WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S操作规程Word文件下载.doc
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批准人：
术语说明
UPLC
UltraPerformanceLiquidChromatography
超高效液相色谱仪
Source
IonSource
离子源
TOF
TimeofFlight
飞行时间质谱
Quad
Quadrupole
四级杆
Fullscan
Scan
全扫描模式
目录
1. 目的 4
2. 适用范围 4
3. 设备、化学试剂、实验室备件 4
4. 仪器操作步骤 4
5. 维护保养 60
6. 记录 61
1.目的
规范WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S联用仪操作管理工作，确保技术人员对该仪器进行安全、熟练、高效、有序的操作。
2.适用范围
适用于WatersUPLCI-ClassSYNAPTG2-S的操作管理工作。
3.设备、化学试剂、实验室备件
3.1设备：
序号
设备名称
型号
1
安捷伦气相色谱
7890A
2
沃特世超高效液相色谱仪
WatersUPLCI-Class
3
沃特世四级杆-飞行时间质谱
WatersSYNAPTG2-S
3.2化学试剂：
亮脑啡肽（leucineenkephalin）：
CAS:
58822-25-6；
甲酸钠（NaFA）：
141-53-7
4.仪器操作步骤
4.1UPLCSYNAPTG2-S联用仪的开启
4.1.1打开电脑，输入用户名：
waters，密码：
waters。
4.1.2打开液相各个模块电源（没有顺序）。
4.1.3打开氮气发生器的电源，确认压力指示100psi；
打开氩气减压阀确认压力指示在7psi；
高分辨质谱还需打开氦气减压阀确认压力指示在7psi，此时关闭samplecone的isolationvalve。
4.1.4打开质谱电源开关，在质谱背面板右侧位置有四个黑色可以上下搬动的开关，按照从下到上的顺序依次将这四个开关搬到向上的位置。
4.1.5等待约5分钟，待仪器与电脑网络通讯连接好，双击桌面MasslynxV4.1图标，打开Masslynx软件，等待软件主窗口状态栏中部偏右位置出现NotScanning的信息。
4.1.6打开MSConsole窗口，左边栏依次选中SynaptG2QTOF/Intellistart，在右侧窗口中点击operate快捷图标。
（点击operate图标后应该能听到外置真空泵发出很大噪音，随后声音逐渐变小）
4.1.7打开MStune窗口，单击氩气的控制开关，关闭氩气。
等待右下角红色方块变为绿色，表明仪器可以工作了（通常这个过程需要7-8个小时。
可以从MStune/view/vacuum中观察真空度的变化，当TOF的真空度小于1.2e10-6时，右下角红色方块会变成绿色），此时可打开isolationvalve。
4.2液相系统的灌注
准备流动相，如用到缓冲盐流动相需用0.22μm的滤膜过滤，所有缓冲盐流动相和超纯水都要新配置，且使用不得超过两天；
所有样品都要用初始流动相来溶解，并用0.22μm的滤膜过滤。
在MassLynx软件主界面点击MassConsole图标，打开液相控制台窗口。
选择ACQUITYUPLCSystem界面下的Control/PrimeA/Bsolvents，分别灌注A1、B1和A2、B2流路3min；
然后选择ACQUITYUPLCSystem界面下的Control/PrimeSealWash，灌注SealWash流路，观察SealWash管路没有气泡后，点击PrimeSealWash，停止灌注SealWash；
选择ACQUITYUPLCSystem目录树的SampleManager，点击右侧的Control/Primesyringes，灌注进样针和洗针系统。
4.3新项目的建立
注：
如在已有的项目下进行试验，此步骤可以不做。
4.3.1在MassLynx主窗口选择File/ProjectWizard。
4.3.2当出现以下窗口时，点击Yes。
4.3.3输入项目名称，点击Next。
4.3.4选择Createusingexistingprojectastemplate，点击Browse，选择新建项目的模板，点击Next。
4.4.质谱质量数粗校
在MassLynx主界面点击MassTune图标进入MassTune界面，LockSprayFlowControl下的三个按钮功能从左至右依次为：
按设定流速进样、停止进样、灌注管路。
将实时校正液放在设置瓶号位置，点击灌注管路，排除气泡。
点击SprayerPosition设定挡板位置在LockSpray；
设定Reservoir为实时校正液瓶号位置（B）；
设定FlowState为Infusion模式；
设定InfusionFlowRate，通常为5μL/min；
点击按钮，进样，如图
4.4.1实时校正液（LE）进样，信号稳定后观察主峰的质量数，ES+时，（LE+H）+的准确质量数为556.2771，ES-时，（LE-H）-的准确质量数为554.2615，观察实测质量数与理论准确质量数的差别，如果其差值在±
0.1则可省去粗校步骤；
如果差值较大，进行粗校。
4.4.2点击MSTune主界面上部菜单的Setup，弹出下拉菜单，点击SystemView，在弹出的窗口输入密码：
access，点击OK，进入systemview模式。
4.4.3在systemview模式下点击上部菜单的System，弹出下拉菜单，点击AcquisitionSettings，弹出质量数粗校窗口，如图
4.4.4在质量数粗校窗口右侧，勾选CalculateandsetVeff，设定计算并设置Veff值；
ReferenceMass：
输入LE（实时校正液）在该模式下的准确质量数，MeasuredMass：
输入刚观察到的实际检测质量数，点击Calculate，然后点击Update，质量数粗校完成。
点击Close退出粗校窗口。
4.4.5在SystemView窗口点击上部菜单的Setup，弹出下拉菜单，点击SystemView，弹出系统参数保存窗口，点击保存BothTuningParametersandSystemSetting，点击OK退出SystemView模式。
4.5.质谱质量轴校正
4.5.1在MassLynx主界面点击MassTune图标，进入MassTune界面。
设置挡板位置SprayerPosition为Sample，设置SampleFlowControl参数，先将质量轴校正液NaFA放在对应位置，点击灌注图标排除管路气泡。
设定InfusionFlowRate，通常为5-10μL/min，FlowState为Infusion，Reservoir为校正液所放位置，灌注完成后点击进样按钮。
4.5.2在MassLynx主界面点击MassConsole图标，进入MassConsole界面，点击左边的目录树SYNAPTG2-S展开其目录，选中IntelliStart，点击右部菜单栏的Configure下拉菜单，单击ConfigureMode，选中CreateCalibration，单击界面右部的Start按钮，如图
4.5.3弹出校正文件编辑向导。
点击左下角CalibrationProfileEditor按钮，进入CalibrationProfileEditor界面，点击File\New，建立新的校正文件，输入校正文件名称，如图。
4.5.4编辑校正文件。
在MassRange右侧点击Edit按钮，编辑质量数范围，通常设定质量数范围50-1200Da，如图
4.5.5设定校正类型，通常选择自动校正，如图。
4.5.6点击正离子模式或负离子模式右下角的Edit键，编辑用于校正正离子模式或负离子模式校准物质，如图。
通常选择甲酸钠为质谱质量轴校正物质，编辑完成后如图，点击OK退出校正文件编辑界面。
4.5.7点击File\Exit，又出现校正文件编辑向导首页，此时选中的校正文件就是刚编辑好的校正文件，点击Next。
4.5.8校正设置。
此时选中的校正是正离子模式下灵敏度（Sensitivity）、分辨率（Resolution）、高分辨率（HighResolution）三种模式的质量轴校正，选择要做的模式，通过右边的勾去掉不需要模式下的校正；
当需要做不止一种模式的质量轴较正时最好分开做。
点击Next。
4.5.9校正数据采集参数设置，该界面可选择单级质谱模式或串联质谱模式；
如果选择了串联质谱模式（MSMS），需打开碰撞压并设置其能量，点击Next，如图
4.5.10校正液流路设置，选择TunePage，按照MSTune界面的参数设置进样。
4.5.11设置校正文件可接受标准，选择ppm，在Threshold（ppm）输入1，表示各个质量数的允许残差为1ppm。
点击Next，出现准备校正窗口，点击Start开始校正，如图
4.5.12校正完成后自动弹出校正报告，显示Pass，表明校正通过。
4.5.13校正完成后，到MSTune点击NaFA停止进样图标停止进样。
4.6.实时校正离子源优化
4.6.1在MassLynx主界面点击MassTune图标，进入MassTune界面，设置LockSprayFlowControl参数。
先将实时校正液LE放在对应位置，点击灌注图标排除管路气泡。
设定SprayerPosition为LockSpray，设定InfusionFlowRate，通常为5μL/min，FlowState为Infusion，Reservoir为实时校正液所放位置，灌注完成后点击进样按钮。
4.6.2与质谱质量轴校正相同，在MassConsole界面的ConfigureMode模式下，点击LockSpraySourcesetup，点击右部的Start按钮，进入到LockSpraySourcesetup编辑向导，点击Next进入LockSpraySourcesetup编辑窗口，点击Next。
4.6.3在此页面点击左下部的LockSprayProfileEditor，编辑实时校正文件，弹出LockMassEditor窗口，点击File/New，建立新的实时校正文件。
4.6.4实时校正文件编辑窗口，如图。
在此页面编辑实时校正文件的名称，设定实时校正的参考物质（通常实时校正参考物质为LE），设定质谱模式（单质谱或串联质谱），设定正离子模式或负离子模式，选择相
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