细菌霉菌及酵母菌计数方法验证.docx
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细菌霉菌及酵母菌计数方法验证
有限公司GMP管理文件
题目
细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证
制定
审核
批准
制定日期
审核日期
批准日期
颁发部门
GMP办
颁发数量
生效日期
分发单位
企管部、质保部、生产部、工程部
文件编码
共14页第1页
一、U的：
当建立微生物限度检查法时，应进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。
二、适用范圉：
细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。
三、责任者：
质量标准分析方法验证小组。
四、正文：
1、验证申请
2、验证立项申请表
3、验证方案
4、验证方案的批复
5、验证报告
6、验证报告的审批
、验证证书7・
文件编码第2页细菌.霉菌及酵母菌计数方法验证申请
细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证申请。
我公司细菌、霉菌及酵母菌讣数方法严格按照《中华人民共和国兽药典》2005年版质量标准分析方法验证指导原则进行，今拟对细菌、霉菌及酵母菌计数方法进行验证。
请予以批准！
附：
细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证小组成员名单
组长：
成员:
申报单位：
质量标准分析方法验证小组
申报日期：
年月日
文件编码第3页
验证申请批复
立项部门
申请日期
立项题目
要求完成日期
验证原因
类别
验证要求及目的
立项部门负责人签名：
主管部门意见
日年月签名：
验证部门意见
日签名：
年月
总经理意见
日月年签名：
指定编制验证方案的部门：
编制验证方案要求：
验证完成要求及日期：
总经理签名：
年月日
备注：
文件编码第4页
细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证方案
—、概述：
1、名称：
微生物限度检查法细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证报告。
2、H的：
当建立微生物限度检查法时，应进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。
3、验证判断标准：
《中华人民共和国兽药典》2003年版附录乂叮
4、验证人员：
质保部：
负责对验证结果进行评价。
化验室：
负责验证情况的检测和监督。
总经理：
负责对验证结果进行评价。
5、验证日期：
二.验证
1、验证依据：
《中华人民共和国兽药典》2005年版附录XIJ微生物限度检查法。
按供试液的制备和细菌霉菌及酵母菌计数所规定的薄膜过滤法及其有关要求进行。
2、内容:
（1）菌液所用的菌株传代次数为3代，接种大肠埃希菌，金黃色葡萄球菌，枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，培养24小时，
接种口色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，培养48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每lml含菌数为60cfu的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养7天，加入5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱。
然后吸出泡子悬液（用管口带有薄的无菌沙布能过滤菌丝的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每51含泡子数60cfu的抱子悬液。
（2）验证方法验证试验进行了3次独立的平行试验。
A、试验组供试液
（1）纯化水lml（II）药品名称（1：
100）10g,取供试液试验菌。
60cfu过滤冲洗，在最后一次冲洗液中加入lml
5页第文件编码
测括所加试验菌数。
B、菌液组，按菌落数据计数方法测定供试lml）取相
当于供试品lgC供试品对照组
品本底菌数。
无菌氯化钠，加入试验菌，使最终菌浓0・9%、稀释剂对照组用相应稀释液D,按薄膜过滤法制备计菌落数。
1ml供试液60cfu度为每
（1）纯化水C组回菌回项UD组菌稀释剂对照对照供试品收率菌液组B
%收率％试验组A
DC组组（A-C）/B
D/B
菌株3
1231232312170事大肠$70
埃希菌平均：
702金黄色270葡萄球菌平均：
702枯草芽抱M70
杆菌平均：
70白色念珠R70
平均：
菌
70
>70
黑曲霉M平均：
6页第文件编码
（II）产品名称回组菌D组菌项收率照对回收品对照稀释剂供试B试验组A
菌液组（A-C）/B
%组菌株C
组D
率D/B
大肠70
2270
埃希菌平均：
金黄色70
7022平均：
葡萄球菌枯草芽抱70
"70杆菌平均：
白色念珠70
R70菌平均：
70
黑曲霉$70M平均：
作为阴依薄膜过滤法操作，无菌氯化钠1IU1,以上试验同时取试验用稀释液0.9%性对照试验，均应无菌生长。
）验证方案的实施情况，及偏差情况分析。
（3验证方案应进行严格细致精密认真的实施，根对于细菌霉菌及酵母菌讣数方法
据统计结果，数据基本上应在允许偏差范用。
4）培训：
所有参与的人员在开始验证前应作充分的培训。
（）结果判断（5（稀释剂对3次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率，由上表可知，在7第页文件编码试验组的菌回收，70%应均不低于照组的平均菌落数占菌液组的平均菌落数的白分率）.
率（试验组的平均菌落数减去供试品对照组的平均菌落数的值占菌液组的平均菌落数
的白分率）应均大于70亂则按该验证供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌霉菌及酵母菌数。
（6）再验证
当建立药品的微生物限度检查法时，进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。
若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，计数方法应重新验证。
页8第文件编码.
验证方案批复
验证方案名称
验证方案起讫日期
验证工作
负责验证部门
人员
参加部门
人员
参加部门
人员
参加部门
人员
检验部门
人员
验证方案概要
结论年月日验证小组
负责人
验证小组成员会签
生产使用部门意见
负责人日月年
验证管理部门意见月年负责人
日
总经理意见
年日月
备注
文件编码页9第
细菌.霉菌及酵母菌计数方法验证报告
—、概述：
1、名称：
微生物限度检查法细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证报告。
2、H的：
当建立微生物限度检查法时，应进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。
3、验证判断标准：
《中华人民共和国兽药典》2003年版附录乂叮
4、验证人员：
质保部：
负责对验证结果进行评价。
化验室：
负责验证情况的检测和监督。
总经理：
负责对验证结果进行评价。
5、验证日期：
二.验证
1、验证依据：
《中华人民共和国兽药典》2005年版附录XIJ微生物限度检查法。
按供试液的制备和细菌霉菌及酵母菌计数所规定的薄膜过滤法及其有关要求进行。
2、内容:
（1）菌液所用的菌株传代次数为3代，接种大肠埃希菌，金黃色葡萄球菌，枯草芽抱杆菌的新鲜培养物至营养琼脂培养基中，培养24小时，
接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁琼脂培养基中，培养48小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每lml含菌数为60cfu的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基中，培养7天，加入5ml0.9%无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱。
然后吸出抱子悬液（用管口带有薄的无菌沙布能过滤菌丝的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每lml含泡子数60cfu的泡子悬液。
（2）验证方法验证试验进行了3次独立的平行试验。
A试验组供试液（I）纯化水lml（H）药品名称（1：
100）10g,取供
页10第文件编码.
60cfu试验菌。
试液lml过滤冲洗，在最后一次冲洗液中加入测定所加试验菌数。
B菌液组，按菌落数据计数方法测定供试品lml）取相当于供试品lg（C供试品对照组
本底菌数。
无菌氯化钠，加入试验菌，使最终菌浓度0.9%稀释剂对照组用相应稀释液D,按薄膜过滤法制备计•菌落数。
lml供试液60cfu为每
（1）纯化水回组菌D组菌C项目
%
收回收率稀释剂对照供试品对照B
A
试验组菌液组（A-C）/B
C
组D
率％组菌株D/B
3
1
2
3
1
2
3
1
2
31
2
大肠73.335083.335251505196969760606052埃希菌50
60
52
平均96
52
525454526097金黄色979660605371.67
80.6797
平均52
葡萄球菌60
54
505052506060605152枯草芽抱96969673.33
83.3350
96
平均60
52
杆菌52525152525296白色念珠939560606086.6771.67
52
52
平均菌95
60
96969660606053535251505185.00黑曲霉71.67
51
6053
96
平均
页文件编码11第
（II）药品名称回C组菌D组项目％
收率照回收对品照稀释剂对供试B
菌液组试验组A
（A-C）/B
%菌株组C
组D
率D/B
3
1
2
3
1
2
1
2
3
1
2
3
大肠85.0086.67515260383838528989886060埃希菌52
38
89
60
平均50
505040606041金黄色419190916083.33
83.3391
平均60
41
50
葡萄球菌50515138393989枯草芽抱898960606083.00
85.0051
89
60
39
杆菌平均5252373852888860606038白色念珠8883.33
86.6752
38
菌平均88
60
50505160394039609089896083.33
83.33黑曲霉50
90
60
40
平均
作为阴依薄膜过滤法操作，无菌氯化钠lml,0.9%以上试验同时取试验用稀释液性对照试验，均无菌生长。
）验证方案的实施情况，及偏差情况分析。
（3验证方案进行了严格细致精密认真的实施，根对于细菌霉菌及酵母菌讣数方法据统计结果，数据基本上在允许偏差范圉。
4）结论：
（（稀释剂对3次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率，山上表可知，在试验组的菌回收率均不低于70%,照组的平均菌落数占菌液组的平均菌落数的百分率）页第12文件编码（试验组的平均菌落数减去供试品对照组的平均菌落数的值占菌液组的平均菌则按该验证供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌霉，均大于落数的白分率）70%菌及酵母菌数。
・
结论人：
SWJ：
批准人：
日期：
（5）再验证
当建立药品的微生物限度检查法时，进行细菌霉菌及酵母菌计数方法的验证，以确认所采用的方法适合于该药品的细菌霉菌及酵母菌数的测定。
若药品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，计数方法应重新验证。
文件编码页13第
验证报告批复
验证项目
升级会员 