高中生物实验试剂归纳.docx

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高中生物实验试剂归纳

高中生物实验试剂归纳

 1、斐林试剂：

 成分：

0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。

用法：

将斐林试剂甲液和乙液等体积混合，再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热，如待测液中存在还原糖，则呈砖红色。

 2、班氏糖定性试剂：

为蓝色溶液。

和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。

用于尿糖的测定。

 3、双缩脲试剂：

成分：

0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。

用法：

向待测液中先加入2ml甲液，摇匀，再向其中加入3~4滴乙液，摇匀。

如待测中存在蛋白质，则呈现紫色。

 4、苏丹Ⅲ：

用法：

取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中，摇匀。

用于检测脂肪。

可将脂肪染成橘黄色（被苏丹Ⅳ染成红色）。

 5、二苯胺：

用于鉴定DNA。

DNA遇二苯胺（沸水浴）会被染成蓝色。

 6、甲基绿：

用于鉴定DNA。

DNA遇甲基绿（常温）会被染成蓝绿色。

 7、50%的酒精溶液：

在脂肪鉴定中，用苏丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。

 8、75%的酒精溶液：

用于杀菌消毒，75%的酒精能渗入细胞内，使蛋白质凝固变性。

低于这个浓度，酒精的渗透脱水作用减弱，杀菌力不强；而高于这个浓度，则会使细菌表面蛋白质迅速脱水，凝固成膜，妨碍酒精透入，削弱杀菌能力。

75％的酒精溶液常用于手术前、打针、换药、针灸前皮肤脱碘消毒以及机械消毒等。

 9、95%的酒精溶液：

冷却的体积分数为95%的酒精可用于凝集DNA。

 10、15%的盐酸：

和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖。

 11、龙胆紫溶液：

（浓度为0.01g/ml或0.02g/ml）

用于染色体着色，可将染色体染成紫色，通常染色3~5分钟。

（也可以用醋酸洋红染色）

 12、20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁：

用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。

（新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶）

 13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液：

用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。

 14、碘液：

用于鉴定淀粉的存在。

遇淀粉变蓝。

 15、丙酮：

用于提取叶绿体中的色素。

 16、层析液：

（成分：

20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成，也可用93

号汽油）

可用于色素的层析，即将色素在滤纸上分离开。

 17、二氧化硅：

在色素的提取的分离实验中研磨绿色叶片时加入，可使研磨充分。

 18、碳酸钙：

研磨绿色叶片时加入，可中和有机酸，防止在研磨时叶绿体中的色素受破坏。

 19、0.3g/mL的蔗糖溶液：

相当于30%的蔗糖溶液，比植物细胞液的浓度大，可用于质壁分

离实验。

 20、0.1g/mL的柠檬酸钠溶液：

与鸡血混合，防凝血。

 21、氯化钠溶液：

①可用于溶解DNA。

当氯化钠浓度为2mol/L、0.015mol/L时DNA的溶解度最高，在氯化钠浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最高。

②浓度为0.9%时可作为生理盐水。

 22、胰蛋白酶：

用来分解蛋白质；②可用于动物细胞培养时分解组织使组织细胞分散。

 23、秋水仙素：

人工诱导多倍体试剂。

用于萌发的种子或幼苗，可使染色体组加倍，原理是可抑制正在分裂的细胞纺锤体的形成。

24、氯化钙：

增加细菌细胞壁的通透性（用于基因工程的转化，使细胞处于感受态）

双缩脲试剂鉴定蛋白质紫色

 斐林试剂鉴定还原糖砖红色沉淀

 碘液鉴定淀粉蓝色

 苏丹三鉴定脂肪橘黄色

 苏丹四鉴定脂肪红色

 龙胆紫/醋酸洋红染色体染色

 甲基绿染DNA 

吡啰红染RNA 

健那绿染线粒体

 一、常用仪器、试剂或药品的用途 

　　1、NaOH：

用于吸收CO2或改变溶液的pH 

　　2、Ca（OH）2：

鉴定CO2 

　　3、CaCl2：

提高细菌细胞壁的通透性 

　　4、HCl：

解离（15%）或改变溶液的pH 

　　5、NaHCO3：

提供CO2、作为酸碱缓冲剂 

　　6、酸碱缓冲剂（Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4）：

用于调节溶液pH 

　　7、NaCl：

配制生理盐水（0.9%）或用于提取DNA（0.14M或2M） 

　　8、琼脂：

激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基 

　　9、酒精：

用于消毒（75%）、提纯DNA（95%）、叶片脱色、配制解离液（95%的冷酒精）及洗去浮色（50%） 

　　10、蔗糖：

配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原

　　11、二苯胺：

用于DNA的鉴定（沸水浴，蓝色） 

　　12、甲基绿：

检测DNA，呈绿色 

　　13、吡罗红：

检测RNA，呈红色 

　　15、斐林试剂（甲液0.1g/mL NaOH、乙液0.05g/mLCuSO4）/班氏试剂：

鉴定可溶性还原性糖（沸水浴，砖红色沉淀） 

　　16、双缩脲试剂：

用于蛋白质的鉴定（紫色） 

　　17、苏丹Ⅲ染液（橘黄色）和苏丹Ⅳ染液（红色）：

用于脂肪鉴定 

　　18、碘液：

用于鉴定淀粉（变蓝色） 

　　19、龙胆紫溶液或醋酸洋红：

碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色 

　　20、改良苯酚品红染液：

检测染色体，红色 

　　21、健那绿B：

检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色 

　　22、重铬酸钾溶液：

检测酒精，呈灰绿色 

　　23、溴麝香酚蓝水溶液：

检测CO2，由蓝变绿再变黄 

　　24、吲哚酚试剂：

用于维生素C的鉴定 

　　25、伊红美蓝：

鉴定有无大肠杆菌的存在 

　　26、亚甲基蓝：

用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌（细菌的氧化可使之褪色） 

　　27、pH试纸：

检验物质的酸碱性，如乳酸 

　　28、卡诺氏固定液：

用于细胞有丝分裂根尖的固定 

　　29、解离液（5%盐酸和95%酒精按1：

1的比例配成）：

有丝分裂中根尖的分离与固定 

　　30、层析液：

用于叶绿素的分离，主要类型：

①由20份石油醚（在60～90℃下分馏出来的）、2份丙酮和1份苯混合而成；

②95%的酒精；③93号汽油；④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合；⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

　　31、20%新鲜肝脏研磨液：

含有H2O2酶，可促进H2O2分解产生O2 

　　32、无土营养液：

用于植物无土栽培 

　　33、柠檬酸钠：

血液抗凝剂 

　　35、秋水仙素（C22H25O6N）：

用于单倍体育种，作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成，可导致细胞内染色体数目加倍。

是1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。

它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。

　　36、滤纸：

过滤或纸层 

　　37、纱布、尼龙布：

过滤，遮光 

　　38、云母片：

阻止生长素传递 

　　39、微电流计：

测量神经元受刺激时，神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况 

　　二、实验技术 

　      　2、临时装片、切片和涂片的制作：

适用于显微镜观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片和涂片，如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片，在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制作花生种子的切片，在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等等。

　　       4、解离技术：

适用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片。

　　5、恒温技术：

适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱，根据题目要求选用。

　　6、层析技术：

适用于溶液中物质的分离。

主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、层析分离等。

　　7、植物叶片中淀粉的鉴定：

适用于光合作用的有关实验，主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。

　　8、根尖培养技术：

有丝分裂实验的材料

　　9、小动物饲养技术：

饲养小白鼠等实验动物

　　10、无土栽培技术：

用于植物必需元素与非必需元素的鉴定

　　11、微电流测量技术：

用于刺激神经元细胞时，兴奋的传递情况。

刺激神经元的某一点时，相对于该神经元的刺激点而言，其两侧均有电位变化（用两表则可在两侧任意位置，用一表测定则相对于受刺激点不等距位置有两次偏转）可证明在同一神经元内具有双向传递性；刺激突触前神经元时，突触后神经元可测得电位变化，刺激突触后神经元时，突触前神经元测不到电位变化，可证明突触传递具有单向传递性。

　　12、pH控制技术：

利用缓冲液调节pH，确保实验环境的pH相对稳定。

　　三、实验方法

　　1、显微观察法：

如“观察细胞有丝分裂”“观察叶绿体和细胞质流动”“用显微镜观察多种多样的细胞”等。

　　2、观色法：

如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”“观察动物毛色和植物花色的遗传”“DNA和RNA的分布”等。

　　3、同位素标记法（元素示踪法）：

如“噬菌体浸染细菌的实验”“恩格尔曼实验”等。

　　4、补充法：

如用饲喂法研究甲状腺激素，用注射法研究动物胰岛素和生长激素，用移植法研究性激素等。

　　5、摘除法：

如用“阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素或生长激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在发育着的种子”等。

　　6、杂交法：

如植物的杂交、测交实验等。

　　7、化学分析法：

如“番茄对Ca和Si的选择吸收”“叶绿体中色素的提取和分离”等。

　　8、理论分析法：

如“大、小两种草履虫的竞争实验”“植物向性动物的研究”等。

　　9、模拟实验法：

如“渗透作用的实验装置”“分离定律的模拟实验”等。

　　10、引流法：

临时装片中液体的更换，用吸水纸在一侧吸引，于另一侧滴加换进的液体。

　　11、实验条件的控制方法

　　⑴增加水中O2：

泵入空气或吹气或放入绿色植物；

　　⑵减少水中O2：

容器密封或油膜覆盖或用凉开水；

　　⑶除去容器中CO2：

NaOH溶液、Na2CO3溶液；

　　⑷除去叶中原有淀粉：

置于黑暗环境（饥饿）；

　　⑸除去叶中叶绿素：

酒精水浴加热（酒精脱色）；

　　⑹除去植物光合作用对呼吸作用的干扰：

给植株遮光；

　　⑺单色光的获得：

棱镜色散或透明薄膜滤光；

　　⑻血液抗疑：

加入柠檬酸钠（去掉血液中的Ca2+）；

　　⑼线粒体提取：

细胞匀浆离心；

　　⑽骨无机盐的除去：

HCl溶液；

　　⑾消除叶片中脱落酸的影响：

去除成熟的叶片；

　　⑿消除植株本身的生长素：

去掉生长旺盛的器官或组织（芽、生长点）；

　　⒀补充植物激素的方法：

涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体；

　　⒁补充动物激素的方法：

口服（饲喂）、注射；

　　⒂阻断植物激素传递：

插云母片法。

　　12、实验结果的显示方法——实验现象的观测指标

　　⑴光合作用：

O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。

例：

水生植物可依气泡的产生量或产生速率；离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；植物体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅。

　　⑵呼吸作用：

O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量

　　⑶原子或分子转移途径：

同位素标记法或元素示踪法

　　⑷细胞液浓度大小或植物细胞活性：

质壁分离与复原

　 ⑸溶液浓度的大小：

U型管+半透膜

　　⑹甲状腺激素作用：

动物耗氧量、发育速度等

　　⑺生长激素作用：

生长速度（体重、体长变化）

　　⑻胰岛素作用：

动物活动状态（是否出现低血糖症状——昏迷）

　　⑼胰高血糖素作用：

尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀）

　　⑽菌量的多少：

菌落数、亚甲基蓝褪色程度

　　⑾生长素作用及浓度高低的显示：

可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断（弯曲、高度）

　　⑿淀粉：

碘液（变蓝色）

　　⒀还原性糖：

斐林试剂/班氏试剂（沸水浴后生成砖红色沉淀）

　　⒁CO2：

Ca（OH）2溶液（澄清石灰水变浑浊）

　　⒂乳酸：

pH试纸

　　⒃O2：

余烬复燃

　　⒄蛋白质：

双缩脲试剂（紫色）

　　⒅脂肪：

苏丹Ⅲ染液（橘黄色）；苏丹Ⅳ染液（红色）

　　⒆DNA：

二苯胺（沸水浴，蓝色）、甲基绿（染色后，呈绿色）

　　⒇RNA：

吡罗红（呈红色）、苔黑酚乙醇溶液

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