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Keywords:

mitosisinterphaseprophasemetaphaseanaphasetelopha

实验原理

有丝分裂是植物体细胞进行的一种主要分裂方式。

有丝分裂的目的是增加细胞的数量而使植物有机体不断生长。

在有丝分裂过程中，细胞核内的物质能准确的进行复制，然后有规律的均匀分配到两个子细胞中去。

植物有丝分裂主要在根尖、节间、茎的生长点、芽及其他分生组织里进行。

将生长旺盛的植物分生组织经取材，固定、解离、染色、压片，可以观察到细胞有丝分裂的全过程。

实验用品

大蒜（Alliumsativum2n=16），carnoy固定液（由95%的乙醇和冰乙酸以3：

1的比例配置），1mol/L的HCl，石炭酸品红，水浴锅，显微镜，剪刀，矿泉水瓶，蒸馏水

实验步骤

1生根、取材与固定

采用水培法于暗处使大蒜生根，每天换水两次。

4天后，根长至2.0cm左右。

上午10：

00用剪刀将根尖剪下，并直接放入固定液中固定，以保持细胞真实的生活状态,避免操作过程中对细胞生活状态的破坏。

本次实验固定时间为14h。

2解离与水洗

本次实验采用了酸解法使细胞散开。

将1mol/L的HCl放入60℃的恒温水浴锅中,将固定好的根尖放入.解离4min。

用清水冲洗解离后的材料5次，洗去表面的HCl，并引起后低渗，利于压片。

3染色、压片与镜检、拍照

截取根尖上分生组织1/3左右于载玻片上，用镊子将分生组织碾碎；

滴上石炭酸品红染色5min。

染完后，盖上盖玻片，用解剖针轻敲盖玻片几次，以增强细胞扩散程度。

实验结果

通过上述实验方法获得了一系列分裂的照片，如图Ⅰ-1所示。

从这一系列图片我们可以看到有丝分裂是一个连续的过程，各期的特征如下所述：

间期（Interphase）：

图Ⅰ-1（a）所示，有丝分裂间期染色体以染色质形式存在，染色质缠绕成丝状的无规线团。

前期（Prophase）：

图Ⅰ-1（b）所示，染色体螺旋化，由无规线团逐渐变成比较清晰的染色体，核膜核仁消失。

中期（Metaphase）：

图Ⅰ-1（c）所示，染色体在分裂中期有序地排列在赤道板上，数目清晰，是染色体形态观察的最佳时期。

后期（Anaphase）：

图Ⅰ-1（d）所示，姐妹染色单体开始分离并在纺锤丝的牵引下移向两极。

末期（Telophase）：

图Ⅰ-1（e）所示，染色体继续走向两极，同时染色体也开始解螺旋，由染色体状态逐渐变为无序线团，核膜核仁复现。

讨论

1、大蒜根尖的固定时间在上午9：

00－11：

00和下午15：

00－17：

00为最佳。

因为此时是大蒜分裂的高峰期。

2、解离的时间要适当，大约4min，因为解离时间的长短与实验结果的好坏有非常直接的影响，时间过长，则不仅破坏分生组织之间的果胶与纤维素等物质，也使分生组织与伸长区脱离，染色效果将会降低，而过短，则又达不到分离细胞的结果。

3、在切取根尖时大约切从根尖开始算往上1.5mm左右，若切得太短，则只会看到成熟的根冠细胞，在视野中看不到分裂期细胞；

若切得太长，则会看到有很多伸长区的成熟细胞，从而影响实验结果。

4、染色时间不宜过长或过短，染色过深或过浅都会影响最终的实验结果。

5、压片时用拇指从上往下垂直用力且要避免载玻片与盖玻片之间的滑动，否则会使细胞之间重叠，影响观察。

6、观察时先用低倍镜找到分裂相的位置，再换高倍镜观察

实验二植物细胞减数分裂的制片与观察

本实验选取玉米雄花作为实验材料，首先将已固定好雄花的花药剥离出来，然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。

关键词：

减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期

Inthisexperiment,wechoseZeamaysasthematerial.Wegotalotofcellsinmeiosis.Thenwedisposedthecellsinordertoobservethewholeprocessesofthemeiosis.

meiosisleptonemazygonemapachynemadiplonemadiakineses

减数分裂是生物在形成配子时的一种特殊的分裂方式，是在性母细胞中进行的。

减数分裂产生的每个子细胞染色体数目减少一半。

并且第一次分裂前期特别长，其变化特别复杂，包括同源染色体配对、交换与分离等。

玉米雄花（Zeamays2n=20），carnoy固定液（由95%的乙醇和冰乙酸以3：

1的比例配置），铁矾，苏木精，恒温箱，冰乙酸，酒精灯，显微镜

实验方法

1、取材与固定（指导老师完成）

采集处于减数分裂时期的玉米雄花，采集时间为上午8：

30－10：

30和下午2：

00－4：

00。

采集的雄花直接放入新配制的carnoy固定液中固定一周（中间换固定液两次）。

2、花药剥离

减数分裂是同步分裂，由于每朵小花中的所有花药都处于同一时期，因此剥离的量要充足,以便在实验中能进行选择。

3、媒染、复染花药

在不伤害花药的前提下，使用镊子与解剖针玻璃花药并放入4%硫酸高铁铵（铁矾）水溶液中进行媒染，时间为4－24h。

媒染后，彻底水洗除净花药表面的铁离子。

之后放入0.5%的苏木精中染4－24h。

在25℃温箱中进行。

染完后再次彻底水洗。

除去表面染料。

4、制片、镜检与拍照

取一枚花药于载玻片上，滴上一滴45%冰乙酸，并在酒精灯上加热5秒钟。

材料加热之后，盖上盖玻片，用滤纸折叠成两层盖在盖片上，进行压片。

实验结果

通过上述实验方法得到以下图Ⅰ-2：

1、在花药剥离时要注意将颖片剥离干净，使用的镊子和解剖针不可伤害花药，否则花粉母细胞会从伤口处外流，影响实验效果

2、在挑选花粉粒的时候，应挑选粒大且饱满的，粒小而瘪的花粉往往发育不良。

3、媒染时间不宜过长或过短，染色过深或过浅都会影响最终的实验结果。

4、压片时用拇指从上往下垂直用力且要避免载玻片与盖玻片之间的滑动，否则会使细胞之间重叠，影响观察。

5、观察时先用低倍镜找到分裂相的位置，再换高倍镜观察

6、减数分裂过程是一个连续的过程，各时期之间没有明显的界限，只要符合这个时期的特征便可作为此时期的分裂相。

实验三植物细胞多倍体诱导的制片与观察

本实验选取大蒜作为实验材料，通过在培养液中施加秋水仙素的方法培养大蒜根尖细胞从而对其进行多倍体诱导，然后对根尖细胞进行固定、解离、染色、压片来观察细胞染色体加倍后的分裂相。

多倍体秋水仙素

Inthisexperiment,wechoseAlliumsativumasthematerial.WegotalotofactivityfloristiccellsthroughcultivatingtherootsofAlliumsativum.Thenweputcolchicineintothewater.Afterabout36hours,wedisposedthepolyploidcellsinordertoobservethemselves.Keywords:

polyploidycolchicine

多倍体是指细胞核内具有两个以上染色体组，它的产生出了自然发生外还可人工诱导。

诱导多倍体的方法有多种，本实验采用秋水仙素诱导。

它主要作用于细胞分裂过程中纺锤体的形成，使细胞分裂后期染色体不能分向两极而被阻截在中期，经过间期染色体复制，使染色体数目加倍。

1的比例配置，秋水仙素，1mol/L的HCl，石炭酸品红，水浴锅，显微镜，剪刀，矿泉水瓶，蒸馏水实验方法

1、生根与秋水仙素处理

采用水培法培养大蒜，直至根长约2.0cm。

向培养液中加入浓度为0.1％的秋水仙素，培养36～48h。

待根尖膨大时可取材固定。

2、固定、解离（同有丝分裂过程）

3、制片

取根尖分生组织一部分放在一洁净的载片上，先用解剖针把材料碾碎并铺展开，然后滴上一滴石炭酸品红染色5min，盖上盖片，进行压片。

通过以上实验方法，制取了图Ⅰ-3。

（a）（b）

图Ⅰ-3大蒜的染色体图（白点示着丝点）

图（a）：

2n=16，是未加倍的大蒜细胞中的染色体。

图（b）：

4n=32，是经秋水仙素加倍后的大蒜细胞染色体。

1、染色体加倍的倍数多少与秋水仙素作用的时间有关。

若让染色体数目加倍，秋水仙素处理的时间应大于等于细胞的一个分裂周期。

如果浸泡的时间大于细胞周期的二倍，则会出现八倍体。

若感兴趣，可适当延长处理时间，观察实验结果。

2、不应该观察到32条染色体就认定此细胞为四倍体，因为染色体为2n细胞的分裂后期染色体数也为32条，此时的染色体不含姐妹染色单体。

而染色体为4n的细胞中期，含有32对姐妹染色单体。

3、若大蒜根尖细胞被加倍，其尖端部膨大，是认定细胞加倍的理由之一。

4、大蒜根尖的固定时间在上午9：

5、解离的时间要适当，大约4min，因为解离时间的长短与实验结果的好坏有非常直接的影响，时间过长，则不仅破坏分生组织之间的果胶与纤维素等物质，也使分生组织与伸长区脱离，染色效果将会降低，而过短，则又达不到分离细胞的结果。

6、在切取根尖时大约切从根尖开始算往上1.5mm左右，若切得太短，则只会看到成熟的根冠细胞，在视野中看不到分裂期细胞；

7、染色时间不宜过长或过短，染色过深或过浅都会影响最终的实验结果。

8、压片时用拇指从上往下垂直用力且要避免载玻片与盖玻片之间的滑动，否则会使细胞之间重叠，影响观察。

9、观察时先用低倍镜找到分裂相的位置，再换高倍镜观察

专题二：

果蝇专题

实验一果蝇唾腺染色体的观察

果蝇（Drosophilamelanogaster）是研究遗传学的经典材料，它的染色体数目是2n=8，易于观察，尤其是果蝇三龄幼虫阶段的唾腺染色体，其唾腺染色体巨大，又称巨染色体。

本实验通过对果蝇唾腺染色体进行处理和观察来探求染色体的结构。

果蝇唾腺染色体

Drosophilamelanogasterisaclassicmaterialofstud