3年高考2年模拟1年原创备战高考系列之生物 专题41Word下载.docx

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指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

（2）关键：

防止外来杂菌的入侵。

（3）不同对象的无菌操作方法

3．大肠杆菌的纯化培养

（1）制备固体培养基：

计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。

（2）纯化大肠杆菌

①平板划线法：

是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

②稀释涂布平板法：

是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

4．菌种的保存方法

①对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法。

②对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。

二、微生物的利用

1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

（1）分离原理：

土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。

（2）统计菌落数目：

统计样品中的活菌一般用稀释涂布平板法。

（3）实验流程：

土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察→细菌的计数。

2．分解纤维素的微生物的分离

（1）纤维素酶

①组成：

纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。

②作用

（2）纤维素分解菌的筛选

①原理

②筛选方法：

刚果红染色法，即通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

③培养基：

以纤维素为唯一碳源的选择培养基。

④实验流程

土壤取样（富含纤维素的环境）→选择培养（用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度）→梯度稀释（制备系列稀释液）→涂布平板（将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上）→挑选产生透明圈的菌落。

考点透析

考点1　微生物的实验室培养

【典型例题】

微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒，以下理解不正确的是（　　）

A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子

B．任何消毒方法一般都不能消灭微生物的孢子和芽孢

C．灼烧法灭菌主要对象是金属器具，也可以是玻璃器具

D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法和紫外线灭菌法

【答案】D

【名师点睛】消毒和灭菌的辨析

项目

条件

结果

常用方法

应用范围

消毒

较为温和的物理或化学方法

仅杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物

煮沸消毒法

日常用品

巴氏消毒法

不耐高温的液体

化学药剂消毒法

用酒精擦拭双手，用氯气消毒水源

灭菌

强烈的理化因素

杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子

灼烧灭菌法

接种工具

干热灭菌法

玻璃器皿、金属工具

高压蒸汽灭菌法

培养基及容器的灭菌

【变式训练】

下图为实验室培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（　　）

A．步骤①中待培养基冷却后才能盖上培养皿盖

B．步骤④中接种环共需5次灼烧处理

C．将接种后的图④平板放入培养箱中培养时无需倒置

D．①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行

【答案】D

考点2　微生物的利用

选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。

利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。

为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为（　　）

A．伊红美蓝培养基、含青霉素培养基

B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基

C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基

D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基

【解析】酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不能抑制真菌生长。

硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。

【答案】B

【名师点睛】选择培养基的制作方法

（1）在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：

依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；

而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。

（2）通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：

培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；

培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。

（3）利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：

如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。

（4）通过某些特殊环境分离微生物：

如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；

在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。

某生物兴趣小组以带有落叶的表层土壤（深5cm左右）为实验材料，研究土壤微生物在适宜温度下的分解作用，对土壤处理情况见下表。

与此有关的叙述不正确的是（　　）

1组

2组

3组

4组

土壤处理

不灭菌

干燥程度

湿润

较干燥

A．探究的问题是不同土壤湿度条件下，土壤微生物对落叶的分解作用

B．该实验的自变量为土壤是否灭菌处理，实验中的对照组是1和3

C．为了控制实验中的无关变量，作为实验材料的落叶也应进行灭菌处理

D．预期结论是1、3组的落叶分解现象不明显，2、4组中的落叶被不同程度的分解

1．（2016年江苏卷，10）定量分析是科学研究的重要方法。

下列能用血细胞计数板直接计数的是（　　）

A．海拉细胞悬液B．浓缩培养的噬菌体C．自来水中大肠杆菌D．蛙卵

【答案】A

2．（2015年江苏卷，19）做“微生物的分离与培养”实验时,下列叙述正确的是（　　）

A.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖

B.倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上

C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落

D.用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上

【解析】高压灭菌加热结束时，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，打开盖子，如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内液体会冲出容器，造成污染，A错误；

倒平板时，培养皿盖打开一缝隙，不能放到一边，B错误；

接种时，接种环经火焰灭菌冷却后挑取菌落，不能趁热挑取，以免杀死微生物，C错误；

由于平板倒过来放置，则用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上，D正确。

3．（2016江苏卷，25）（多选）漆酶属于木质降解酶类，在环境修复、农业生产等领域有着广泛用途。

下图是分离、纯化和保存漆酶菌株的过程，相关叙述正确的是（　　）

A．生活污水中含有大量微生物，是分离产漆酶菌株的首选样品

B．筛选培养基中需要加入漆酶的底物，通过菌落特征挑出产漆酶的菌落

C．在涂布平板上长出的菌落，在通过划线进一步纯化

D．斜面培养基中含有大量营养物，可在常温下长期保存菌株

【答案】BC

4．（2014年天津卷，5）MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。

为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响实验，某兴趣小组的实验设计及结果如下表。

下列说法正确的是（　　）

组别

培养基中的添加物

MRSA菌

1

100μg/mL蛋白质H

生长正常

2

20μg/mL青霉素

3

2μg/mL青霉素+100μg/mL蛋白质H

死亡

A．细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的

B．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌

C．实验还需设计用2微克/mL青霉素做处理的对照组

D．蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素

【答案】C

5．（2016年新课标Ⅰ卷，39）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。

某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。

实验步骤如下：

①配置培养基（成分：

牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于_________________。

若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是_________________。

（2）步骤③中，实验组的操作是_________________。

（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_________________现象。

若将30（即36－6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_____________（填“正确”或“不正确”）。

【解析】

（1）依据配制培养基的成分可知：

该培养基中微生物所需的氮来源于牛肉膏、蛋白胨。

因为该实验是“用平板收集教室空气中的微生物”，所使用的培养基应为固体培养基，配制时，需加入凝固剂，据此推知：

该培养基中的成分X通常是琼脂。

（2）依题意可知，该实验的目的是：

用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。

所以步骤③中，实验组的操作是：

将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间，以收集教室不同高度空气中的微生物。

（3）设置的空白对照组，在整个实验过程中没有用来收集空气中的微生物，若空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，说明培养基的配制是不成功的，在此次调查中出现了污染现象，所以若将30（即36-6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法不正确。

【答案】

（1）牛肉膏、蛋白胨琼脂

（2）将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

（3）污染不正确

6．（2016年新课标Ⅲ卷，39）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。

分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用_________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是_______________。

（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有_________________和_________________。

分离纯化时应挑选出_________________的菌落作为候选菌。

（3）乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的_________________（填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”）。

（2）由题意可知，分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

由此