作，一般均在纳氏比色管中进行，在选用比色管时，必须注意使管的大小相等，玻璃色质一致，最好不带任何颜色，管上的刻度高低一致，如有差别，不应超过2mm。

3.在比色、比浊前应用旋摇的方法使比色管内试剂充分混匀。

比色方法是将两管同置于白色背景上，从侧面或自上而下观察；

比浊方法是将两管同置于黑色背景上，从上向下垂直观察。

4.比色管用后应立即冲洗，避免久置，注意不能用毛刷或去污粉等水中不溶物洗涤，以免划出条痕损伤比色管内壁而影响比色，最好用铬酸洗液洗涤，然后用自来水及纯化水依次冲洗干净。

5.一般情况下可取1份供试品进行检查。

如结果不符合规定或在限度边缘时，应对供试品和对照品各复检2份，方可判定。

6.重金属:

硫代乙酰胺试液配制方法：

临用前取自冰箱中保存的4％硫代乙酰胺液1ml，加混合溶液【由1mol/L氢氧化钠溶液15ml、水5ml及甘油20ml组成】5ml，置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。

五、思考题

1.试计算本实验中氯化物、铁盐等一般杂质的限量是多少？

2.葡萄糖的检查项目中哪些属于一般杂质，哪些属于特殊杂质？

试述它们的来源及检查意义。

3.氯化物、重金属检查中的操作注意事项有哪些，氯化物比浊检查时为什么应将反应液稀释后再加沉淀剂？

4.如何正确选用各项实验中的用具及仪器？

实验二盐酸普鲁卡因注射液的含量测定

掌握提取容量法的原理及方法。

（一）提取容量法

提取容量法是根据有机碱盐类能溶于水而游离碱不溶于水的特性，采用碱化后有机溶剂提取分离的方法进行测定。

用反应式表示如下：

NH2NH2

+NH3·

H2O——→+NH4Cl+H2O

COOCH2CH2N（C2H5）2·

HClCOOCH2CH2N（C2H5）2

2+H2SO4——→·

H2SO4

2

COOCH2CH2N（C2H5）2COOCH2CH2N（C2H5）2

ResidualH2SO4+2NaOHNa2SO4+2H2O

计算公式：

药典规定，本品含盐酸普鲁卡因（C13H20N2O2·

HCl）应为标示量的95.0~105.0%。

精密量取本品适量（约相当于盐酸普鲁卡因0.2g）置分液漏斗中，加氨试液3ml成碱性后，分次用氯仿（依次15，10，10ml）振摇提取，使普鲁卡因均溶入氯仿中，每次提取液滤过，合并氯仿液，滤器用少量氯仿洗净，洗液与滤液合并后在水浴上蒸发至近干，加中性醇5ml与硫酸滴定液（0.025mol/L）25.00ml，在水浴上加热至氯仿的臭气完全消失，放冷，加甲红指示液数滴（2～4滴），用氢氧化钠滴定液（0.05mol/L）滴定剩余的硫酸，并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml硫酸滴定液（0.025mol/L）相当于13.64mg的C13H20N2O2·

HCl。

1.提取容量法操作要点

（1）分液漏斗采用甘油-淀粉糊做润滑剂。

其配制方法为：

取甘油22g，加入可溶性淀粉9g，加热至140℃，保持30分钟并不断搅拌，放冷，即得。

（2）样品液碱化前宜先加氯仿，以免游离基析出，沉淀于分液漏斗活塞部分，而在操作中损失。

（3）提取液应用氯仿湿润的棉花滤过。

（4）加入标准酸溶液前，氯仿液只能蒸至近干，而加入标准酸溶液后，必须完全蒸除氯仿，以免影响含量测定结果。

（5）蒸干残余氯仿，只需在水浴上敞口除去，并时加振摇，使氯仿滴分散，便于除尽。

（6）接触过氯仿提取液的容器，使用完毕后应先以醇荡洗，然后水洗，再以温热的清洁液处理，洗净备用。

实验三维生素B1的分析

1.掌握重量法、直接分光光度法的基本原理和方法；

2.比较两种含量测定方法的优缺点。

维生素B1在酸性溶液中和硅钨酸作用产生沉淀，根据沉淀的重量即可计算其含量。

维生素B1分子中具有共轭双键结构，故具紫外吸收，在一定波长下测定吸收度即可定量。

药典规定，本品含维生素B1（C12H17ClN4OS·

HCl）应为标示量的90.0~110.0%。

（一）重量法

取本品15片（15mg）（或5mg的25片），精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B150mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（1→20）60ml，振摇，使维生素B1溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液20ml，精密量取续滤液（需澄明）50ml，煮沸，立即滴加硅钨酸试液2ml，继续煮沸2分钟，用80℃恒重的垂熔坩埚滤过，沉淀先用煮沸的盐酸溶液（1→20）20ml分次洗涤，再用水10ml洗涤1次，最后用丙酮洗涤两次，每次5ml，沉淀在80℃干燥至恒重，精密称定，与0.1939相乘，即得供试量中含有C12H17ClN4OS·

HCl的重量。

（二）直接分光光度法

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维生素B125mg），置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约70ml，振摇15分钟使维生素B1溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另一100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释至刻度，摇匀，照分光光度法，在246nm波长处测定吸收度，按C12H17ClN4OS·

HCl的吸收系数（）为421计算，即得。

1.重量法：

（1）实验前，首先将4号垂熔坩埚烘至恒重。

进行恒重操作时，必须注意干燥温度，冷却时间均应保持一致，并使用同一干燥器干燥，同一台天平称重。

（2）掌握平行原则，即坩埚和样品沉淀的恒重操作均应在同一条件下进行。

（3）沉淀具有吸湿性，称重应迅速，也可根据供试品重量，预先计算好沉淀重量，以加速称重速度。

（4）过滤煮沸后，应立即并逐滴加入沉淀剂（尤其是最初几滴更应缓慢加入，以便得到颗粒较大的沉淀），边滴边搅拌，以防止共沉淀产生，同时注意勿使溶液溅出（用小火）。

（5）加完沉淀剂，煮沸时间特别重要，煮沸时间不足，沉淀过细，容易穿过滤器，煮沸时间过长，沉淀会粘于壁上，造成转移困难，煮沸时间应不少于2分钟（煮沸5分钟也无影响）。

煮沸过程中蒸发的水分可随时补加。

（6）以倾斜法趁热过滤，即使沉淀尽量留在烧杯中，溶液尽可能转入坩埚内，每次洗涤时应充分搅拌沉淀，直至洗涤接近结束，方将沉淀定量转移至已经恒重的垂熔坩埚中。

（7）由于沉淀颗粒较细，易于沿壁“上行”而损失，建议在定量转移和洗涤时，溶液应通过玻璃棒并悬空注入坩埚体积的1/3。

同时，开始2～3次，抽滤力量不宜过猛，也不要抽得太干，以免沉淀漏掉。

若遇此现象，应将滤液反复抽滤至澄清。

（8）实验完毕，应及时将沉淀用水刷洗干净。

必要时可用丙酮浸泡，然后用水抽洗至滤液澄清，最后用丙酮抽洗一次备用。

如不用，应将垂熔坩埚于10%HNO3中保存，以保持其平衡状态，当下次使用时，沉淀不易漏下来。

1.重量法实验的成败关键有哪些，为什么要趁热过滤？

2.什么是换算因数，重量法中的换算因数是怎样得来的？

3.试比较此实验中所用二种方法在准确性、方法选择性等方面有何不同？

实验四复方磺胺甲恶唑片的质量分析

1.掌握双波长分光光度法的基本原理；

2.学会用单波长型分光光度法计进行双波长法测定；

3.熟悉复方制剂不经分离直接测定组分含量的方法。

双波长分光光度法消除干扰吸收的基本原理为：

在干扰组分的吸收光谱上吸收系数相同的两个波长处，若被测组分的吸收系数有显著差异，则可用于消除干扰吸收，即直接测定混合物在此两波长处的吸收度之差值，该差值与待测物浓度成正比，而与干扰物浓度无关。

A

0.7257nm

0.6←SMZ

0.5

0.4

0.3TMP→287nm

0.2

0.1304nm

200240280320λ（nm）

图5-1SMZ、TMP在0.1mol/L氢氧化钠液中的吸收光谱图

复方磺胺甲恶唑片是含磺胺甲基异恶唑（SMZ）及甲氧苄氨嘧啶（TMP）的复方制剂。

在0.1mol/L氢氧化钠溶液中，SMZ在257nm波长处有最大吸收；

TMP在此波长吸收最小并在304nm波长附近有一等吸收点，而SMZ在这两波长处的吸收度差异大（见图5-1），故选257nm为测定波长，在304nm波长附近选择供测定的参比波长。

同理，在加盐酸-氯化钾溶液（pH2.2）中，TMP在239nm波长处有最大吸收；

SMZ在此波长吸收最小并在295nm波长附近有一等吸收点，故选239nm为测定波长，在295nm波长附近选择供测定的参比波长。

从而不经分离求出SMZ和TMP的含量。

药典规定，本品每片中含磺胺甲基异恶唑（C10H11N3O3S）应为0.360～0.440g；

含甲氧苄氨嘧啶（C14H18N4O3）应为72.0～88.0mg。

1.磺胺甲基异恶唑取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲基异恶唑50mg与甲氧苄氨嘧啶10mg），置100ml量瓶中，加乙醇适量，振摇15分钟使磺胺甲基异恶唑与甲氧苄氨嘧啶溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，取续滤液作为供试品溶液；

另精密称取在105℃干燥至恒重的